微信在线咨询
| 产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
| D2632-1μg | pCMV-C-Flag | 1μg | 888.00元 |
| D2632-100μg | pCMV-C-Flag | 100μg | 1169.00元 |
pCMV-C-Flag是碧云天自行研发的用于在哺乳动物细胞中表达C端和Flag tag(Flag标签)融合的目的蛋白的表达质粒。含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达；在多克隆位点的3'端含有一个可以编码Flag标签的序列，因此可以表达出含有Flag标签的融合蛋白，可以方便地使用抗Flag的抗体来识别目的蛋白，有利于目的蛋白检测和分离纯化。质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后，可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
pCMV-C-Flag质粒的主要信息如下：
| Feature Nucleotide | Position |
| CMV promoter | 1-602 |
| T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
| multiple cloning site | 680-740 |
| c-Flag tag | 741-764 |
| T7 promoter and T7 primer binding site | 817-838 |
| SV40 polyA signal | 850-1233 |
| f1 origin of ss-DNA replication | 1371-1675 |
| bla promoter | 1700-1824 |
| SV40 promoter | 1844-2182 |
| neomycin/kanamycin resistance ORF | 2217-3008 |
| HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 3009-3467 |
| pUC origin | 3596-4263 |
pCMV-C-Flag质粒的图谱如下：
pCMV-C-Flag的多克隆位点的详细图谱见说明书：https://www.beyotime.com/Manual/D2632 pCMV-C-Flag.pdf
pCMV-C-Flag中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-C-Flag)包括：
| Afl II | Age I | Ahd I | Asc I | Bbs I | Bbv II | Blp I |
| Bsg I | BsiW I | BsmB I | BspM II | BsrG I | BssH II | Bst1107 I |
| BstE II | Ear I | Eco47 III | Eco72 I | EcoN I | Esp I | Fse I |
| Nru I | PflM I | Pme I | Pml I | PpuM I | Psp1406 I | Sap I |
| Sca I | Spe I | |||||
pCMV-C-Flag中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-C-Flag once)包括：
| Nde I | CA`TA,TG | 241 | Pvu I | CG,AT`CG | 851 | |
| SnaB I | TAC|GTA | 347 | Bcl I | T`GATC,A | 1005 | |
| Nhe I | G`CTAG,C | 598 | Mun I | C`AATT,G | 1098 | |
| Sac I | G,AGCT`C | 656 | Hpa I | GTT|AAC | 1111 | |
| Sac II | CC,GC`GG | 663 | Mlu I | A`CGCG,T | 1234 | |
| BstX I | CCAN,NNNN`NTGG | 664 | Dra III | CAC,NNN`GTG | 1464 | |
| Not I | GC`GGCC,GC | 669 | Sfi I | GGCCN,NNN`NGGCC | 2121 | |
| PspA I | C`CCGG,G | 681 | BseR I | GAGGAG 16/14 | 2164 | |
| Xma I | C`CCGG,G | 681 | Stu I | AGG|CCT | 2167 | |
| Srf I | GCCC|GGGC | 683 | Cla I | AT`CG,AT | 2186 | |
| Sma I | CCC|GGG | 683 | Kas I | G`GCGC,C | 2345 | |
| BamH I | G`GATC,C | 688 | Nar I | GG`CG,CC | 2346 | |
| HinD III | A`AGCT,T | 694 | Ehe I | GGC|GCC | 2347 | |
| Pst I | C,TGCA`G | 704 | Bbe I | G,GCGC`C | 2349 | |
| EcoR I | G`AATT,C | 706 | Msc I | TGG|CCA | 2428 | |
| EcoR V | GAT|ATC | 714 | Tth111 I | GACN`N,NGTC | 2464 | |
| Sal I | G`TCGA,C | 718 | BsrD I | GCAATG, 8 | 2579 | |
| Acc I | GT`MK,AC | 719 | Bsp1286 I | G,DGCH`C | 2649 | |
| Bgl II | A`GATC,T | 724 | Rsr II | CG`GWC,CG | 2862 | |
| PaeR7 I | C`TCGA,G | 730 | BsiC I | TT`CG,AA | 3028 | |
| Xho I | C`TCGA,G | 730 | BstB I | TT`CG,AA | 3028 | |
| Xba I | T`CTAG,A | 736 | Bsa I | GGTCTC 7/11 | 3335 | |
| Bsp120 I | G`GGCC,C | 769 | HgiE II | ACCNNNNNNGGT-1/13 | 3675 | |
| Apa I | G,GGCC`C | 773 | ApaL I | G`TGCA,C | 3950 |
pCMV-C-Flag质粒中对于插入片段进行测序时，推荐使用的正向测序引物T3和反向测序引物T7的序列如下：
T3 primer(620-639): 5′AATTAACCCTCACTAAAGGG 3′
T7 primer(817-838): 5′GTAATACGACTCACTATAGGGC 3′
pCMV-C-Flag的全序列信息： D2632 pCMV-C-Flag-seq.txt
包装清单：
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| D2632-1μg | pCMV-C-Flag | 1μg |
| D2632-100μg | pCMV-C-Flag | 100μg |
| — | 说明书 | 1份 |
保存条件：
-20℃保存。
注意事项：
本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明：
1. 首次使用1μg包装的本产品时，请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
2. 100μg包装的本产品质粒浓度为0.1μg/μl，共1ml。可以直接用于酶切或者转染细胞。
3. pCMV-C-Flag质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因，需注意插入基因片段和tag之间的读码框要一致，即需要避免发生移码突变。构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
微信在线咨询
