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核酸相关> 菌种与质粒> 报告基因质粒
pRL-TK(报告基因质粒)
产品编号: D2760-1μg
产品包装:1μg
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价格: ¥ 888.00
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产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
D2760-1μg pRL-TK(报告基因质粒) 1μg 888.00元
D2760-100μg pRL-TK(报告基因质粒) 100μg 1169.00元

pRL-TK(报告基因质粒)是碧云天自行研发的用于在哺乳动物细胞中进行海肾萤光素酶(Renilla luciferase)报告基因检测的质粒,主要用于在其多克隆位点插入感兴趣的5’-UTR、启动子、增强子等调控元件研究该调控序列的基因转录调控活性,或用作萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)报告基因检测时的内参,从而消除因为质粒的转染效率不同而带来的误差。

pRL-TK质粒带有的HSV TK promoter (单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激酶启动子)相对于SV40和CMV增强子/启动子较弱,更适用于共转系统中的内参报告基因。

pRL-TK质粒携带renilla luciferase基因,编码分子量为36kD的海肾萤光素酶,翻译后无需修饰,常用于报告基因检测。

本质粒为氨苄抗性。

pRL-TK质粒的主要信息如下:

Feature Nucleotide Position
HSV-TK promoter 7-759
Multiple cloning site 760-795
Chimeric intron 862-998
T7 RNA polymerase transcription(-17 to +2) 1042-1060
T7 RNA polymerase transcription initiation site 1059
Rluc reporter gene 1070-2005
SV40 late polyadenylation signal 2047-2248
β-lactamase (Ampr) coding region 2395-3255

pRL-TK质粒的图谱如下:

pRL-TK质粒的详细图谱见说明书:https://www.beyotime.com/Manual/D2760 pRL-TK(报告基因质粒).pdf

pRL-TK中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pRL-TK)包括:

AatII Acc65I AgeI AscI Asp718 BlpI BseRI BsgI
BsiWI BsmBI BspMII BstEII BstXI Bsu36I DraIII Eco47III
Eco72I EspI FseI KpnI NaeI NdeI NgoMI NruI
NsiI PaeR7I PflMI PmeI PmlI RsrII SacI SfiI
SnaBI SphI SplI

pRL-TK中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pRL-TK once)包括:

BglII A`GATC,T 2 Bsp120I G`GGCC,C 791
MscI TGG|CCA 129 ApaI G,GGCC`C 795
SapI GCTCTTC 8/11 138 BspMI ACCTGC 10/14 853
BssHII G`CGCG,C 242 NheI G`CTAG,C 1061
PspAI C`CCGG,G 283 XcmI CCANNNN,N`NNNNTGG 1720
XmaI C`CCGG,G 283 BsrGI T`GTAC,A 1769
SmaI CCC|GGG 285 XbaI T`CTAG,A 2008
KasI G`GCGC,C 290 NotI GC`GGCC,GC 2015
NarI GG`CG,CC 291 EagI C`GGCC,G 2015
EheI GGC|GCC 292 XmaIII C`GGCC,G 2015
BbeI G,GCGC`C 294 HpaI GTT|AAC 2158
SacII CC,GC`GG 300 MunI C`AATT,G 2167
PpuMI RG`GWC,CY 320 ClaI AT`CG,AT 2253
AvrII C`CTAG,G 323 BsaBI GATNN|NNATC 2259
NcoI C`CATG,G 331 BamHI G`GATC,C 2260
Bst1107I GTA|TAC 344 SspI AAT|ATT 2378
XcaI GTA|TAC 344 Bsp1286I G,DGCH`C 2600
PvuII CAG|CTG 532 PvuI CG,AT`CG 2814
MluI A`CGCG,T 714 EcoNI CCTNN`N,NNAGG 2822
HindIII A`AGCT,T 761 FspI TGC|GCA 2960
EcoRV GAT|ATC 775 Cfr10I R`CCGG,Y 3098
SalI G`TCGA,C 779 AhdI GACNN,N`NNGTC 3183
SpeI A`CTAG,T 785 HgiEII ACCNNNNNNGGT -1/13 3482

pRL-TK质粒中推荐使用的测序引物序列如下:

T7 Primer(1042-1060): TAATACGACTCACTATAGG

pRL-TK的全序列信息:pRL-TK全序列.txt

包装清单:
产品编号 产品名称 包装
D2760-1μg pRL-TK(报告基因质粒) 1μg
D2760-100μg pRL-TK(报告基因质粒) 100μg
说明书 1份
保存条件:

-20℃保存。

注意事项:

本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1.首次使用1µg包装的本产品时,请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2.100µg包装的本产品质粒浓度为0.1µg/µl,共1ml。可以直接用于酶切或者转染细胞。
3.pRL-TK质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入感兴趣的5'-UTR、启动子、增强子等调控元件,构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
4.pRL-TK质粒或使用该质粒构建的新质粒转染细胞后,后续可以采用碧云天的海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒
(RG016/RG017)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG027/RG028)检测海肾荧光素酶的表达水平。
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使用本产品的文献:
1. Shimin Wu, Guijiao Zhang, Li Liu, Wei Wu, Xiaoping Luo
.
Pediatr Diabetes. 2022 Aug;23(5):597-603. doi: 10.1111/pedi.13384. (IF 3.052)
2. Xiaoqing Yan, Yue Su, Xia Fan, Hui Chen, Zixian Lu, Zijuan Liu, Yingjian Li, Mei Yi, Guigui Zhang, Chunjie Gu, Kai Wang, Jiamin Wu, Da Sun, Yikai Zhang, Chi Zhang, Xiaozhen Dai, Chao Zheng
.
Cells. 2022 Nov 29;11(23):3821. doi: 10.3390/cells11233821. (IF 4.366)
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