中文 | English
订货电话
400-1683301
800-8283301
电话订货时间:
工作日9:00-17:00
订货邮件
order@beyotime.com
订货QQ
4001683301
微信在线咨询
订单下载
碧云天订单.xls
多肽与蛋白> 蛋白检测> 免疫染色
免疫荧光染色试剂盒-抗兔Cy3
产品编号: P0183
产品包装:>300次
选择包装
价格: ¥ 513.00
产品简介
使用说明
产品文件
相关产品
相关论文
产品问答
产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
P0183 免疫荧光染色试剂盒-抗兔Cy3 >300次 513.00元

免疫荧光染色试剂盒(Immunol Fluorence Staining Kit)系列是碧云天开发的用于细胞或组织切片免疫荧光染色的试剂盒。在有适当的一抗检测特定的目标蛋白时,就可以使用免疫荧光染色试剂盒检测到红色、绿色或蓝色等荧光。
免疫荧光染色试剂盒-抗兔Cy3(Immunol Fluorence Staining Kit with Cy3-Labeled Goat Anti-Rabbit IgG),含有Cy3标记的山羊抗兔IgG(H+L)抗体,可以用于检测兔来源的相应一抗,观察到的颜色为非常鲜艳的红色。
Cy3是近年新开发的一种红色荧光探针。它比绝大部分其它的红色荧光探针更加明亮,更加不容易淬灭,而且背景更低。Cy3的吸收(激发)和发射峰参见下表。

Fluorophore Absorption Peak(nm) Emission Peak(nm)
Cy3 550 570

本试剂盒提供了含有荧光标记抗体稳定剂的免疫荧光染色二抗稀释液,可以确保荧光标记抗体稀释后在4℃可以保存长达6个月,并且在6个月内至少可以重复使用10次。
本试剂盒含有抗荧光淬灭封片液,可以使荧光更加持久。
本试剂盒对于六孔板内的细胞样品或常规切片,至少可以检测300个样品。
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
P0183-1 抗兔Cy3 0.03ml
P0183-2 免疫荧光染色二抗稀释液 50ml
P0183-3 抗荧光淬灭封片液 15ml
说明书 1份

保存条件:
-20℃保存,一年有效。同时抗兔Cy3需避光保存。
注意事项:
需荧光显微镜或激光共聚焦显微镜。
在使用抗荧光淬灭封片液的情况下可以减缓淬灭,但仍宜尽量避光,特别是需要尽量缩短在荧光显微镜下的观察时间。
荧光物质均易发生淬灭,染色后宜尽快进行荧光显微镜下的观察。如果不能及时观察可以4℃避光保存,但存放时间通常不宜超过一周,随着存放时间的延长可能会导致观察效果越来越差。
免疫荧光染色效果的好坏和一抗的关系非常密切。建议选购有较多文献报道的并注明可以用于免疫荧光染色的一抗用于本实验。
如果观察时发现荧光过弱,可以适当提高一抗的浓度;如果荧光还是比较弱,可以适当提高荧光标记抗体的浓度。
需自行配制用于免疫荧光染色的相关试剂,需自备盖玻片载玻片(可以向碧云天订购)。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 

使用说明:
1.免疫荧光染色的准备工作:
A.固定液的准备:
推荐使用碧云天生产的免疫染色固定液(P0098),也可以用4%多聚甲醛作为固定液,或根据特定的一抗或样品采用有效成分为乙醇、甲醇或其它类型的固定液。
B.洗涤液的准备:
推荐使用碧云天生产的免疫染色洗涤液(P0106),也可以按照如下方法配制TBSTx作为洗涤液:
10XTBS的配制:称取24.2g Tris (Tris碱), 80g NaCl;用盐酸调节pH值至7.6,定容至一升。
