问：大肠杆菌过表达蛋白过程中可以使用吗？后续要用纯化的蛋白处理细胞，所以不能含有DTT及EDTA等。 小云 2020-08-13 16:07:42
碧云爱答说： 2020-08-14 16:45:51
推荐使用碧云天的P1025/P1026蛋白酶抑制剂混合物(细菌抽提用)，或P1005/P1006蛋白酶抑制剂混合物(通用型)。EDTA为单独包装，不需要可以不添加。
问：本试剂用于细菌蛋白质抽提时蛋白酶抑制剂：磷酸酶抑制剂：EDTA=1:1:1混合吗？磷酸酶和EDTA可以选择性加入吗？需要现配现用吗？ 小云 2019-08-16 14:54:18
碧云爱答说： 2019-08-16 15:27:33
本蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物为50X的储存液，使用时按照1:50的比例加入到裂解液中(例如，1ml裂解液中加入20μl蛋白酶抑制剂混合物以及20μl磷酸酶抑制剂混合物)，混匀后即可使用。含有蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物的裂解液宜现用现配，不宜配制后冻存待后续使用。根据需要，0.05M的EDTA也按照1:50的比例加入到裂解液中。待所需的抑制剂添加完毕并混匀后，就可以开始进行细菌的裂解和蛋白提取。 EDTA是抑制金属蛋白酶的，可以根据需要选择性加入。