中文 | English
订货电话
400-1683301
800-8283301
电话订货时间:
工作日9:00-17:00
订货邮件
order@beyotime.com
订货QQ
4001683301
微信在线咨询
订单下载
碧云天订单.xls
核酸相关> DNA操作> 内切酶与外切酶
产品编号: D6128XL
产品包装:200kU
选择包装
价格: ¥ 16568.00
产品简介
使用说明
产品文件
相关产品
相关论文
产品问答
产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
D6128S BsaI 1kU 198.00元
D6128M BsaI 5kU 758.00元
D6128L BsaI 20kU 2368.00元
D6128XL BsaI 200kU 16568.00元

碧云天生产的BsaI是一种IIS类限制性内切酶,是由碧云天自主研发的PerfectProtein™技术平台表达、纯化获得的重组内切酶,常用于Golden Gate组装(Golden Gate Assembly)以及mRNA疫苗用质粒的线性化或其它体外转录质粒的线性化。

BsaI限制性内切酶的基本信息如下:

识别序列 缓冲液兼容性(%) 酶切温度 失活条件 甲基化干扰?
5'-GGTCTC(N)1^-3' 1X BsaI 1X B 1X G 1X O 1X R 1X Y 2X Y 37℃* 80℃ 20min
3'-CCAGAG(N)5^-5' 100 25-100 50-100 75-100 100 100 100

*,37℃孵育3h未表现星号活性,延时酶切可能出现星号活性。

碧云天生产的BsaI切割含有其酶切位点的DNA片段的效果请参考图1。

图1. 碧云天生产的BsaI (D6128)和N公司的同类产品(Competitor BsaI)的酶活性检测效果对比图。使用本产品或国外N公司的BsaI,在20µl反应体系中加入图中指定量的本产品或国外N公司的BsaI,37℃孵育30分钟进行酶切反应,然后电泳分析,最终进行核酸染色和荧光成像分析。如图所示,本产品与N公司的产品相比,具有类似的酶切效果。反应体系(20μl): 50mM Potassium Acetate, 20mM Tris-acetate (pH 7.9 @ 25℃), 10mM Magnesium Acetate, 100µg/ml BSA,100ng dsDNA以及1µl不同浓度的BsaI。图中DNA底物的制备方法:以pUC18 (D2303)为模板,用引物5'-AACTTGGTCTGACAGTTA-3'和5'-ATTAACTGGCGAACTAC-3'进行扩增获得含一个BsaI位点的300bp DNA片段。实际检测效果会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。

酶储存液:10mM Tris-HCl, 200mM NaCl, 1mM DTT, 0.1mM EDTA, 200µg/ml BSA, 50% Glycerol, pH 7.4 @ 25℃.

1X Buffer BsaI:50mM Potassium Acetate, 20mM Tris-acetate, 10mM Magnesium Acetate, 100µg/ml BSA, pH 7.9 @ 25℃.

1X Buffer R:10mM Tris-HCl (pH8.5 @ 37℃), 10mM MgCl2, 100mM KCl, 0.1mg/ml BSA.

酶切和连接效率:20倍过量的本内切酶消化1小时,>95%被酶切的片段可以被连接并被重新酶切(Recut)。

活性单位定义:One unit is defined as the amount of enzyme required to digest 1µg of pXba DNA in 1 hour at 37℃ in a total reaction volume of 50µl.

包装清单:
产品编号 产品名称 包装
D6128S-1 BsaI (20U/µl) 50µl
D6128S-2 10X Buffer BsaI 0.2ml
D6128S-3 10X Buffer R 1ml
说明书 1份

产品编号 产品名称 包装
D6128M-1 BsaI (20U/µl) 250µl
D6128M-2 10X Buffer BsaI 1ml
D6128M-3 10X Buffer R 1ml
说明书 1份

产品编号 产品名称 包装
D6128L-1 BsaI (200U/µl) 100µl
D6128L-2 10X Buffer BsaI 4ml
D6128L-3 10X Buffer R 1ml
说明书 1份

产品编号 产品名称 包装
D6128XL-1 BsaI (200U/µl) 1ml
D6128XL-2 10X Buffer BsaI 40ml
D6128XL-3 10X Buffer R 1ml
说明书 1份
保存条件:

-20℃保存。

注意事项:

内切酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。

温度在50℃时酶切活性可达100%。

如果发现预期的酶切位点不能切开,请确认是否存在甲基化干扰问题。Dcm甲基化与酶切位点的重叠组合会阻断酶切,CpG甲基化与酶切位点的重叠组合也会阻断酶切。

甘油含量大于5%可能会导致星号活性。

3小时孵育未表现星号活性,延时酶切可能出现星号活性。

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1.单酶切反应体系及操作步骤。
a.参考如下表格配制反应体系。
Component Volume
Substrate DNA ≤1µg
10X Buffer BsaI 2µl
BsaI 0.5-1µl
Ultrapure water To 20µl
注:请把Buffer和水等充分混匀后再加入内切酶,加入内切酶后可以用枪吹打或轻轻Vortex混匀。待酶切DNA量较大时,可以适当延长酶切时间或按比例放大酶切体系。
b.反应条件:37℃孵育1小时或2-3小时。
c.终止反应:80℃孵育20分钟可终止反应。
2.双酶切或多酶切时,需选择适当的可以兼容两个或多个内切酶的缓冲液,然后参考上表设置反应体系。如果没有合适的缓冲液可以选择,可以在一种酶消化完毕后进行纯化,纯化完毕后再进行另外一种酶切反应。
相关产品:
产品编号 产品名称 包装
D6018 10X CutEZ™ Buffer 5ml
D6049 ApaI 2000U
D6053 BamHI 2000U
D6093 BglII 500U
D6257 DpnI 500U
D6258 DpnI 2500U
D6329 EcoRI 2000U
D6330 EcoRI 5000U
D6337 EcoRV 1500U
D6389 HindIII 2000U
D6390 HindIII 5000U
D6417 KpnI 1000U
D6449 MluI 1000U
D6481 NcoI 200U
D6485 NdeI 400U
D6489 NheI 200U
D6497 NotI 150U
D6565 PstI 1000U
D6566 PstI 3000U
D6581 PvuII 1000U
D6585 RsaI 200U
D6593 SacI 500U
D6597 SalI 1000U
D6633 SmaI 500U
D6713 XbaI 1500U
D6721 XhoI 2000U
物质安全数据单
输入右侧验证码点击下载:
更换校验码
质检证书
输入批号搜寻COA
搜索
相关产品请点击如下按钮:
使用本产品的文献:
购物车
会员
顶部