产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
S0239S | Amplex Red乙醇检测试剂盒 | 100次 | 598.00元 |
碧云天研发的Amplex Red乙醇检测试剂盒(Amplex Red Ethanol Assay Kit)是一种基于探针Amplex Red,利用荧光或吸光度检测,快速、高灵敏地对血清、血浆、尿液等生物体液、组织、细胞以及组织或细胞培养上清以及饮料等样品中乙醇含量进行检测的试剂盒。
乙醇(Ethanol, Alcohol或Ethyl Alcohol),俗称酒精,化学式为CH3CH2OH (C2H6O或C2H5OH)或EtOH,是带有一个羟基的饱和一元醇,在常温、常压下是一种易燃、易挥发的无色透明液体。乙醇是很多饮品中含有的神经活性成分,能够发挥中枢神经系统镇静剂的作用,是一种强大的精神药物和几乎最古老的消遣性饮品。乙醇在摄入后会通过胃和小肠吸收,从而进入血液。乙醇主要通过肝脏完成代谢,也会通过尿液或呼吸被排出[1]。乙醇代谢的速率主要取决于体内酶的含量,具有较大的个体差异,并与遗传有关。少量饮酒可以促进血液循环,但大量的乙醇摄入则会导致多种不同的疾病[2,3]。当血液中乙醇浓度达到0.1%时,大脑皮层就受到抑制,皮层下的低级中枢则因抑制降低而兴奋,使人产生明显的醉酒感觉;乙醇浓度达到0.2%时,会使人行为失常;达到0.4%时,人就会失去知觉,昏迷不醒,甚至有生命危险,达到0.5%或者更高浓度通常都是致命的。因此,定量检测乙醇的含量在基础研究、药物开发、临床研究和发酵工业等领域都有着重要的意义。
本试剂盒中的Amplex Red是一种对H2O2高度敏感的荧光探针。在辣根过氧化物酶(Horseradish peroxidase, HRP)存在的情况下,Amplex Red能与H2O2 1:1反应,产生强烈的红色荧光物质试卤灵(Resorufin)。试卤灵的最大激发波长为571nm,最大发射波长为585nm,并且在激发波长处有很强的可见光吸收。因此本试剂盒可以用吸光度和荧光两种方法来进行检测。
本试剂盒的检测原理请参考图1。乙醇(Ethanol)在乙醇氧化酶(Alcohol oxidase, ALOD or AOX)的作用下和氧气发生氧化反应生成乙醛(Acetaldehyde)和H2O2,再通过检测H2O2与Amplex Red的反应产物试卤灵的荧光强度或吸光度来最终计算样品中乙醇的含量。试卤灵的荧光强度或吸光度与样品中乙醇的含量成正比。
图1.碧云天Amplex Red乙醇检测试剂盒(S0239)检测原理图。
本试剂盒检测灵敏度高,线性范围宽,样品用量少。本试剂盒在样品体积为50µl时,采用吸光度检测可以检测浓度低至0.001%的乙醇,在0.001-0.02% (0.17-3.43mM)浓度范围内有良好的线性关系;采用荧光检测可以检测浓度低至0.0001%的乙醇,在0.0001-0.005% (17.16-857.5µM)浓度范围内有良好的线性关系。荧光检测的灵敏度比吸光度检测高约10倍,可以使用更少量的样品。本试剂盒提供了乙醇标准溶液,可以通过绘制标准曲线(图2),计算出样品中的乙醇含量。
图2.碧云天Amplex Red乙醇检测试剂盒(S0239)检测乙醇标准品的标准曲线。左图为吸光度检测,右图为荧光检测。本试剂盒采用吸光度检测时,在0.001-0.02% (17-343µM)浓度范围内有良好的线性关系;采用荧光检测时,在0.0001-0.005% (1.7-86µM)浓度范围内有良好的线性关系。实际检测数据会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。
本试剂盒检测方法灵活,检测速度快。本试剂盒既可以进行荧光检测,也可进行吸光度检测。整个检测过程约1小时即可完成。
本试剂盒提供的检测裂解液有一定的通用性。使用本试剂盒中的BeyoLysis™ Buffer A for Metabolic Assay裂解获得的细胞或组织样品,也可以用于碧云天生产的其它代谢类试剂盒中同样使用BeyoLysis™ Buffer A for Metabolic Assay进行裂解的样品检测,通用性强;而且还可用于检测蛋白浓度、进行SDS-PAGE或一些较易溶解蛋白的Western检测。
本试剂盒应用范围广。本试剂盒可用于小鼠、大鼠、人等的血清、血浆、尿液等生物体液,细胞培养上清、组织或细胞及饮料样品等的检测。本试剂盒不仅适合少量样本的检测,也非常适合高通量筛选(High-throughput screening)的自动化操作系统。
按照使用说明操作,用于96孔板检测时,本试剂盒小包装可以进行100次检测。
包装清单:产品编号 | 产品名称 | 包装 |
S0239S-1 | BeyoLysis™ Buffer A for Metabolic Assay | 15ml |
S0239S-2 | Ethanol Assay Buffer | 15ml |
S0239S-3 | Amplex Red | 200µl |
S0239S-4 | Enzyme Solution A | 200µl |
S0239S-5 | Enzyme Solution B | 200µl |
