来源
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用途
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交叉反应性
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抗体类型
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分子量
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Rabbit
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WB, IP
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H, M, R
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IgG
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78~82kD,95kD
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WB, Western blot; IP, Immunoprecipitation.
H, human; M, mouse; R, rat.
本Phospho-FoxO1(Thr24)/FoxO3a(Thr32)抗体(Phospho-FoxO1(Thr24)/FoxO3a(Thr32)antibody)为进口分装,用人工合成的含磷酸化Thr28的一段人FoxO4多肽进行适当修饰后免疫rabbit,然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化得到的高纯度抗体。
本Phospho-FoxO1(Thr24)/FoxO3a(Thr32)抗体可以检测内源性的Thr24被磷酸化的FoxO1或Thr32位磷酸化的FoxO3a,也可检测内源性的Thr28被磷酸化的FoxO4。不识别其它位点磷酸化的FoxO1。
转录因子Forkhead家族蛋白与横纹肌肉瘤、急性白血病等肿瘤发生有关。该转录因子蛋白家族中的FoxO1,FoxO4和
FoxO3a,和线虫同源蛋白DAF-16的序列高度相似,介导了包括IGFR1,PI3K和Akt在内的信号转导通路。Forkhead家族蛋白激活后,可通过促进细胞周期阻滞(cell cycle arrest)和细胞凋亡而抑制肿瘤。高表达Forkhead家族蛋白会导致细胞周期抑制蛋白p27Kip1的激活。同时Forkhead家族蛋白在TGF-β介导的p21CIP1上调中起作用,而该过程又可被PI3K所负调控。胰岛素等诱导的增殖信号会导致FoxO蛋白通过Akt介导的Thr24、Ser256和Ser319位点的磷酸化,导致FoxO从细胞核中转运到细胞浆中,从而抑制其转录活性。FoxO还可以被Sirt1、p300等进行乙酰化调控。
FoxO1,也称FoxO1a、FKH1或FKHR,属于Forkhead蛋白家族中的O亚家族(O subclass),对于机体正常生长发育是必需的。研究表明,FoxO1参与多种多样的细胞功能,包括长寿、代谢、繁殖、胰岛素调节、细胞周期、凋亡和应激反应等。FoxO1参与通过PI3K信号通路的生长信号应答。FoxO1三个保守的serine/threonine位点被Akt磷酸化后,可导致其从细胞核向细胞浆转运和基因转录活性的抑制。
配套提供了Western一抗稀释液,可以用于Western检测时的一抗稀释。
建议抗体使用时的稀释比例如下(实际使用时需根据抗原水平的高低作适当调整):
本抗体如果用于常规的Western检测,至少可以检测20次。
包装清单:
产品编号
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产品名称
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包装
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AF605-1
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Phospho-FoxO1(Thr24)/FoxO3a(Thr32)抗体(兔多抗)
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20μl
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AF605-2
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Western一抗稀释液
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20ml
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说明书
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1份
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保存条件:
Phospho-FoxO1(Thr24)/FoxO3a(Thr32)抗体-20℃保存,Western一抗稀释液-20℃或4℃保存,一年有效。Western一抗稀释液优先推荐4℃保存,长期不使用可以考虑-20℃保存,但冻融可能会导致出现轻微的浑浊和少量不溶物。
注意事项:
对于本抗体,Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜,如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。
在Western实验后,请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,4℃保存。
回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。