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细胞相关> 亚细胞研究> 外泌体
BeyoExo™通用型外泌体专用培养液
产品编号: C0922-50ml
产品包装:50ml
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价格: ¥ 228.00
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产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
C0922-50ml BeyoExo™通用型外泌体专用培养液 50ml 228.00元
C0922-500ml BeyoExo™通用型外泌体专用培养液 500ml 1886.00元

碧云天生产的BeyoExo™通用型外泌体专用培养液,即BeyoExo™ Universal Culture Medium for Exosome,又称通用型外泌体专用培养液、外泌体专用无血清培养基、外泌体专用无血清培养液、外泌体专用培养基、外泌体专用培养液等,是一种化学成分确定(Chemical-defined, CD)的、无血清、无生长因子、不含任何动物源性物质(Animal origin-free, AOF)的,专门用于各种肿瘤细胞、293细胞、T细胞及部分干细胞等外泌体制备和生产的培养液,培养过程中无需添加血清即可达到完全培养液的培养状态。

外泌体(Exosome)是膜包裹的细胞外囊泡(Extracellular vesicles, EVs),直径约为40-160nm,具有脂质双分子层结构,天然存在于血液、尿液、脑脊液,以及体外培养细胞的上清液中[1],几乎所有类型的细胞都可以产生并释放外泌体[2]。如图1所示,细胞膜内吞(Endocytosis)依次形成初级内体(Early sorting endosome, ESE)、次级内体(Late sorting endosome, LSE)和多囊泡体(Multivesicular body, MVB),其中多囊泡体包含腔内囊泡(Intraluminal vesicles, ILVs)。多囊泡体与细胞膜融合形成外泌体,外泌体携带多种来自其母体细胞的成分(包括核酸、蛋白质、脂类、糖类和代谢物等)释放到胞外基质中[3]。外泌体可以被附近或远距离的细胞识别和融合,是细胞间进行相互调控的重要媒介,参与了癌症、神经退行性病变和炎症性疾病等多种疾病的发病过程,影响细胞多方面的功能[4-5]。

图1. 外泌体的形成原理及其携带的母体细胞成分示意图。

本产品经过过滤除菌处理,无需额外添加L-谷氨酰胺、血清、抗生素、激素等试剂。

成分说明:本产品的化学成分确定,含HEPES、L-谷氨酰胺、酚红和碳酸氢钠等组分;不含动物源性物质、血清、生长激素和抗生素。红色澄清液体,pH为6.8-7.4,渗透压为290-350mOsm/kg,内毒素≤1EU/ml。

产品特征:大部分细胞需要用含胎牛血清(Fetal bovine serum, FBS)的培养液进行培养,但胎牛血清含有大量牛来源的外泌体,会干扰外泌体相关研究结果。虽然胎牛血清可通过超高速离心后收集上清,以获得适用于外泌体的培养基,但无法完全避免牛来源外泌体的干扰。与含胎牛血清的完全培养液相比,本产品化学成分明确,不含未知组分,不含任何动物源性物质,也无需额外添加血清,尽可能地减少了外源性物质的引入,批次间稳定性好,且结果稳定可靠,对细胞生长基本没有影响。

用途:广泛应用于HeLa、HepG2、HT-29、HCT-116、A549、MDA-MB-231等各种肿瘤细胞、T细胞、巨噬细胞或部分干细胞及贴壁HEK-293等细胞的外泌体制备和生产。

包装清单:
产品编号 产品名称 包装
C0922-50ml BeyoExo™通用型外泌体专用培养液 50ml
C0922-500ml BeyoExo™通用型外泌体专用培养液 500ml
说明书 1份
保存条件:

4ºC避光保存,一年有效。

注意事项:

