产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
D2705-1μg | pCMV-N-DsRed (红色荧光蛋白) | 1μg | 888.00元 |
D2705-100μg | pCMV-N-DsRed (红色荧光蛋白) | 100μg | 1169.00元 |
pCMV-N-DsRed是碧云天自行研发的哺乳动物细胞表达质粒,用于表达N端含DsRed (Discosoma sp. red fluorescent protein,香菇珊瑚红色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子,可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的前面有一个DsRed的完整编码序列,并且在DsRed前面加入Kozak序列,因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达N端含有DsRed标签的融合蛋白。利用DsRed的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达水平和细胞内定位,也可以利用DsRed抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。DsRed与GFP没有序列同源性,不能使用GFP抗体检测DsRed。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
pCMV-N-DsRed质粒的主要信息如下:
Feature Nucleotide | Position |
CMV promoter | 1-602 |
T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
Kozak sepuence | 671-676 |
DsRed | 677-1351 |
Multiple cloning site | 1352-1417 |
T7 promoter and T7 primer binding site | 1460-1482 |
SV40 polyA signal | 1495-1877 |
f1 origin of ss-DNA replication | 2015-2319 |
bla promoter | 2344-2463 |
SV40 promoter | 2488-2826 |
Neomycin/kanamycin resistance ORF | 2861-3653 |
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 3654-4111 |
pUC origin | 4238-4904 |
pCMV-N-DsRed质粒(4959bp)的图谱如下:
pCMV-N-DsRed质粒的详细图谱见说明书:https://www.beyotime.com/Manual/D2705 pCMV-N-DsRed.pdf。
pCMV-N-DsRed中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-N-DsRed)包括:
AclI | AflII | AscI | AsiSI | BaeI | BbvCI | BcgI | BlpI |
BmgBI | Bpu10I | BsiWI | BsmBI | BspEI | BspQI | BssHII | BstXI |
BstZ17I | EarI | EcoNI | Esp3I | FseI | NotI | NruI | PmeI |
PmlI | PpuMI | PshAI | PspXI | SacII | SapI | ScaI | SgrAI |
SmaI | SrfI | SwaI | TspMI | XcmI | XmaI | XmnI |
pCMV-N-DsRed中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-N-DsRed once)包括:
AccI | GT`MK,AC | 1383 | KasI | G`GCGC,C | 2988 |
AgeI | A`CCGG,T | 664 | MfeI | C`AATT,G | 1741 |
AhdI | GACNN,N`NNGTC | 856 | MluI | A`CGCG,T | 1877 |
AleI | CACNN|NNGTG | 1304 | MscI | TGG|CCA | 3071 |
ApaI | G,GGCC`C | 1416 | NarI | GG`CG,CC | 2989 |
ApaLI | G`TGCA,C | 4593 | NdeI | CA`TA,TG | 240 |
BamHI | G`GATC,C | 1352 | NheI | G`CTAG,C | 597 |
BbsI | GAAGACNN`NNNN, | 1097 | PaeR7I | C`TCGA,G | 1394 |
BclI | T`GATC,A | 1648 | PciI | A`CATGT | 4907 |
BmtI | G,CTAG`C | 601 | PflFI | GACN`N,NGTC | 3107 |
BsaI | GGTCTCN`NNNN, | 3978 | PflMI | CCAN,NNN`NTGG | 1258 |
BspDI | AT`CG,AT | 2829 | PluTI | G,GCGC`C | 2992 |
BsrDI | GCAATG,NN` | 3222 | PspOMI | G`GGCC,C | 1412 |
BsrGI | T`GTAC,A | 1215 | PvuI | CG,AT`CG | 1494 |
BstBI | TT`CG,AA | 3671 | RsrII | CG`GWC,CG | 3505 |
BstEII | G`GTNAC,C | 817 | SacI | G,AGCT`C | 655 |
BtsI | GCAGTG,NN` | 1830 | SalI | G`TCGA,C | 1382 |
ClaI | AT`CG,AT | 2829 | SbfI | CC,TGCA`GG | 1017 |
