产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
P0039-100ml | RIPA完全裂解液(中) | 100ml | 299.00元 |
碧云天生产的RIPA完全裂解液(RIPA Complete Lysis Buffer),是一种在RIPA裂解液(中) (P0013C)的基础上添加除粘增溶剂的RIPA裂解液,与普通型RIPA裂解液(中)相比通常能更完全裂解细胞或组织样品从而制备出裂解效果更好的蛋白样品的细胞组织快速裂解液。本裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的PAGE、Western、免疫沉淀(Immunoprecipitation,IP)、免疫共沉淀(co-IP)和ELISA等[1]。
本产品可以用于动物、植物的细胞或组织样品,也可以用于真菌或细菌样品。
本产品的性能和用途与碧云天生产的普通型RIPA裂解液(中) (P0013C)基本相同,但本产品添加了特殊的除粘增溶剂,可以有效消除普通型RIPA裂解液(中) (P0013C)在提取细胞和组织样品时可能出现的絮状或粘稠状物,使裂解后的样品更易于吸取、操作更加精准便利,同时也显著提高了细胞或组织样品的蛋白提取效果。
通常情况下将本产品加入样品后作用约1-2分钟,絮状或粘稠状物就会消失,可以显著改善在提取蛋白时出现的絮状或粘稠状物问题,无须超声、增加裂解液用量或增加裂解时间处理,并且能够提高蛋白的提取率,相同条件下使用本完全裂解液制备样品的蛋白得率比普通型裂解液要高约5-25%。本完全裂解液(P0039) (Complete)和普通型RIPA裂解液(中) (P0013C) (Regular)的蛋白提取效果对比请参考图1。
图1.碧云天RIPA完全裂解液(中) (P0039)和普通型RIPA裂解液(中) (P0013C)对不同细胞的蛋白提取效果对比图。长满6孔板的等量的HCT-116和NRK-52E细胞,分别加入完全型(Complete)和普通型(Regular) RIPA裂解液(中)各150微升裂解细胞,提取蛋白样品,使用碧云天的BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型) (P0010)测定蛋白浓度。普通型RIPA裂解液(强)提取的HCT-116和NRK-52E细胞样品蛋白浓度分别为4.24mg/ml和2.61mg/ml,完全型RIPA裂解液(中)提取的HCT-116和NRK-52E细胞样品蛋白浓度分别为4.60mg/ml和3.15mg/ml,完全型RIPA裂解液(中)提取的HCT-116和NRK-52E细胞样品的蛋白浓度比普通型RIPA裂解液(中)分别高约8%和20%。实际检测数据会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。
本产品含有的除粘增溶剂作用迅速,并且非常稳定。本产品的除粘增溶作用显效非常快,加入样品后仅需作用约1-2分钟粘稠状物即会消失。本产品冻融10次、在4℃或25℃存放1周其除粘增溶效果基本不受影响;即使在37℃保存1天,加入样品后作用约5分钟粘稠状物质也会消失。除粘增溶剂含有多种组分,包括不含标签的来自非常见微生物的酶,不会消化样品中的蛋白,通常也不会干扰常规的Western或免疫沉淀实验。
RIPA的本意是Radio Immunoprecipitation Assay [2]。RIPA裂解液的配方有很多种,根据其裂解液的强度大致可以分为强、中、弱三类。关于不同的RIPA裂解液以及碧云天生产的其它裂解液的主要特点和差异,以及如何选择裂解液可参考我们的相关网页:http://www.beyotime.com/support/lysis-buffer.htm。
RIPA完全裂解液(中)的主要成分为50mM Tris (pH 7.4),150mM NaCl,1% NP-40,0.5% sodium deoxycholate,0.1% SDS,除粘增溶剂,以及sodium orthovanadate,sodium fluoride,EDTA,leupeptin等多种抑制剂。可以有效抑制蛋白降解。
用RIPA完全裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用碧云天生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒(P0009/P0010/P0010S/P0011/P0012/ P0012S)测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
包装清单:产品编号 | 产品名称 | 包装 |
P0039-100ml | RIPA完全裂解液(中) | 100ml |
— | 说明书 | 1份 |
-20ºC保存,一年有效。
注意事项:为取得最佳的使用效果,尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。
通常情况下,本产品加入样品后作用约1-2分钟絮状或粘稠状物就会消失,由于样品种类、裂解液的加入比例等实验条件的差异,本产品加入后絮状或粘稠状物消失的时间可能会有所不同。
需自备PMSF。PMSF (ST506)可以向碧云天订购。也可以选购总体效果更佳的碧云天生产的蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(通用型, 50X) (P1045/P1046),或者根据具体用途选择蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(通用型, 质谱兼容, 50X) (P1048/P1049)、蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(哺乳动物样品抽提用, 50X) (P1050/P1051)、蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(植物样品抽提用, 50X) (P1055/P1056)、蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(真菌或酵母抽提用, 50X) (P1060/P1061)、蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(细菌抽提用, 50X) (P1065/P1066)。如果无需检测磷酸化蛋白,也可以选不含磷酸酶抑制剂的蛋白酶抑制剂化合物。
