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phACE2-promoter-TA-luc (报告基因质粒)
产品编号: D2488-1µg
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D2488-1µg phACE2-promoter-TA-luc (报告基因质粒) 1µg 888.00元
D2488-100µg phACE2-promoter-TA-luc (报告基因质粒) 100µg 1129.00元

phACE2-promoter-TA-luc (报告基因质粒)是碧云天自行研发的用于检测人血管紧张素转化酶2 (Angiotensin converting enzyme2,ACE2)的promoter转录活性水平的报告基因质粒。

phACE2-promoter-TA-luc是以碧云天的pGL6-TA质粒为模板,在其多克隆位点插入了human ACE2的启动子序列(1970bp),可以高灵敏度地检测human ACE2 promoter的激活水平。

ACE2是SARS冠状病毒(SARS-CoV和SARS-CoV-2)和人类呼吸道冠状病毒NL63的受体。SARS-CoV/SARS-CoV-2通过其Spike蛋白受体结合域(Receptor binding domain,RBD)与ACE2的肽酶结构域结合,参与病毒的感染过程。SARS-CoV-2 Spike蛋白与ACE2的亲和力是SARS-CoV Spike蛋白与ACE2的亲和力的10-20倍。

有报道干扰素(Interferon)可以上调ACE2的转录水平,从而可能促进相关病毒感染。

ACE2是肾素-血管紧张素系统(Rennin-angiotension system,RAS)的重要成员。血管紧张素(Angiotensin II,Ang II)是RAS系统的主要效应分子,具有促进内皮细胞凋亡和促进炎症因子表达的作用。ACE2主要是通过降解血管紧张素II生成血管紧张素1-7(angiotensin-(1-7))从而发挥机体保护功能。ACE2是在肺、心脏、肾脏和肠中表达的I型膜蛋白,其胞外域包括N端肽酶结构域(Peptidase domain,PD)及C端Collectrin-like结构域(CLD)。

pGL6-TA是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)报告基因检测的新一代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进,一方面对于luciferase的编码进行了改进,确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达,同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理,在保持原有功能不变的情况下,使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。

phACE2-promoter-TA-luc质粒的主要信息如下:

Feature Nucleotide Position
human ACE2 promoter 20-1989
Minimal TA promoter (pTA) 2002-2024
luc2 reporter gene 2056-3718
SV40 late poly(A) signal 3753-3974
SV40 early enhancer/promoter 4022-4440
Synthetic neomycin phosphotransferase (Neor) coding region 4465-5259
Synthetic poly(A) signal 5284-5332
Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region 5399-5418
ColE1-derived plasmid replication origin 5656
Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region 6447-7307
Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site 7412-7565
Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region 7514-7533

phACE2-promoter-TA-luc质粒(7565bp)的图谱如下:


phACE2-promoter-TA-luc质粒的详细图谱见说明书:https://www.beyotime.com/Manual/D2488 phACE2-promoter-TA-luc.pdf

phACE2-promoter-TA-luc中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut phACE2-promoter-TA-luc)包括:

AatII AclI AflII AscI AsiSI BglII BmgBI
BmtI BsiWI BspEI BssHII CspCI EcoRV MluI
NdeI NheI NruI PacI PaeR7I PflMI PmeI
PspXI RsrII SbfI SmaI SnaBI SrfI SwaI
TspMI XcmI XhoI XmaI XmnI ZraI

phACE2-promoter-TA-luc中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut phACE2-promoter-TA-luc once)包括:

Acc65I G`GTAC,C 14 Eco53kI GAG|CTC 780
AflIII A`CRYG,T 5598 EcoNI CCTNN`N,NNAGG 4939
AhdI GACNN,N`NNGTC 6519 HindIII A`AGCT,T 1900
ApaLI G`TGCA,C 5912 KpnI G,GTAC`C 18
AseI AT`TA,AT 1545 MfeI C`AATT,G 3892
BaeI ,(N)5`(N)1ACNNNNGTAYC(N)7,(N)5` 4665 NotI GC`GGCC,GC 6418
BamHI G`GATC,C 3985 PciI A`CATG,T 5598
BciVI GTATCC(N)5,N` 5800 PflFI GACN`N,NGTC 1390
BglI GCCN,NNN`NGGC 5 PmlI CAC|GTG 920
BsaAI YAC|GTR 920 PstI C,TGCA`G 6438
BsaI GGTCTCN`NNNN, 1189 PvuI CG,AT`CG 6890
BsaXI ,NNN`(N)9AC(N)5CTCC(N)7,NNN` 1147 SacI G,AGCT`C 782
BsrGI T`GTAC,A 2556 SacII CC,GC`GG 6914
BstBI TT`CG,AA 5334 SalI G`TCGA,C 5348
BstEII G`GTNAC,C 6445 SfiI GGCCN,NNN`NGGCC 5
BstXI CCAN,NNNN`NTGG 6438 SpeI A`CTAG,T 7349
BstZ17I GTA|TAC 7030 StuI AGG|CCT 4418
Bsu36I CC`TNA,GG 6876 Tth111I GACN`N,NGTC 1390
DraIII CAC,NNN`GTG 3209

phACE2-promoter-TA-luc质粒中推荐使用的测序引物序列如下:

RVprimer3 (7514-7533):

CTA GCA AAA TAG GCT GTC CC

phACE2-promoter-TA-luc的全序列信息:D2488 phACE2-promoter-TA-luc全序列.txt

包装清单:
产品编号 产品名称 包装
D2488-1µg phACE2-promoter-TA-luc 1μg
D2488-100µg phACE2-promoter-TA-luc 100μg
说明书 1份
保存条件:

-20℃保存。

注意事项:

本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1.首次使用1µg包装的本产品时,请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2.100µg包装的本产品质粒浓度为0.1µg/µl,共1ml。可以直接用于酶切或者转染细胞。
3.以phACE2-promoter-TA-luc质粒用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可以采用碧云天的萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG005/RG006)双萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG027/RG028)
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