CspCI | ,NN`(N)11CAA(N)5GTGG(N)10,NN` | 382+417 | SfiI | GGCCN,NNN`NGGCC | 2764 |
EagI | C`GGCC,G | 2895 | SfoI | GGC|GCC | 2990 |
Eco53kI | GAG|CTC | 653 | SnaBI | TAC|GTA | 346 |
EcoRI | G`AATT,C | 1370 | SpeI | A`CTAG,T | 1406 |
EcoRV | GAT|ATC | 1378 | Tth111I | GACN`N,NGTC | 3107 |
HindIII | A`AGCT,T | 1358 | XbaI | T`CTAG,A | 1400 |
HpaI | GTT|AAC | 1754 | XhoI | C`TCGA,G | 1394 |
pCMV-N-DsRed质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
N-DsRed primer (1298-1317): 5'- TACACCGTGGTGGAGCAGTA -3'
T7 primer (1461-1482): 5'- GTAATACGACTCACTATAGGGC -3'
pCMV-N-DsRed的全序列信息请参考碧云天的网站上该质粒的信息。
pCMV-N-DsRed质粒转染细胞后的表达效果请参考图1。
图1. pCMV-N-DsRed质粒转染细胞后的表达效果图。左侧为明场照片,右侧为荧光照片。
包装清单:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D2705-1μg | pCMV-N-DsRed (红色荧光蛋白) | 1μg |
D2705-100μg | pCMV-N-DsRed (红色荧光蛋白) | 100μg |
— | 说明书 | 1份 |
保存条件:
-20℃保存。
注意事项:
本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
1. 首次使用1µg包装的本产品时,请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. 100µg包装的本产品质粒浓度为0.1µg/µl,共1ml。可以直接用于酶切或者转染细胞。
3. pCMV-N- DsRed质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
相关产品:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D2602-1μg | pCMV-Blank | 1μg |
D2602-100μg | pCMV-Blank | 100μg |
D2621-1μg | pCMV-C-BFP (蓝色荧光蛋白) | 1μg |
D2621-100μg | pCMV-C-BFP (蓝色荧光蛋白) | 100μg |
D2623-1μg | pCMV-C-CFP (青色荧光蛋白) | 1μg |
D2623-100μg | pCMV-C-CFP (青色荧光蛋白) | 100μg |
D2624-1μg | pCMV-C-DsRed (红色荧光蛋白) | 1μg |
D2624-100μg | pCMV-C-DsRed (红色荧光蛋白) | 100μg |
D2626-1μg | pCMV-C-EGFP (绿色荧光蛋白) | 1μg |
D2626-100μg | pCMV-C-EGFP (绿色荧光蛋白) | 100μg |
D2628-1μg | pCMV-C-mCherry (红色荧光蛋白) | 1μg |
D2628-100μg | pCMV-C-mCherry (红色荧光蛋白) | 100μg |
D2630-1μg | pCMV-C-YFP (黄色荧光蛋白) | 1μg |
D2630-100μg | pCMV-C-YFP (黄色荧光蛋白) | 100μg |
D2632-1μg | pCMV-C-Flag | 1μg |
D2632-100μg | pCMV-C-Flag | 100μg |
D2639-1μg | pCMV-C-HA | 1μg |
D2639-100μg | pCMV-C-HA | 100μg |
D2650-1μg | pCMV-C-His | 1μg |
D2650-100μg | pCMV-C-His | 100μg |
D2672-1μg | pCMV-C-Myc | 1μg |
D2672-100μg | pCMV-C-Myc | 100μg |
D2701-1μg | pCMV-N-BFP (蓝色荧光蛋白) | 1μg |
D2701-100μg | pCMV-N-BFP (蓝色荧光蛋白) | 100μg |
D2703-1μg | pCMV-N-CFP (青色荧光蛋白) | 1μg |
D2703-100μg | pCMV-N-CFP (青色荧光蛋白) | 100μg |
D2705-1μg | pCMV-N-DsRed (红色荧光蛋白) | 1μg |
D2705-100μg | pCMV-N-DsRed (红色荧光蛋白) | 100μg |
D2707-1μg | pCMV-N-EGFP (绿色荧光蛋白) | 1μg |
D2707-100μg | pCMV-N-EGFP (绿色荧光蛋白) | 100μg |
D2711-1μg | pCMV-N-mCherry (红色荧光蛋白) | 1μg |
D2711-100μg | pCMV-N-mCherry (红色荧光蛋白) | 100μg |
D2716-1μg | pCMV-N-YFP (黄色荧光蛋白) | 1μg |
D2716-100μg | pCMV-N-YFP (黄色荧光蛋白) | 100μg |
D2722-1μg | pCMV-N-Flag | 1μg |
D2722-100μg | pCMV-N-Flag | 100μg |
D2733-1μg | pCMV-N-HA | 1μg |
D2733-100μg | pCMV-N-HA | 100μg |
D2737-1μg | pCMV-N-His | 1μg |
D2737-100μg | pCMV-N-His | 100μg |
D2756-1μg | pCMV-N-Myc | 1μg |
D2756-100μg | pCMV-N-Myc | 100μg |