产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
D0051S | BeyoMag™磁珠法残留DNA样品制备试剂盒 | 50次 | 528.00元 |
D0051M | BeyoMag™磁珠法残留DNA样品制备试剂盒 | 200次 | 1698.00元 |
碧云天研发生产的BeyoMag™磁珠法残留DNA样品制备试剂盒,即BeyoMag™ Residual DNA Sample Preparation Kit with Magnetic Beads,也称宿主细胞残留DNA提取试剂盒(Residual Host Cell DNA Preparation Kit)或残留DNA样品前处理试剂盒,是一种使用新型核酸纯化介质包被的磁珠,用于稳定、高效、便捷地从各种生物制品的中间品、半成品和成品中提取并纯化残留的大肠杆菌、酵母、昆虫或哺乳动物等宿主细胞微量DNA的试剂盒。本试剂盒制备的DNA样品可以用于相关DNA残留qPCR检测试剂盒。
本试剂盒的原理和操作流程如图1所示。样品中蛋白首先被蛋白酶K消化,释放出来的基因组DNA在特定条件下与磁珠特异性结合。在外界磁场(如磁分离架)的作用下,磁珠与相应溶液可以快速高效地分离。随后通过两次洗涤去除各种杂质,最后通过洗脱液将DNA从磁珠上洗脱下来[1-3]。整个过程无需酚氯仿抽提,无需酒精沉淀,全程仅需约20分钟即可完成。
图1. BeyoMag™磁珠法残留DNA样品制备试剂盒(D0051)抽提DNA原理示意图。
本试剂盒可搭配碧云天大肠杆菌DNA残留探针法qPCR检测试剂盒(D7701)等残留DNA检测试剂盒用于残留检测,使用E.coli DNA Control模拟样品的回收率测试结果见下表。
回收前残留DNA浓度 | 回收前体积 | 回收后残留DNA浓度 | 回收后体积 | 回收率 |
30fg/μl | 100μl | 32.6fg/μl | 100μl | 109% |
3fg/μl | 100μl | 3.08fg/μl | 100μl | 103% |
注1:回收率和样品浓度、体积、样品种类及实验操作等的不同而存在差异,表中数据仅供参考。
注2:根据中华人民共和国药典(2020年版‧三部)“外源性DNA残留测定法”中“第三法 定量PCR”对于结果计算的要求,加标样品的回收率应在50%~150%之间。
本试剂盒在提取低至飞克(Femtogram, fg)水平的残留DNA时仍具有较高的回收率,通常无需添加糖原、酵母RNA或Poly A等Carrier RNA或Oligo dT等Carrier DNA。使用本试剂盒对100μl模拟待测样品(含BSA)以及对应的加标样品(即在待测样品基础上再添加一定量的标准品)进行样品制备操作,并使用碧云天大肠杆菌DNA残留探针法qPCR检测试剂盒(D7701)检测样品浓度。回收率计算结果见下表。
重复 | 待测样品CT值 | 待测样品lgCT | 待测样品浓度 | 加标样品CT值 | 加标样品lgCT | 加标样品浓度 | 回收率 |
1 | 33.53 | 0.97 | 9.36fg/μl | 31.6 | 1.54 | 35.0fg/μl | 85.4% |
2 | 34.30 | 0.74 | 5.53fg/μl | 31.84 | 1.47 | 29.7fg/μl | 80.5% |
3 | 33.82 | 0.89 | 7.68fg/μl | 31.73 | 1.51 | 32.0fg/μl | 81.1% |
注:上表中用于计算样品浓度的E.coli DNA标准曲线公式为:Y = -3.371X + 36.80,其中Y为CT值,X为该待测样品浓度的对数,斜率和Y轴截距是由荧光定量PCR仪自动生成。上表中用于计算加样回收率的公式为:(加标样品的浓度 - 待测样品的浓度) × 洗脱体积 / 加标量。洗脱体积为100μl,加标量为3000fg E.coli DNA。
本试剂盒小包装可以抽提50个样品的总DNA,中包装可以抽提200个样品的总DNA。