TBS配制:把10XTBS按照1:9的比例用水稀释至1X即为TBS。
TBSTx的配制:在TBS中加入Triton X-100使最终浓度为0.1%,混匀,即为TBSTx。
C.封闭液的准备:
推荐使用碧云天生产的免疫染色封闭液(P0102),也可以按照如下方法配制含5%BSA的TBSTx作为封闭液:
含5%BSA的TBSTx的配制:在100毫升TBSTx中加入5克BSA,溶解并混匀,即为含5%BSA的TBSTx。
D.一抗稀释液的准备:
推荐使用碧云天生产的免疫染色一抗稀释液(P0103),也可以使用上述封闭液,即含5%BSA的TBSTx,作为一抗稀释液。
E.一抗的稀释:
按照一抗说明书中推荐的用于免疫荧光染色的稀释比例用一抗稀释液稀释一抗。
F.荧光标记二抗的稀释:
把荧光标记的二抗,按照1:1000的比例用本试剂盒提供的免疫荧光染色二抗稀释液进行稀释。根据荧光的强弱,稀释的比例可以适当提高或降低。
2.对于贴壁细胞:
A.取普通洁净盖玻片于70%乙醇中浸泡5分钟或更长时间,无菌超净台内吹干或用细胞培养级PBS或0.9%NaCl等溶液洗涤三遍,再用细胞培养液洗涤一遍。将盖玻片置于六孔板内,种入细胞培养过夜,使约为50%-80%满。
B.按照特定的实验目的处理细胞后,吸尽培养液,加入1ml固定液,固定10分钟或更长时间(可4℃固定过夜)。
C.去固定液,用洗涤液洗3次,每次3-5分钟,吸尽液体。洗涤时宜用摇床,或手动晃动数次。
D.用封闭液封闭60分钟,可以在摇床上轻轻摇动。
E.去封闭液,用稀释的特定一抗作用60分钟,可以在摇床上轻轻摇动。为增强与一抗的结合,可以4℃作用过夜。
F.去除一抗,用洗涤液洗涤3-5次,每次3-5分钟。每次洗涤时都可以在摇床上轻轻摇动。
G.去除洗涤液,加入1毫升稀释好的荧光标记的二抗避光孵育60分钟,可以在摇床上轻轻摇动。
H.回收荧光标记的二抗,用洗涤液洗涤3-5次,每次3-5分钟,期间适当注意避光操作。每次洗涤时都可以在摇床上轻轻摇动。
I.滴一滴本试剂盒提供的抗荧光淬灭封片液于载玻片上,盖上贴有细胞的盖玻片,尽量避免气泡。使细胞接触封片液,切勿弄反。
J.如果一抗选用适当,在荧光显微镜下可以观察到红色的荧光。
3.对于悬浮细胞:
A.离心收集细胞样品于1.5ml离心管内,吸除上清后轻轻弹散细胞。
B.加入0.5ml固定液,缓缓悬起细胞,固定10分钟或更长时间(可4℃过夜)。
C.离心去固定液,用洗涤液洗3次,每次3-5分钟。洗涤期间可以用手或摇床轻轻晃动。
D.最后一次离心后吸去大部分液体保留约50微升液体,再缓缓悬起细胞,滴加至载玻片上,尽量使细胞分布均匀。
E.稍晾干,使细胞贴在载玻片上不易随液体流动。如果条件许可,可以使用适当的离心机,通过离心把细胞贴紧在载玻片上。
F.用封闭液封闭60分钟。封闭及后续的操作可以用碧云天的染色缸染色架邮寄夹进行操作。
G.去封闭液,用稀释的特定一抗避光孵育60分钟。为增强与一抗的结合,可以4℃作用过夜。
H.去除一抗,用洗涤液洗涤3-5次,每次3-5分钟。
I.去除洗涤液,加入稀释的荧光标记的二抗作用60分钟。
J.回收荧光标记的二抗,用洗涤液洗涤3-5次,每次3-5分钟,期间适当注意避光操作。
K.滴一滴本试剂盒提供的抗荧光淬灭封片液于载玻片上,盖上盖玻片,尽量避免气泡。
L.如果一抗选用适当,在荧光显微镜下可以观察到红色的荧光。
4.对于组织切片:
A.对于石蜡切片,需先完成脱蜡、水化和抗原修复。对于冰冻切片可以直接按照下面的步骤操作。
B.用固定液固定10分钟或更长时间(可4℃过夜)。固定及后续的操作可以用碧云天的染色缸染色架邮寄夹进行操作。
C.去固定液,用洗涤液洗3次,每次3-5分钟,吸尽液体。洗涤时宜用摇床,或手动晃动数次。
D.用封闭液封闭60分钟,可以在摇床上轻轻摇动。
