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| 产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
| D2802 | pFastBac1-EGFP (杆状病毒包装阳性对照质粒) | 1μg | 888.00元 |
pFastBac1-EGFP是以pFastBac1为基础构建的用于在昆虫细胞表达EGFP的质粒。在polyhedrin (PH)启动子的作用下，可以高效启动EGFP在昆虫细胞(如Sf9和Sf21等)中的表达。
在采用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达目的蛋白时，pFastBac1-EGFP可以用作监测转染、病毒包装和目的蛋白表达效果的对照质粒。表达的EGFP有很强的绿色荧光，在荧光显微镜下可以非常方便地观察转染、病毒包装和表达的效果。
pFastBac1是基于Bac-to-Bac杆状病毒表达系统(Bac-to-Bac Baculovirus Expression System)而设计的表达载体。Bac-to-Bac杆状病毒表达系统是由Luckow等人于1993年发展的一种快速而有效产生重组杆状病毒的方法。该系统主要包括以下两个组分：(1)用于插入目的基因的pFastBac载体，目的基因如EGFP等插入后受杆状病毒特异性启动子(baculovirus-specific promoter) polyhedrin启动子调控表达；(2)含杆状病毒穿梭载体bacmid (bMON14272, 136kb)和辅助质粒(helper plasmid，用于表达转座必须的转座蛋白)的大肠杆菌DH10Bac宿主菌株(D0346)。将pfastBac重组质粒转化该菌株可发生pfastBac重组质粒中mini-Tn7元件和bacmid上的mini-attTN7发生转座，从而形成重组的bacmid。位点特异的转座会破坏宿主的lacZα基因，从而可通过蓝白斑筛选重组克隆。PCR等方法鉴定重组克隆后，提取重组的bacmid转染昆虫细胞，可以产生重组杆状病毒，并表达目的蛋白如EGFP等。扩增重组的杆状病毒并感染昆虫细胞，就可以大量表达纯化目的蛋白了。
pFastBac1-EGFP质粒的主要信息如下：
| Feature Nucleotide | Position |
| f1 origin | 2-457 |
| Ampicillin resistance gene | 589-1449 |
| pUC origin | 1594-2267 |
| Tn 7R | 2511-2735 |
| Gentamicin resistance gene | 2802-3335 |
| Polyhedrin promoter (PPH) | 3904-4032 |
| EGFP | 4038-4757 |
| SV40 polyadenylation signal | 4794-5021 |
| Tn 7L | 5050-5215 |
pFastBac1-EGFP质粒(5397bp)的图谱如下：
pFastBac1-EGFP质粒的详细图谱见说明书：https://www.beyotime.com/Manual/D2802 pFastBac1-EGFP.pdf。
pFastBac1-EGFP中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pFastBac1-EGFP)包括：
| AatII | Acc65I | AfeI | AflII | AgeI | ApaI | AscI |
| AsiSI | BbvCI | BfuAI | BlpI | BmgBI | BmtI | BsiWI |
| BspDI | BspMI | BssHII | BstAPI | BstBI | BstEII | Bsu36I |
| ClaI | CspCI | Eco53kI | EcoNI | EcoO109I | EcoRI | FseI |
| KasI | KpnI | MluI | NarI | NdeI | NheI | NotI |
| NruI | NsiI | PacI | PaeR7I | PflMI | PluTI | PmeI |
| PmlI | PpuMI | PshAI | PspOMI | PspXI | PstI | PvuII |
| RsrII | SacI | SalI | SbfI | SexAI | SfiI | SfoI |
| SgrAI | SmaI | SpeI | SphI | SrfI | StuI | SwaI |
| TspMI | XbaI | XcmI | XhoI | XmaI | ZraI |
pFastBac1-EGFP中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pFastBac1-EGFP once)包括：
| NgoMIV | G`CCGG,C | 127 | BsmBI | CGTCTCN`NNNN, | 3182 | |
| NaeI | GCC|GGC | 129 | PflFI | GACN`N,NGTC | 3228 | |
| BanII | G,RGCY`C | 157 | Tth111I | GACN`N,NGTC | 3228 | |
| BsaHI | GR`CG,YC | 836 | BbsI | GAAGACNN`NNNN, | 3757 | |
| PvuI | CG,AT`CG | 1005 | SnaBI | TAC|GTA | 3881 | |
| FspI | TGC|GCA | 1153 | AccI | GT`MK,AC | 3883 | |
| AlwNI | CAG,NNN`CTG | 1852 | BstZ17I | GTA|TAC | 3884 | |
| BseYI | C`CCAG,C | 1960 | BsmFI | GGGAC(N)10`NNNN, | 4000 | |
| TfiI | G`AWT,C | 2290 | BamHI | G`GATC,C | 4032 | |
| SapI | GCTCTTCN`NNN, | 2381 | NcoI | C`CATG,G | 4036 | |
| BspQI | GCTCTTCN`NNN, | 2381 | HindIII | A`AGCT,T | 4758 | |
| MscI | TGG|CCA | 2709 | MfeI | C`AATT,G | 4873 | |
| BstXI | CCAN,NNNN`NTGG | 2713 | HpaI | GTT|AAC | 4886 | |
| SacII | CC,GC`GG | 2766 | BclI | T`GATC, | 5022 | |
| BaeI | ,(N)5`(N)10ACNNNNGTAYC(N)7,(N)5` | 2798 | AvrII | C`CTAG,G | 5037 | |
| EcoRV | GAT,ATC | 2825 |
pFastBac1-EGFP的全序列信息请参考碧云天的网站上该质粒的信息。
pFastBac1-EGFP质粒使用碧云天研发的LipoInsect™转染试剂(C0551)转染SF9细胞的效果参考图1。
图1. pFastBac1-EGFP质粒转化DH10Bac，获得的重组bacmid用碧云天生产的LipoInsect™转染试剂(C0551)转染SF9细胞4天后的效果图。左侧为明场照片，右侧为荧光照片。
关于昆虫细胞系统的蛋白表达与纯化的详细介绍，请见如下网页： http://www.beyotime.com/support/insect cell.htm。
包装清单：
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| D2802 | pFastBac1-EGFP (杆状病毒包装阳性对照质粒) | 1μg |
| — | 说明书 | 1份 |
保存条件：
-20℃保存。
注意事项：
本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明：
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
2. 本质粒通常用于转化大肠杆菌DH10Bac用于制备重组bacmid。
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| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| D0031 | 杆状病毒穿梭载体bacmid小量抽提试剂盒 | 50次 |
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| C0551-0.5ml | LipoInsect™转染试剂 | 0.5ml |
| C0551-1.5ml | LipoInsect™转染试剂 | 1.5ml |
| C0551-7.5ml | LipoInsect™转染试剂 | 5×1.5ml |
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