包装清单:产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D0051S-1 | BeyoMag™磁珠 | 1ml |
D0051S-2 | 蛋白酶K | 1ml |
D0051S-3 | 洗涤液Ⅰ (首次使用前加入7ml无水乙醇) | 21ml (+7ml) |
D0051S-4 | 洗涤液Ⅱ (首次使用前加入24ml无水乙醇) | 16ml (+24ml) |
D0051S-5 | 洗脱液 | 10ml |
D0051S-6 | Glycogen (20mg/ml, DNase free) | 50μl |
- | 说明书 | 1份 |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D0051M-1 | BeyoMag™磁珠 | 4ml |
D0051M-2 | 蛋白酶K | 4ml |
D0051M-3 | 洗涤液Ⅰ (首次使用前加入28ml无水乙醇) | 84ml (+28ml) |
D0051M-4 | 洗涤液Ⅱ (首次使用前加入96ml无水乙醇) | 64ml (+96ml) |
D0051M-5 | 洗脱液 | 40ml |
D0051M-6 | Glycogen (20mg/ml, DNase free) | 200μl |
- | 说明书 | 1份 |
蛋白酶K和Glycogen -20ºC保存,其余均室温保存,一年有效。其中BeyoMag™磁珠长期不使用时,可以4ºC保存,4ºC可以保存更长时间。蛋白酶K和Glycogen室温(15-25ºC)存放,至少一周有效。
注意事项:需自备磁分离装置,推荐使用碧云天的1.5/2ml磁分离架(FMS004/FMS008/FMS012/FMS016/FMS024)。
首次使用前洗涤液Ⅰ和洗涤液Ⅱ需按照说明书和标签上的指示添加无水乙醇,混匀,并在瓶上做好标记。
磁珠在静置后会发生沉降,使用前一定要适当涡旋震荡或颠倒数次至充分混匀。
磁分离前应适度震荡离心管使磁珠充分分散后再靠近磁场。如果出现磁珠挂壁现象,可以在磁珠聚集后晃动管内液体,使挂壁的磁珠流下。
请使用推荐的样品量。如果样品量过大,可能造成磁珠聚集,会影响洗涤进而影响抽提获得的DNA纯度。发生磁珠聚集时,洗涤时需尽量分散磁珠,这样可有效改善抽提效果。如果发生磁珠聚集现象,建议在后续实验中适当减少样品用量。
本试剂盒的某些步骤需使用55ºC水浴,请提前作好准备。
除特别说明外,每次Vortex应控制在5-10秒左右。
本试剂盒所有操作均在室温进行,操作时无需冰浴。
建议使用带滤芯的吸头配制PCR体系,这样可以最大限度的避免污染导致的假阳性。推荐BeyoGold™无菌滤芯盒装吸头(FTIP631/FTIP635/FTIP638)。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
C0221A | PBS | 500ml |
D0041S | BeyoMag™磁珠法PCR/DNA纯化试剂盒 | 50次 |
D0041M | BeyoMag™磁珠法PCR/DNA纯化试剂盒 | 200次 |
D0043S | BeyoMag™磁珠法DNA凝胶回收试剂盒 | 50次 |
D0043M | BeyoMag™磁珠法DNA凝胶回收试剂盒 | 200次 |
D0051S | BeyoMag™磁珠法残留DNA样品制备试剂盒 | 50次 |
D0051M | BeyoMag™磁珠法残留DNA样品制备试剂盒 | 200次 |
D0061 | 哺乳动物基因组DNA抽提试剂盒 | 50次 |
D0063 | 基因组DNA小量抽提试剂盒(通用型,离心柱式) | 50次 |
D0065S | 动物基因组DNA快速抽提试剂盒(PCR分析用) | 100次 |
D0065M | 动物基因组DNA快速抽提试剂盒(PCR分析用) | 500次 |
D0088S | BeyoMag™基因组DNA小量抽提试剂盒(通用型, 磁珠法) | 50次 |
D0091S | BeyoMag™磁珠法血液基因组DNA抽提试剂盒 | 50次 |