S0239S-6 | Ethanol Standard (10%) | 500µl |
— | 说明书 | 1份 |
-20ºC保存,一年有效。其中Amplex Red须避光保存。
注意事项:由于乙醇氧化酶的底物特异性问题,本试剂盒不仅可以检测乙醇,也可以检测甲醇,且对正丁醇、异丙醇等也有一定的反应。
Amplex Red在空气中不太稳定,开启后应尽快使用,且在使用过程中需注意适当避光。
Amplex Red的反应产物在还原剂的存在下会很不稳定,因此最终反应体系中的二硫苏糖醇(DTT)、β-巯基乙醇或类似还原剂的浓度应低于10µM。
请确保反应体系的pH值在7-8之间,否则会影响Amplex Red的稳定性和荧光值。
在酒精蒸汽附近存储或使用本试剂盒会造成试剂盒组分吸收酒精,导致高背景。因此本试剂盒在存储和使用时请远离酒精蒸汽。
Amplex Red和Ethanol Assay Buffer需要完全解冻并平衡至室温后再使用,否则会影响检测结果。其它各种溶液使用时应在冰上进行。
为减少稀释液产生的荧光背景带来的误差,样品和标准品的稀释液应该根据样品的种类来定。当样品为BeyoLysis™ Buffer A for Metabolic Assay制备的细胞或组织的裂解样品时,应使用BeyoLysis™ Buffer A for Metabolic Assay稀释,当样品为血液等其它样品时,宜使用Ethanol Assay Buffer稀释。
血清、血浆等样品如果在4ºC保存,保存的时间不得超过2周,否则会影响检测结果的准确性。通常血清样品宜在-20ºC保存,-80ºC保存更佳。
荧光酶标仪检测时须使用适合荧光检测的黑板或白板,推荐使用碧云天BeyoGold™全黑96孔细胞培养板(平底带盖, 独立包装) (FCP966)或BeyoGold™黑色透明底96孔细胞培养板(平底带盖, 独立包装) (FCP965)。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
Samples | 1 | 10 | 20 | 50 |
Ethanol Assay Buffer (µl) | 44 | 440 | 880 | 2200 |
Amplex Red (µl) | 2 | 20 | 40 | 100 |
Enzyme Solution A (µl) | 2 | 20 | 40 | 100 |
Enzyme Solution B (µl) | 2 | 20 | 40 | 100 |
Working Solution (µl) | 50 | 500 | 1000 | 2500 |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
C0016/C0017 | 乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒 | 100次/500次 |
C0018S/M | 乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒(WST-8法) | 100次/500次 |
S0110S | 黄嘌呤氧化酶活性检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0111S | 黄嘌呤氧化酶抑制剂筛选试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0112S/M | Amplex Red黄嘌呤氧化酶活性检测试剂盒 | 100次/500次 |
S0113S | Amplex Red黄嘌呤氧化酶抑制剂筛选试剂盒 | 100次 |
S0114S | 黄嘌呤/次黄嘌呤检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0204S | D-乳酸检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0208S | L-乳酸检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0211S/M | Amplex Red胆固醇与胆固醇酯检测试剂盒 | 100次/500次 |
S0215S/M | Amplex Red游离脂肪酸检测试剂盒 | 100次/500次 |
S0219S/M | Amplex Red甘油三酯检测试剂盒 | 100次/500次 |
S0223S/M | Amplex Red甘油检测试剂盒 | 100次/500次 |
S0227S | Amplex Red L-乳酸检测试剂盒 | 100次 |
S0231S | Amplex Red尿酸与尿酸酶检测试剂盒 | 100次 |
S0235S | Amplex Red磷酸盐检测试剂盒 | 100次 |
S0239S | Amplex Red乙醇检测试剂盒 | 100次 |
S0243S/M | Amplex Red黄嘌呤/次黄嘌呤检测试剂盒 | 100次/500次 |
S0247S | Amplex Red谷氨酸与谷氨酸氧化酶检测试剂盒 | 100次 |
