产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
D2768-1μg | pRL-SV40-C (报告基因质粒) | 1μg | 888.00元 |
D2768-100μg | pRL-SV40-C (报告基因质粒) | 100μg | 1169.00元 |
pRL-SV40-C(报告基因质粒)是碧云天自行研发的用于在哺乳动物细胞中进行海肾萤光素酶(Renilla luciferase)报告基因检测的质粒,主要用于在其多克隆位点插入感兴趣的3' -UTR、启动子、增强子等调控元件研究该调控序列的基因转录调控活性,或用作萤火虫荧光素酶(firefly luciferase)报告基因检测时的内参。也可以使用Bgl II和Pst I等位点切除SV40 early enhancer/promoter,以降低本底性的转录,并插入感兴趣的3' -UTR等调控元件研究该调控序列的基因转录调控活性。研究5' -UTR并希望使用海肾萤光素酶时,推荐使用D2762 pRL-SV40-N。
萤光素、萤光素酶、萤火虫萤光素酶和海肾萤光素酶也经常被称作荧光素、荧光素酶、萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶。
pRL-SV40-C质粒含有SV40早期增强子和启动子,可以实现海肾萤光素酶在哺乳动物细胞内高效表达。
pRL-SV40-C质粒携带renilla luciferase基因,编码分子量为36kD的海肾萤光素酶,翻译后无需修饰,常用于报告基因检测。
本质粒为氨苄抗性。
pRL-SV40-C质粒的主要信息如下:
Feature Nucleotide | Position |
SV40 early enhancer/promoter | 7-418 |
Chimeric intron | 490-626 |
T7 RNA polymerase transcription(-17 to +2) | 670-688 |
T7 RNA polymerase transcription initiation site | 687 |
Rluc reporter gene | 698-1633 |
Multiple cloning site | 1635-1701 |
SV40 late polyadenylation signal | 1781-1942 |
β-lactamase (Ampr) coding region | 2079-2494 |
pRL-SV40-C质粒(3775bp)的图谱如下:
pRL-SV40-C的多克隆位点的详细图谱见说明书:https://www.beyotime.com/Manual/D2768 pRL-SV40-C (报告基因质粒).pdf。
pRL-SV40-C中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pRL-SV40-C)包括:
AgeI | AlwNI | ApaI | ApaLI | AscI | BbeI | BlpI |
BpmI | BsaI | BsgCI | Bsp120I | BssHI | Bst1107I | Bsu36I |
EagI | Eco47III | EcoNI | EheI | EspI | FseI | GsuI |
KasI | MmeI | MscI | MslI | NarI | NdeI | NotI |
NruI | NsiI | PstI | RsrI | SacII | SapI | SfiI |
SphI | SrfI | StuI | TfiI | Tth111I |
pRL-SV40-C中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pRL-SV40-C once)包括:
BglII | A`GATC,T | 1 | EcoO109I | RG`GNC,CY | 1690 |
Acc65I | G`GTAC,C | 54 | ApaI | G,GGCC`C | 1693 |
Asp718 | G`GTAC,C | 54 | XbaI | T`CTAG,A | 1695 |
KpnI | G,GTAC`C | 58 | NotI | GC`GGCC,GC | 1708 |
PvuII | CAG|CTG | 80 | EagI | C`GGCC,G | 1708 |
SfiI | GGCCN,NNN`NGGCC | 357 | XmaIII | C`GGCC,G | 1708 |
StuI | AGG|CCT | 403 | HpaI | GTT|AAC | 1851 |
AvrII | C`CTAG,G | 404 | MunI | C`AATT,G | 1860 |
PstI | C,TGCA`G | 466 | ClaI | AT`CG,AT | 1946 |
BspMI | ACCTGC 10/14 | 480 | BsaBI | GATNN|NNATC | 1952 |
BsiCI | TT`CG,AA | 704 | BamHI | G`GATC,C | 1953 |
BstBI | TT`CG,AA | 704 | SspI | AAT|ATT | 2071 |
XcmI | CCANNNN,N`NNNNTGG | 1347 | Bsp1286I | G,DGCH`C | 2293 |
BsrGI | A`CGCG,T | 1396 | AhaII | GR`CG,YC | 2336 |
BsaAI | YAC|GTR | 1430 | BsaHI | GR`CG,YC | 2336 |
AvaI | C`YCGR,G | 1641 | HinII | GR`CG,YC | 2336 |
PaeR7I | C`TCGA,G | 1641 | PvuI | CG,AT`CG | 2507 |
XhoI | C`TCGA,G | 1641 | EcoNI | CCTNN`N,NNAGG | 2515 |
SacI | G,AGCT`C | 1651 | Cfr10I | R`CCGG,Y | 2791 |
MluI | A`CGCG,T | 1653 | GsuI | CTGGAG 21/19 | 2806 |
HinDIII | A`AGCT,T | 1659 | BpmI | CTGGAG 22/20 | 2807 |
EcoRI | G`AATT,C | 1665 | AhdI | GACNN,N`NNGTC | 2876 |
EcoRV | GAT|ATC | 1673 | PleI | GAGTC 9/10 | 2885 |
SalI | G`TCGA,C | 1677 | HgiEII | ACCNNNNNNGGT-1/13 | 3175 |
AccI | GT`MK,AC | 1678 | AlwNI | CAG,NNN`CTG | 3355 |
SpeI | A`CTAG,T | 1683 | HaeII | R,GCGC`Y | 3524 |
Bsp120I | G`GGCC,C | 1689 |
pRL-SV40-C质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
T7 Primer(670-688):TAATACGACTCACTATAGG
pRL-SV40-C的全序列信息:D2768 pRL-SV40-C-seq.txt
包装清单:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D2768-1μg | pRL-SV40-C(报告基因质粒) | 1μg |
D2768-100μg | pRL-SV40-C(报告基因质粒) | 100μg |
— | 说明书 | 1份 |
保存条件:
-20℃保存。
注意事项:
本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
1. 首次使用1μg包装的本产品时,请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. 100μg包装的本产品质粒浓度为0.1μg/μl,共1ml。可以直接用于酶切或者转染细胞。
3. pRL-SV40-C质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入感兴趣的5’-UTR、启动子、增强子等调控元件,构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
4. pRL-SV40-C质粒或使用该质粒构建的新质粒转染细胞后,后续可以采用碧云天的海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG016/RG017)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG027/RG028)检测海肾荧光素酶的表达水平。
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