裂解样品的所有步骤都需在冰上或4ºC进行。
关于裂解液的选择,一方面可以参考碧云天的相关网页:http://www.beyotime.com/support/lysis-buffer.htm选择合适的裂解液;另一方面也需要通过一些预实验来摸索最佳的适合您实验条件的裂解液。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
产品编号 | P0013/P0037 | P0013B/P0038 | P0013C/P0039 | P0013D/P0040 | P0013F | P0013G | P0013J | P0013K |
产品名称 | Western及IP细胞(完全)裂解液 | RIPA(完全)裂解液(强) | RIPA(完全)裂解液(中) | RIPA(完全)裂解液(弱) | NP-40裂解液 | SDS裂解液 | Western及IP细胞裂解液(无抑制剂) | RIPA裂解液(强,无抑制剂) |
有效裂解成分 | 1% Triton X-100 | 1% Triton X-100, 1% deoxycholate, 0.1% SDS | 1% NP-40, 0.5% deoxycholate, 0.1% SDS | 1% NP-40, 0.25% deoxycholate | 1% NP-40 | 1% SDS | 1% Triton X-100 | 1% Triton X-100, 1% deoxycholate, 0.1% SDS |
裂解强度 | 温和 | 强 | 中 | 温和 | 温和 | 强 | 温和 | 强 |
对膜蛋白的提取 | 一般 | 很好 | 较好 | 一般 | 一般 | 很好 | 一般 | 很好 |
对胞浆蛋白的提取 | 很好 | 很好 | 很好 | 很好 | 很好 | 很好 | 很好 | 很好 |
对核蛋白的提取 | 较好/很好 | 很好/非常好 | 较好/很好 | 较好/很好 | 较好 | 很好 | 较好 | 很好 |
胞浆磷酸化蛋白提取 | 很好 | 很好 | 很好 | 很好 | 很好 | 很好 | 很好 | 很好 |
细胞核转录因子提取 | 很好 | 很好 | 很好 | 很好 | 很好 | 很好 | 很好 | 很好 |
含蛋白酶抑制剂 | 是 | 是 | 是 | 是 | 是 | 是 | 否 | 否 |
含磷酸酯酶抑制剂 | 是 | 是 | 是 | 是 | 是 | 是 | 否 | 否 |
不同物种样品兼容性 | 高 | 高 | 高 | 高 | 高 | 高 | 高 | 高 |
主要用途 | WB, IP, co-IP | WB, IP | WB, IP | WB, IP, co-IP | WB, IP, co-IP | WB, ChIP | WB, IP, co-IP | WB, IP |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
P0013 | Western及IP细胞裂解液 | 100ml |
P0037-100ml | Western及IP细胞完全裂解液 | 100ml |
P0013B | RIPA裂解液(强) | 100ml |
P0038-100ml | RIPA完全裂解液(强) | 100ml |
P0013C | RIPA裂解液(中) | 100ml |
P0039-100ml | RIPA完全裂解液(中) | 100ml |
P0013D | RIPA裂解液(弱) | 100ml |
P0040-100ml | RIPA完全裂解液(弱) | 100ml |
P0013E | RIPA裂解液(强中弱套装) | 共150ml |
P0013F | NP-40裂解液 | 100ml |
P0013G | SDS裂解液 | 100ml |
ST506 | PMSF (100mM) | 10ml |
P1005 | 蛋白酶抑制剂混合物(通用型, 100X) | 1ml |
P1006 | 蛋白酶抑制剂混合物(通用型, 100X) | 5ml |
P1008 | 蛋白酶抑制剂混合物(通用型, 质谱兼容, 50X) | 1ml |
P1009 | 蛋白酶抑制剂混合物(通用型, 质谱兼容, 50X) | 5ml |
P1010 | 蛋白酶抑制剂混合物(哺乳动物样品抽提用, 100X) | 1ml |
P1011 | 蛋白酶抑制剂混合物(哺乳动物样品抽提用, 100X) | 5ml |
P1015 | 蛋白酶抑制剂混合物(植物样品抽提用, 100X) | 1ml |
P1016 | 蛋白酶抑制剂混合物(植物样品抽提用, 100X) | 5ml |
P1020 | 蛋白酶抑制剂混合物(真菌或酵母抽提用, 100X) | 1ml |
P0007 | 蛋白标准(5mg/ml BSA) | 1ml |
P0009 | BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型) | 5000次 |
P0010 | BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型) | 500次 |
P0010S | BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型) | 200次 |
P0011 | BCA蛋白浓度测定试剂盒 | 5000次 |
P0012 | BCA蛋白浓度测定试剂盒 | 500次 |
P0012S | BCA蛋白浓度测定试剂盒 | 200次 |