D0091M | BeyoMag™磁珠法血液基因组DNA抽提试剂盒 | 200次 |
D0091L | BeyoMag™磁珠法血液基因组DNA抽提试剂盒 | 800次 |
D7701S | 大肠杆菌DNA残留探针法qPCR检测试剂盒 | 50次 |
D7701M | 大肠杆菌DNA残留探针法qPCR检测试剂盒 | 100次 |
D0816-0.5ml | Glycogen (DNase, RNase & Protease free) | 0.5ml |
D0816-2ml | Glycogen (DNase, RNase & Protease free) | 2ml |
D0816-10ml | Glycogen (DNase, RNase & Protease free) | 10ml |
R0037-1mg | Carrier RNA (Poly A) | 1mg |
R0037-5mg | Carrier RNA (Poly A) | 5×1mg |
R0037-25mg | Carrier RNA (Poly A) | 25mg |
R0037-100mg | Carrier RNA (Poly A) | 100mg |
R0037-500mg | Carrier RNA (Poly A) | 500mg |
R0040-0.5ml | Yeast RNA (DNase, RNase &Proteinase Free) | 0.5ml |
R0040-2ml | Yeast RNA (DNase, RNase &Proteinase Free) | 2ml |
R0040-10ml | Yeast RNA (DNase, RNase &Proteinase Free) | 10ml |
FTIP616-10bxs | BeyoGold™无菌盒装低吸附吸头(0.1-10μl, 无色) | 96个/盒,10盒/箱 |
FTIP616 | BeyoGold™无菌盒装低吸附吸头(0.1-10μl, 无色) | 96个/盒,50盒/箱 |
FTIP631-10bxs | BeyoGold™无菌滤芯盒装吸头(0.5-10μl, 无色加长, 4.5cm) | 96个/盒, 10盒/箱 |
FTIP631-50bxs | BeyoGold™无菌滤芯盒装吸头(0.5-10μl, 无色加长, 4.5cm) | 96个/盒, 50盒/箱 |
FTIP635-10bxs | BeyoGold™无菌滤芯盒装吸头(1-200μl, 黄色加长, 5.6cm) | 96个/盒, 10盒/箱 |
FTIP635-50bxs | BeyoGold™无菌滤芯盒装吸头(1-200μl, 黄色加长, 5.6cm) | 96个/盒, 50盒/箱 |
FTIP638-10bxs | BeyoGold™无菌滤芯盒装吸头(100-1000μl, 蓝色加长, 10.2cm) | 96个/盒, 10盒/箱 |
FTIP638-50bxs | BeyoGold™无菌滤芯盒装吸头(100-1000μl, 蓝色加长, 10.2cm) | 96个/盒, 50盒/箱 |
FTUB312-1bag | BeyoGold™ 1.5毫升离心管(无色, 低吸附, Nuclease free) | 500个/包 |
FTUB312-10bags | BeyoGold™ 1.5毫升离心管(无色, 低吸附, Nuclease free) | 500个/包, 10包/箱 |
FMS004 | BeyoMag™磁分离架(4孔, 1.5ml/2ml, 蓝) | 1个/盒 |
FMS008 | BeyoMag™磁分离架(8孔, 1.5ml/2ml, 蓝) | 1个/盒 |
FMS012 | BeyoMag™磁分离架(12孔) | 1个/袋 |
FMS016 | BeyoMag™磁分离架(16孔, 1.5ml/2ml, 蓝) | 1个/盒 |
FMS024 | BeyoMag™磁分离架(24孔) | 1个/袋 |
ST873-100ml | BeyoPure™ Ultrapure Water (PCR级, Sterile) | 100ml |