本产品仅适用于外泌体培养收集,不能作为细胞传代培养液使用。

本产品4ºC保存时应避免靠近冰箱壁,以免局部温度过低导致沉淀析出。如果有沉淀析出,室温摇晃片刻,再放置在4ºC冰箱过夜或更长时间,待沉淀消失后再使用。

使用本产品应注意无菌操作,避免污染。一般不建议补充抗生素,以免影响细胞的正常生长速度,但如果不能在高洁净度细胞培养室内操作,仍需加入适量的抗生素。

若使用过程中发现培养液浑浊、沉淀等异常现象,则不能继续使用。

本产品中已添加的L-谷氨酰胺是细胞培养所必需的营养成分,一般无需额外再添加,否则可能产生细胞毒性。但L-谷氨酰胺在溶液中不太稳定、易分解,若本培养液长期放置后再使用,发现细胞生长变慢,可在使用前加入适量的L-Glutamine (100X) (C0212)或可以稳定保存的L-Ala-Gln (100X) (C0211),以维持细胞的正常生长代谢。

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1. 细胞的准备:细胞复苏后使用普通完全培养液培养2-3代至细胞生产状态正常。外泌体提取前,如有需要,可加入药物处理细胞。
2. 待贴壁细胞密度在50%-70%、悬浮细胞密度在60%-70%时,去除原普通完全培养液,PBS (C0221A/C0221B)润洗细胞3-5次,避免原有血清中外泌体的污染。
注:具体的细胞密度和细胞增殖速度密切相关。对于增殖比较慢的细胞,建议在70%-80%左右,这样提取到的外泌体比较多;对于增殖比较快的细胞,细胞密度可以适当降低。
3. 加入适量100% BeyoExo™通用型外泌体专用培养液继续培养1-2天。
4. 待细胞密度达80-90%左右时,收集细胞培养上清液,即为含外泌体的溶液,可用于后续外泌体分离提取等实验。推荐使用碧云天细胞上清外泌体提取试剂盒(沉淀法) (C3620)、BeyoExo™增强型细胞上清外泌体提取试剂盒(沉淀法) (C3622)进行外泌体提取。
参考文献:
1. Metzelaar MJ, Wijngaard PL, Peters PJ, Sixma JJ, Nieuwenhuis HK, et al. J Biol Chem. 1991. 266(5):3239-45.
2. Luo W, Dai Y, Chen Z, Yue X, Andrade-Powell KC, et al. Commun Biol. 2020. 3(1):114.
3. Kalluri R, LeBleu VS. Science. 2020. 367(6478): eaau6977.
4. He C, Zheng S, Luo Y, Wang B. Theranostics. 2018. 8(1):237-255.
5. Zhang Y, Bi J, Huang J, Tang Y, Du S, et al. Int J Nanomedicine. 2020. 15:6917-6934.
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C0922-50ml BeyoExo™通用型外泌体专用培养液 50ml
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C1036 DiI (细胞膜红色荧光探针) 10mg
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C1039-10mg DiD (细胞膜远红外荧光探针) 10mg
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S1971-0.2ml/5mg/25mg BeyoExo™外泌体抑制剂(GW4869) 0.2ml/5mg/25mg
C4007-100μl/500μl Lenti-CMV-CD9-EGFP (10^9TU/ml, 外泌体示踪用) 100μl/100μl×5
C4009-100μl/500μl Lenti-CMV-CD9-mCherry (10^9TU/ml, 外泌体示踪用) 100μl/100μl×5
C4011-100μl/500μl Lenti-CMV-CD63-EGFP (10^9TU/ml, 外泌体示踪用) 100μl/100μl×5
C4013-100μl/500μl Lenti-CMV-CD63-mCherry (10^9TU/ml, 外泌体示踪用) 100μl/100μl×5
C4015-100μl/500μl Lenti-CMV-CD81-EGFP (10^9TU/ml, 外泌体示踪用) 100μl/100μl×5
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D2831-1μg/100μg pCMV-CD81-EGFP (外泌体示踪用) 1μg/100μg
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D2835-1μg/100μg pCMV-CD9-EGFP (外泌体示踪用) 1μg/100μg
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D2841-1μg/100μg pCMV-CD63-mCherry (外泌体示踪用) 1μg/100μg
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