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简单快速!基于诺奖原理的RNA合成检测试剂盒来啦!

RNA的生物合成有两种方式:RNA转录RNA复制。在生物中,大部分遗传信息都是以DNA为模板,以四种核糖核苷酸为原料,在RNA聚合酶催化下以转录形式传递的。仅有少数的RNA病毒是以RNA复制的方式传递遗传信息的。作为重要的遗传信息传递过程,RNA合成研究非常重要。近期,碧云天新上架了基于2022年诺贝尔化学奖-“点击化学”原理的BeyoClick™系列RNA合成检测试剂盒,帮您简单、快速、高灵敏地检测新合成RNA!

产品效果
如下图,EU孵育2小时后检测,无EU组观察不到明显荧光(最左侧一列);EU (1mM)组有较强的绿色(488)/红色(555)荧光(中间一列);而用RNA合成抑制剂Actinomycin D (1μM)提前预处理0.5小时后,荧光显著减弱,说明RNA合成抑制后,EU的掺入被显著抑制(最右侧一列)。

图1.碧云天BeyoClick™EU-488 RNA合成检测试剂盒(R0301)检测HeLa细胞新合成RNA的效果图。

图2.碧云天BeyoClick™EU-555 RNA合成检测试剂盒(R0305)检测HeLa细胞新合成RNA的效果图。

产品原理
该系列产品是一种基于RNA合成过程中尿嘧啶核苷(Uridine)类似物EU (5-ethynyl-uridine)的掺入,并通过随后的点击反应(Click reaction)使EU被Alexa Fluor 488(绿色荧光)Azide Alexa Fluor 555(红色荧光)、Azide Alexa Fluor 594(红色荧光)Azide Alexa Fluor 647(远红外荧光)所标记,从而实现简单、快速、高灵敏地检测新合成RNA的试剂盒。
EU (5-ethynyl-uridine),中文名为5-炔基尿苷,是一种新型尿嘧啶核苷(Uridine)类似物,EU可以在RNA合成过程中替代尿苷掺入到新合成的RNA中。另一方面,EU上的乙炔基能与荧光标记的小分子叠氮化物探针(如Azide Alexa Fluor 488、Azide Alexa Fluor 555、Azide Alexa Fluor 594、Azide Alexa Fluor 647等)通过一价铜离子的催化发生共价反应,形成稳定的三唑环,该反应非常迅速高效,被称作点击反应(Click reaction),其反应原理参见图1。通过点击反应,新合成的RNA会被相应的荧光探针所标记,从而可以使用适当的荧光检测设备检测到新合成RNA。

图3.碧云天BeyoClick™系列RNA合成检测试剂盒中的点击反应(Click reaction)原理图。荧光探针等标记的叠氮化物(Labeled Azide)与掺入到细胞RNA中的EU,在铜离子的催化发生共价反应,形成稳定的三唑环,最终使细胞RNA标记上荧光探针或其它探针。

产品特点
反应简单、检测灵敏度高:本试剂盒基于简单高效的点击反应,无需特殊温度,只需少量的小分子叠氮化物探针即可非常有效地标记掺入的EU,并且可以检测到单个细胞的RNA合成情况;
使用便捷、兼容性好:本试剂盒只需常用的多聚甲醛固定和Triton X-100穿透,就可以使叠氮化物探针有效进入细胞并发生点击反应,不会影响细胞形态,不会产生多余的附加产物,不会影响基于抗体的免疫荧光和免疫组化检测,也不会影响DNA的荧光染色(如PI染色检测细胞周期、DAPI或Hoechst染料检测细胞核等);
检测快速:本试剂盒采用的BeyoClick™ EU法检测新合成的RNA仅需1.5-2小时。

产品信息:

产品编号 产品名称 包装 产品价格
R0301 BeyoClick™ EU-488 RNA合成检测试剂盒 50-500次/200-2000次 /
R0305 BeyoClick™ EU-555 RNA合成检测试剂盒 50-500次/200-2000次 /
R0309 BeyoClick™ EU-594 RNA合成检测试剂盒 50-500次/200-2000次 /
R0311 BeyoClick™ EU-647 RNA合成检测试剂盒 50-500次/200-2000次 /