E.去封闭液,用稀释的特定一抗作用60分钟,可以在摇床上轻轻摇动。为增强与一抗的结合,可以4℃作用过夜。
F.去除一抗,用洗涤液洗涤3-5次,每次3-5分钟。每次洗涤时都可以在摇床上轻轻摇动。
G.去除洗涤液,加入1毫升稀释好的荧光标记的二抗避光孵育60分钟,可以在摇床上轻轻摇动。
H.回收荧光标记的二抗,用洗涤液洗涤3-5次,每次3-5分钟,期间适当注意避光操作。每次洗涤时都可以在摇床上轻轻摇动。
I.滴一滴本试剂盒提供的抗荧光淬灭封片液于载玻片上,盖上盖玻片,尽量避免气泡。
J.如果一抗选用适当,在荧光显微镜下可以观察到红色的荧光。
物质安全数据单
输入右侧验证码点击下载:
更换校验码
质检证书
输入批号搜寻COA
搜索
相关产品请点击如下按钮:
使用本产品的文献:
1. Wang F, Liang YJ, Wu XP, Su XD, Fu LW.
.
Chin J Cancer. 2012 Mar;31(3):150-8. (IF 5.76)
2. Li T, Zha L, Luo H, Li S, Zhao L, He J, Li X, Qi Q, Liu Y, Yu Z
.
Aging Dis. 2019 Aug 1 10(4):731-745. (IF 5.402)
3. Qing Song, Zhifen Han, Xinnan Wu, Yan Wang, Lihong Zhou, Liu Yang, Ningning Liu, Hua Sui, Jianfeng Cai, Qing Ji, Qi Li
.
Front Cell Dev Biol. 2021 Apr 28;9:650067. doi: 10.3389/fcell.2021.650067. (IF 5.201)
4. Xiaoyun Li, Rumeng Chen, Yunchuan Li, Panpan Wang, Yan Cui, Li Yang, Xiaofeng Zhu, Ronghua Zhang
.
Front Cell Dev Biol. 2021 Sep 21;9:642646. doi: 10.3389/fcell.2021.642646. (IF 5.201)
5. Zhang S, Li P, Yuan Z, Tan J.
.
Stem Cell Res Ther. 2018 Feb 26;9(1):48. (IF 5.116)
6. Liu X, Zhang Z, Li P, Zhu L, Wang Y, Wang C.
.
REGUL PEPTIDES. 2009 Feb 25;153(1-3):49-55. (IF 1.813)
7. Liu HT, Li WM, Li XY, Xu QS, Liu QS, Bai XF, Yu C, Du YG.
.
BASIC CLIN PHARMACOL. 2010 May;106(5):362-71. (IF 2.651)
8. Wang XH, Fu ZG, Zhao Y, Shen W, Wu XY, Wang CY.
.
《中德临床肿瘤学杂志》. 2010 Sep;9(9):519-23.
9. Wang X, Fu Z, Zhao Y, Wu X, Shen W.
.
Eur J Cancer Prev. 2011 May;20(3):190-8. (IF 2.413)
10. Wang X, Zhao Y, Fu Z, He Y, Xiang D, Zhang L.
.
J Surg Res. 2011 Jul;169(1):148-55. (IF 1.841)
11. Zhou L, Xue H, Wang Z, Ni J, Yao T, Huang Y, Yu C, Lu L.
.
