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核酸相关> 菌种与质粒> 植物用质粒
pUBI10-GUS(植物报告基因质粒)
产品编号: D2491-100μg
产品包装:100μg
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价格: ¥ 1169.00
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产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
D2491-1μg pUBI10-GUS(植物报告基因质粒) 1μg 888.00元
D2491-100μg pUBI10-GUS(植物报告基因质粒) 100μg 1169.00元

pUBI10-GUS(报告基因质粒)是是碧云天自行研发的植物(如拟南芥等)原生质体瞬时转染的报告基因质粒。大肠杆菌的β-葡萄糖醛酸酶(β-glucuronidase,GUS)作为植物基因研究中常用的报告基因具有以下突出优点:植物原生质体可以比较稳定的表达GUS基因;不干扰植物细胞的正常代谢;β-葡萄糖醛酸酶在高等植物中几乎无内源性表达。质粒为氨苄青霉素抗性。

pUBI10-GUS载体中GUS基因由拟南芥Ubiquitin 10(UBI10)基因启动子驱动表达。如果由花椰菜花叶病毒35S(CaMV35S)组成型强启动子启动GUS基因的表达,会增加植物的代谢负担,造成大量物质和能量的浪费,并进而影响植物正常的生长发育;而UBI10启动子不仅可以高效启动下游基因的表达,也可以比较好的规避CaMV35S的缺点。

pUBI10-GUS中UBI10 promoter的上下游有数个酶切位点,可利用其对UBI10 promoter进行其它启动子的替换,用以研究感兴趣的启动子的功能。

pUBI10-GUS载体仅保留植物瞬时转化所需元件,结构精简,避免由于载体过大导致原生质体转化效率降低。此载体不可用于植物稳定遗传株系的构建。

pUBI10-GUS采用来自根瘤农杆菌的胭脂碱合成酶基因终止子NOS terminator (nopaline synthase terminator),用于终止RNA聚合酶转录,对目的基因的表达进行调控。

pUBI10-GUS质粒的主要信息如下:

Feature Nucleotide Position
NOS terminator 1-253
M13 forward primer(M13 fwd) 262-278
f1 origin of ss-DNA replication 491-946
Ampicillin promoter 1228-1332
Ampicillin resistance ORF 1333-2193
pUC origin 2364-2952
CAP binding site 3240-3261
lac promoter 3276-3306
lac operator 3314-3330
M13 reverse primer(M13 rev) 3338-3354
UBI10 promoter 3388-4704
β-glucuronidase(GUS) 4732-6543

pUBI10-GUS质粒(6614bp)的图谱如下:

pUBI10-GUS的详细图谱见说明书:https://www.beyotime.com/Manual/D2491 pUBI10-GUS(植物报告基因质粒).pdf

pUBI10-GUS中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pUBI10-GUS)包括:

Acc65I AfeI AgeI ApaI AscI AsiSI
AvrII BamHI BbvCI BlpI BmgBI BmtI
BseRI BsiWI BspDI BspEI BstAPI BstEII
BstXI BstZ17I Bsu36I ClaI CspCI EagI
EcoNI FseI HpaI KpnI NcoI NdeI
NheI NotI PacI PaeR7I PflMI PmeI
PspOMI PspXI RsrII SacII SexAI SfiI
SgrAI SpeI SphI SrfI StuI StyI
SwaI XcmI XhoI

pUBI10-GUS中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pUBI10-GUS once)包括:

AatII G,ACGT`C 1197 NmeAIII GCCGAG(N)19,NN` 1970
AflII A`CRYG,T 30 NsiI A,TGCA`T 121
AhdI GACNN,N`NNGTC 2121 PflFI GACN`N,NGTC 4267
BaeI ,(N)5`(N)1ACNNNNGTAYC(N)7,(N)5` 3673 PluTI G,GCGC`C 417
BbsI GAAGACNN`NNNN, 4508 PmlI CAC|GTG 4216
BglII A`GATC,T 4634 PpuMI RG`GWC,CY 3925
BpmI CTGGAG(N)14,NN` 2049 PshAI GACNN|NNGTC 5305
BsaI GGTCTCN`NNNN, 2055 PstI C,TGCA`G 3387
BseYI C`CCAG,C 2704 SbfI CC,TGCA`GG 3382
BsgI GTGCAG(N)14,NN` 6251 ScaI AGT|ACT 1640
BsmI GAATG,CN` 4787 SfoI GGC|GCC 419
BstBI TT`CG,AA 5825 SmaI CCC|GGG 4714
DraIII CAC,NNN`GTG 721 SnaBI TAC|GTA 5116
HindIII A`AGCT,T 3368 TspMI CCCGG,G 4711
KasI G`GCGC,C 417 Tth111I GACN`N,NGTC 4267
MfeI C`AATT,G 4862 XmaI C`CCGG,G 4711
MscI TGG|CCA 5353 ZraI GAC|GTC 1199
NarI GG`CG,CC 418

pUBI10-GUS质粒可使用的测序引物序列如下:

GUS promoter primer(4744-4762): 5'-CACGGGTTGGGGTTTCTAC-3'

M13 reverse primer(3338-3354): 5'-CAGGAAACAGCTATGAC-3'

pUBI10-GUS的全序列信息:D2491 pUBI10-GUS.txt

包装清单:
产品编号 产品名称 包装
D2491-1µg pUBI10-GUS 1μg
D2491-100µg pUBI10-GUS 100μg
说明书 1份
保存条件:

-20℃保存。

注意事项:

本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1.首次使用1 µg包装的本产品时,请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2.100 µg包装的本产品质粒浓度为0.1 µg/µl,共1ml。可以直接用于酶切。用于植物原生质体转化需进行质粒大量抽提。
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