化学信息：
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化学名
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6-[2-[[4-(2,4-dichlorophenyl)-5-(5-methyl-1H-imidazol-2-yl)pyrimidin-2-yl]amino]ethylamino]pyridine-3-carbonitrile,hydrochloride
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简称
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CHIR-99021 HCl
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别名
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Chir 99021 hcl, Chir-99021 hcl, Chir99021 hcl, CT 99021 hcl, CT-99021 hcl, CT99021 hcl
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中文名
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N/A
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化学式
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C22H18Cl2N8.HCl
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分子量
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501.8
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CAS号
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252917-06-9 (free base)
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纯度
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98%
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溶剂/溶解度
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Water<1mg/ml; DMSO93mg/ml; Ethanol2mg/ml
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溶液配制
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5mg加入1.0ml DMSO，或者每5.02mg加入1ml DMSO，配制成10mM溶液。SF2703-10mM用DMSO配制。
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生物信息：
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产品描述
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CHIR-99021 (CT99021) HCl是CHIR-99021的盐酸盐，是一种GSK-3α/β抑制剂，在无细胞试验中IC50为10nM/6.7nM，可用于区分GSK-3和其最接近的同源物Cdc2与ERK2。
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信号通路
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PI3K/Akt/mTOR; Stem Cells & Wnt
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靶点
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GSK-3β
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GSK-3α
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Tie-2
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FLT1
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KDR
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IC50
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6.7nM
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10nM
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>5μM
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>5μM
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>5μM
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体外研究
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CHIR-99021作用于GSK-3比作用于其最接近的同系物CDC2和ERK2，及其他蛋白激酶选择性高500倍。此外，CHIR-99021只与一组22种药理相关的受体微弱结合，且对一组23种非激酶的酶几乎没有抑制活性。CHIR-99021作用于表达胰岛素受体的CHO-IR细胞，诱导糖原合成酶(GS)激活，EC50为0.763μM。CHIR-99021(3μM)作用于3T3-L1前脂肪细胞，除了模拟胰岛素的作用，抑制GSK-3，使胞内游离β-catenin增加1.9倍，模仿经典Wnt信号通路。在分化的前3天，CHIR-99021处理，抑制脂肪细胞分化，IC50为0.3μM，通过抑制CCAAT/增强子结合蛋白α(C/EBPα)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的诱导作用。不像LiCl和AR-A014418，CHIR-99021处理，即使在高浓度，不会降低INS-1E细胞活力。相反，CHIR-99021增加INS-1E细胞增殖，这种作用具有剂量依赖性，且显著抑制高糖和高棕榈酸诱导的INS-E细胞死亡，这种作用具有浓度依赖性。CHIR-99021浓度低至1μM，处理离体大鼠胰岛，促进β细胞复制，5μM CHIR-99021处理，使细胞复制增长2-3倍。
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体内研究
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CHIR-99021按30mg/kg剂量口服处理患2型糖尿病的啮齿类动物模型，增强葡萄糖代谢，处理3-4小时后，最大血浆葡萄糖减少近150mg/dl，而血浆胰岛素保持或低于对照水平。CHIR-99021按16或48mg/kg剂量口服给药ZDF大鼠，1小时后，再口服葡萄糖，显著改善糖耐量，16mg/kg和48mg/kg处理组的血浆葡萄糖分别减少14%和33%，较高剂量CHIR-99021处理，再口服葡萄糖，还可以降低高血糖。CHIR-99021处理移植小鼠或人造血干细胞(HSC)的受体小鼠，显著增强造血重建功能，说明GSK-3是一种特异性的HSC活性调节剂。
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临床实验
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N/A
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特征
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N/A
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相关实验数据(此数据来自于公开文献，碧云天并不保证其有效性)：
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酶活性检测实验
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方法
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聚丙烯96孔板中每孔充满了含27nM GSK-3α或29nM GSK-3β和0.5μM生物素-CREB 肽底物的300μl缓冲液(50mM Tris HCl，10mM MgCl2，1mM EGTA，1mM二硫苏糖醇，25mM β-glycerophosphate，1mM NaF，0.01% BSA，pH 7.5)。各种浓度CHIR-99021加入3.5μl DMSO中，随后加入50μl ATP储存液，使所有无细胞实验中ATP终浓度为1μM。温育后，100μl等分试样按一式三份转移至每孔含100μl 50μM ATP和20mM EDTA的Combiplate 8孔板中。1小时后，使用用PBS将孔洗涤5次，填充200μl闪烁液，密封，放置30分钟后，然后在闪烁计数器中计数。所有步骤在室温下进行。
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细胞实验
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细胞系
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INS-1E
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浓度
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溶于DMSO，终浓度为20μM
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处理时间
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1或4天
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方法
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细胞在饥饿培养基(只含5mM葡萄糖，1%胎牛血清)中维持24小时。然后使用不同浓度的CHIR-99021处理细胞的1天或4天。通过使用CyQuant染料进行细胞DNA染色，测量细胞数，当结合DNA就会发出荧光。温育30分钟后，使用FLUOstar Optima酶标仪测量荧光。通过BrdUrd掺入法测定细胞复制。最后4小时，BrdUrd标记溶液加入到培养基中，然后使用FixDenat溶液固定细胞，与单克隆anti-BrdUrd-POD抗体温育。每孔加入底物溶液后，在微孔板发光检测仪上使用Analyst HT检测系统测量光发射。
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动物实验
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动物模型
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雌性db/db小鼠或雄性2型糖尿病ZDF大鼠
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配制
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在20mM柠檬酸盐缓冲的15% Captisol中配制成溶液，或在0.5%羧甲基纤维素中配制成悬浮液
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剂量
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~48mg/kg
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给药方式
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口服处理
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参考文献：
1. Ring DB, et al. Diabetes, 2003, 52(3), 588-595.
2. Bennett CN, et al. J Biol Chem, 2002, 277(34), 30998-31004.
3. Mussmann R, et al. J Biol Chem, 2007, 282(16), 12030-12037.
包装清单：
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产品编号
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产品名称
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包装
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SF2703-10mM
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CHIR-99021 HCl (GSK-3抑制剂)
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10mM×0.2ml
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SF2703-5mg
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CHIR-99021 HCl (GSK-3抑制剂)
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5mg
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SF2703-25mg
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CHIR-99021 HCl (GSK-3抑制剂)
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25mg
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说明书
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1份
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保存条件：
-20℃保存，至少一年有效。5mg和25mg包装也可室温保存，至少6个月有效。如果溶于非DMSO溶剂，建议分装后-80℃保存，预计6个月内有效。
注意事项：
本产品对人体有毒，操作时请特别小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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