Life Sci. 2012 Mar 10;90(11-12):454-62. (IF 3.647)
12. Nie J, Cao X, Zhou M, Zhang X, Zhang R, Niu L, Xia Y, Hou L, Wang C.
.
B CANCER. 2012 Apr 1;99(4):E49-54. (IF 0.912)
13. Meng X, Li F, Chen S, Tang C, Zhang W, Wang Z, Zhao S.
.
Gene. 2012 Jul 25;503(2):222-8. (IF 2.984)
14. Dou R, Liu Z, Yuan X, Xiangfei D, Bai R, Bi Z, Yang P, Yang Y, Dong Y, Su W, Li D, Mao C.
.
PLoS One. 2017 May 2;12(5):e0176823. (IF 2.74)
15. Fu XF, Yang F, Cheng SF, Feng YN, Li L, Dyce PW, Shen W, Sun XF.
.
Histochem Cell Biol. 2017 Jul;148(1):61-72. (IF 3.418)
16. Zhang B, Dong JL, Chen YL, Liu Y, Huang SS, Zhong XL, Cheng YH, Wang ZG.
.
Mol Med Rep. 2017 Jul;16(1):597-602. (IF 2.1)
17. Yang C, Zhang JJ, Peng YP, Zhu Y, Yin LD, Wei JS, Gao WT, Jiang KR, Miao Y.
.
J Transl Med. 2017 Oct 19;15(1):211. (IF 4.124)
18. Zhu ZW, Chen L, Liu JX, Huang JW, Wu G, Zheng YF, Yao KT.
.
Exp Ther Med. 2018 Jan;15(1):85-92. (IF 1.785)
19. Lu K, Rui G, Liu F, Yang L, Deng X, Shi S, Li Q.
.
Oncol Lett. 2018 Jan;15(1):338-346. (IF 2.311)
20. Tang Z, Zang N, Fu Y, Ye Z, Chen S, Mo S, Ren L, Liu E
.
BIOCHEM BIOPH RES CO. 2018 Jun 18;501(1):1-8. (IF 2.985)
21. Liu T, Zou XZ, Huang N, Ge XY, Yao MZ, Liu H, Zhang Z, Hu CP
.
Life Sci. 2019 Jun 15 227:64-73. (IF 3.647)
23. Liu T, Zou XZ, Huang N, Ge XY, Yao MZ, Liu H, Zhang Z, Hu CP
.
Eur J Pharmacol. 2019 Nov 15 863:172673. (IF 3.263)
24. Yu H, Meng Y, Zhang S, Tian C, Wu F, Li N, Li Q, Jin Y, Pu J
.
Int J Mol Med. 2019 Dec 44(6):2037-2046. (IF 3.098)
25. Zhi-Mei Liao, An-Na Li, Yan Cai, Jun-Jun Chen, Yao Xu, Li-Hua Sui, Jian-Ling Wang, Ping Jin, Kuan-Song Wang, Zhi-Chun Yang
.
Biochem Biophys Res Commun. 2021 Jan 22;537:109-117. doi: 10.1016/j.bbrc.2020.12.058.
26. Litao Yan, Gejun Liu, Xing Wu
.
Clin Transl Med. 2021 Jan;11(1):e255. doi: 10.1002/ctm2.255.
27. Xiaoyun Li, Yan Cui, Qing Lin, Panpan Wang, Rumeng Chen, Xiaofeng Zhu, Li Yang, Ronghua Zhang
.
Front Mol Biosci. 2021 Aug 9;8:679345. doi: 10.3389/fmolb.2021.679345. (IF 4.188)
28. Weichao Dan, Yizeng Fan, Tao Hou, Yi Wei, Bo Liu, Taotao Que, Bixin Yu, Jin Zeng, Lei Li
.
J Cancer. 2022 Sep 25;13(13):3415-3426. doi: 10.7150/jca.63514. (IF 3.565)
购物车
会员
顶部