免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)技术是以抗原、抗体间的特异性免疫反应为基础,研究蛋白质间相互作用的经典方法。与其它研究蛋白质相互作用的方法相比,免疫共沉淀是在生理条件下检测蛋白质间相互作用,因此,不仅可以检测到体内形成的天然复合体,而且可排除过表达靶蛋白所带来的假阳性;由于内源性的靶蛋白是完全加工、修饰成熟的蛋白质,因此,依赖于修饰的蛋白质间相互作用也可以被检测到。
实验原理免疫共沉淀技术原理是以细胞内源性靶蛋白(protein X)为诱饵,将protein X的抗体与细胞总蛋白进行共孵育,促进免疫复合物的形成;随后加入能够与抗体Fc段结合的protein A/G(预先结合固化在琼脂糖微珠上),这样在protein X所在的环境中与其有相互作用的蛋白(protein Y)会被一起沉淀下来,形成"结合蛋白-靶蛋白-靶蛋白抗体-protein A/G微珠"复合物,纯化该复合物后凝胶电泳分离蛋白,应用Western blot 或者质谱技术鉴定靶蛋白的结合蛋白。
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碧云天免疫共沉淀技术服务项目表服务编号 | 服务项目 | 服务时间 | 全额预付特价(元) | 半额预付特价(元) | 零售价(元) | 服务内容 | 交付结果 |
T2201 | 免疫共沉淀 | 2-3周 | 1500 | 1800 | 2000 | Co-IP, Western blot鉴定Co-IP实验产物 | 实验报告,原始实验数据 |
T2202 | 质谱检测 | 3-4周 | 1000/样品 | 1200/样品 | 1500/样品 | 质谱鉴定和验证Co-IP实验产物 | 质谱鉴定结果 |
T2203 | 其他免疫共沉淀相关技术服务 | 咨询 | 询价 | 询价 | 询价 | 自定义 | 自定义 |
图A:靶蛋白X(Protein X)在Control和Model组样本中(Input)均有表达;图B:免疫共沉淀后各组样本Western blo检测以及考马斯亮蓝染色。利用碧云天免疫沉淀试剂盒(Protein A+G磁珠法),以及靶蛋白X抗体(Protein X Ab)或对照IgG对Control和Model组样本分别进行磁珠法免疫共沉淀。图C:利用LC-MS-MS二级质谱探索与靶蛋白X结合的未知蛋白或者验证与靶蛋白X结合的已知蛋白。
碧云天免疫共沉淀技术服务客户须知