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抗体> 免疫与炎症> NF-κB Signaling
Phospho-NF-κB p65(Ser536)抗体(兔单抗)
产品编号: AN371
产品包装: >20次
产品价格: 965.00元
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产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
AN371 Phospho-NF-κB p65(Ser536)抗体(兔单抗) >20次 965.00元
来源 用途 交叉反应性 抗体类型 NF-κB p65分子量
Rabbit WB, IP, IF, F H, M, R IgG ~65kD

      WB, Western blot; IP, Immunoprecipitation; IF, Immunofluorescence; F, Flow cytometry.
      H, human; M, mouse; R, rat.
      本Phospho-NF-κB p65(Ser536)抗体(Phospho-NF-κB p65(Ser536)antibody)为进口分装,用人工合成的含磷酸化
Ser536的一段人NF-κB p65多肽作为抗原制备而成的抗Phospho-NF-κB p65(Ser536)兔单克隆抗体。克隆号为93H1。
      本Phospho-NF-κB p65(Ser536)抗体识别Ser536被磷酸化的NF-κB p65,可以检测内源性的Phospho-NF-κB
p65(Ser536),不识别其它位点磷酸化的p65,不识别p50亚基或其它相关蛋白。
      NF-κB(nuclear factor κ-light-chain-enhancer of activated B cells)是一种常见的转录因子,可以被炎症因子、生长因子或趋化因子等激活。常见的炎症因子(包括Interleukin-1β、TNF-α和LPS等)都可以激活NF-κB。NF-κB由两类亚基形成同源或异源二聚体。一类亚基包括p65(也称RelA)、RelB和C-Rel;另一类亚基包括p50和p52。最常见的NF-κB亚基组成形式为p65/p50或p65/p65。
      NF-κB未被激活时和IκB-α形成一个复合物,分布在细胞浆中。在炎症因子、生长因子或趋化因子等可以激活NF-κB的刺激存在的情况下,IκB kinase(IKK)复合物会被NF-κB-inducing kinase磷酸化激活,导致IκB-α会在Ser32和Ser36位点被磷酸化,随后被泛素-蛋白酶体途径降解。NF-κB和IκB-α解聚后,其核定位序列暴露,从而被转运到细胞核内促进NF-κB依赖的基因转录。在一些可以激活NF-κB的刺激存在的情况下,一方面IκB-α被IKK磷酸化修饰导致其后续的泛素化降解,另一方面p65转录激活结构域的Ser536也可以被IKK磷酸化修饰,增强其转录活性。
      配套提供了Western一抗稀释液,可以用于Western检测时的一抗稀释。
      建议抗体使用时的稀释比例如下(实际使用时需根据抗原水平的高低作适当调整):

WB IP IF F
1:1000 1:50 1:100 1:200

      本抗体如果用于常规的Western检测,至少可以检测20次。
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
AN371-1 Phospho-NF-κB p65(Ser536)抗体(兔单抗) 20μl
AN371-2 Western一抗稀释液 20ml
说明书 1份

保存条件:
      Phospho-NF-κB p65(Ser536)抗体-20℃保存,Western一抗稀释液-20℃或4℃保存,一年有效。Western一抗稀释液优先推荐4℃保存,长期不使用可以考虑-20℃保存,但冻融可能会导致出现轻微的浑浊和少量不溶物。
注意事项:
      对于本抗体,Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜,如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。
      在Western实验后,请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,4℃保存。
      回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1. Western检测:
A. 按照1:1000用碧云天提供的Western一抗稀释液稀释抗体。
B. 把经过封闭的蛋白膜与稀释好的一抗4℃缓慢摇动过夜,确保稀释的抗体至少能在摇动的瞬间覆盖蛋白膜。
C. 回收稀释的一抗,4℃保存以备下次继续使用。
D. 按照Western的实验步骤进行后续的洗涤、二抗孵育、洗涤和检测等操作。具体操作可以参考如下网页:
http://www.beyotime.com/support/western.htm
2. 免疫染色:
可以使用碧云天生产的免疫染色一抗稀释液(P0103)稀释抗体,使用后注意回收稀释好的一抗,具体操作可以参考如下网页: http://www.beyotime.com/support/immunol-staining.htm
3. 其它实验操作请自行参考适当的protocol进行。
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使用本产品的文献:
1. Hu FY, Wu C, Li Y, Xu K, Wang WJ, Cao H, Tian XL.
Cell Signal . 2013 Aug;25(8):1645-53. (IF 3.388)
2. Chang G,Wang L,Ma N,Zhang W,Zhang H,Dai H,Shen X
BMC Vet Res . 2018 May 23;14(1):168. (IF 1.792)
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