S0251S | Amplex Red过氧化氢与过氧化物酶检测试剂盒 | 100次 |
S0255S | Amplex Red过氧化氢酶检测试剂盒 | 100次 |
S0259S | Amplex Red单胺氧化酶检测试剂盒 | 100次 |
S0263S | Amplex Red鞘磷脂酶检测试剂盒 | 100次 |
S0267S | Amplex Red胆碱与乙酰胆碱检测试剂盒 | 100次 |
S0271S | Amplex Red乙酰胆碱酯酶检测试剂盒 | 100次 |
S0275S | Amplex Red磷脂酰胆碱检测试剂盒 | 100次 |
S0279S | Amplex Red磷脂酶D检测试剂盒 | 100次 |
S0283S | Amplex Red肌酸检测试剂盒 | 100次 |
S0287S | Amplex Red肌酸激酶检测试剂盒 | 100次 |
S0291S | Amplex Red肌酐检测试剂盒 | 100次 |
S0295S | Amplex Red肌氨酸检测试剂盒 | 100次 |
S0299S | Amplex Red丙酮酸检测试剂盒 | 100次 |
S0303S | Amplex Red丙酮酸激酶检测试剂盒 | 100次 |
S0307S | Amplex Red ADP检测试剂盒 | 100次 |
S0311S | Amplex Red磷酸烯醇式丙酮酸检测试剂盒 | 100次 |
S0315S | Amplex Red丙氨酸检测试剂盒 | 100次 |
S0319S | Amplex Red丙氨酸转氨酶检测试剂盒 | 100次 |
S0323S | Amplex Red α-酮戊二酸检测试剂盒 | 100次 |
S0327S | Amplex Red天冬氨酸检测试剂盒 | 100次 |
S0331S | Amplex Red天冬氨酸氨基转移酶检测试剂盒 | 100次 |
S0335S | Amplex Red柠檬酸检测试剂盒 | 100次 |
S0339S | Amplex Red草酰乙酸检测试剂盒 | 100次 |
S0343S | Amplex Red葡萄糖检测试剂盒 | 100次 |
S0347S | Amplex Red葡萄糖氧化酶检测试剂盒 | 100次 |
S0351S | Amplex Red果糖检测试剂盒 | 100次 |
S0355S | Amplex Red乳糖检测试剂盒 | 100次 |
S0359S | Amplex Red半乳糖与乳糖检测试剂盒 | 100次 |
S0363S | Amplex Red半乳糖与半乳糖氧化酶检测试剂盒 | 100次 |
S0367S | Amplex Red麦芽糖检测试剂盒 | 100次 |
S0371S | Amplex Red麦芽糖与葡萄糖检测试剂盒 | 100次 |
S0375S | Amplex Red糖原检测试剂盒 | 100次 |
S0379S | Amplex Red磷酸果糖激酶检测试剂盒 | 100次 |
S0383S | Amplex Red乙酰辅酶A检测试剂盒 | 100次 |
S0387S | Amplex Red辅酶A检测试剂盒 | 100次 |
S0391S | Amplex Red乙酰辅酶A合成酶检测试剂盒 | 100次 |
S0511S | L-苹果酸检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0514S | 苹果酸脱氢酶活性检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0517S | 延胡索酸检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0520S | 延胡索酸酶活性检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0523S | 异柠檬酸检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0526S | 异柠檬酸脱氢酶活性检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0529S | Amplex Red琥珀酸检测试剂盒 | 100次 |
S0530S | 琥珀酸脱氢酶活性检测试剂盒(显色法) | 100次 |
S0532S | Amplex Red琥珀酰辅酶A合成酶检测试剂盒 | 100次 |
S0535S | 支链氨基酸检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0538S | N-乙酰氨基葡萄糖苷酶活性检测试剂盒(显色法) | 100次 |
S0540S | 酪氨酸检测试剂盒(显色法) | 100次 |
S0542S | 酪氨酸酶活性检测试剂盒(显色法) | 100次 |
S0545S | 酪氨酸酶抑制剂筛选试剂盒(显色法) | 100次 |
S0547S | 髓过氧化物酶活性检测试剂盒(显色法) | 100次 |
S0548S | Amplex Red髓过氧化物酶活性检测试剂盒 | 100次 |
S0550S | Amplex Red髓过氧化物酶抑制剂筛选试剂盒 | 100次 |