问:293T细胞的样品,可以该试剂纯化嘛 小云 2023-08-04 14:10:07

碧云爱答说: 2023-09-27 11:34:36

确认下细胞裂解后,蛋白是否在上清中。洗脱液含有高浓度咪唑,不能直接用于BCA蛋白浓度检测。

小云说: 2023-09-26 22:37:42

细胞能用这个试剂盒做蛋白纯化吗,条件也是差不多的吗?怎么确定是非变性还是变性呢?测这个蛋白纯化的浓度可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒吗?

碧云爱答说: 2023-08-08 09:38:19

理论上可以的

问:图中条带分别为沉淀,流穿液,洗涤液,Marker和洗脱(没洗脱下来),结果发现洗脱液中没有目的蛋白,流穿液中有大量目的蛋白,洗涤液中有少量目的蛋白,请问这是为什么? 小云 2023-09-16 08:47:13

碧云爱答说: 2023-09-18 13:28:58

1.蛋白无法与BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐变性剂型)结合 a.测序检查基因序列的读码框是否正确。 b.尝试将标签加在蛋白的另一端。 c.增加BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐变性剂型)与蛋白结合时间(如4℃过夜)。 d.如果使用预装柱,可收集裂解液上柱后的穿流液并多次重复上柱。 e.检查所有缓冲液和溶液的pH值是否正确。 f.确认体系中所用各种试剂的浓度在镍柱的耐受范围以内。 g.自行配制裂解液,降低裂解液中的咪唑浓度。

问:你好,请问变性裂解液中加入的是尿素还是盐酸胍 小云 2023-09-09 15:19:39

碧云爱答说: 2023-09-11 10:01:09

变性剂是尿素。

问:变性条件下纯化的蛋白应该用什么方法透析呢?为什么尿素透析后反而没有条带了? 小云 2023-09-08 21:22:20

碧云爱答说: 2023-09-11 09:51:15

可以长度用梯度尿素配制在PBS溶液中进行透析。

问:请问,变性条件下纯化蛋白,我已经提前高压破碎大肠杆菌后,可以省略超声破碎的步骤,其他步骤都照样进行可以吗 小云 2023-08-28 11:00:50

碧云爱答说: 2023-08-28 13:22:59

可以的。

问:你好,我用了该化试剂盒进行变形条件下的纯化。但是发现纯化效果不太好,它的大分子蛋白杂带难以去除。这是什么原因呢,我该怎么优化呢?此外,我应该怎么判断用变性条件还是非变性条件呢。 小云 2023-08-20 12:11:20

碧云爱答说: 2023-08-20 19:05:46

请老师将结果图片进行适当的标注,然后发送到info@beyotime.com邮箱,谢谢。

问:使用说明里面没看到洗脱液,裂解液配方,配方到底在哪儿看啊? 小云 2023-08-09 10:07:25

碧云爱答说: 2023-08-09 16:26:10

查看碧云天P2233-10ml BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐变性剂型)使用说明中的配方

问:请问耐变性和耐螯合两款产品怎么选择? 小云 2023-07-20 17:48:32

碧云爱答说: 2023-07-25 10:55:28

P2226不能耐受变性剂,可溶性蛋白直接做,包涵体用尿素或盐酸胍处理后,先透析去除变性剂,再用这个产品。P2229S不能耐受还原剂、螯合剂等,可溶性蛋白和包涵体分别在非变性和变性条件下操作

问:我们装了上垫片之后,过柱子的流速很慢,请问这个需要加装上垫片吗? 小云 2023-06-29 13:33:53

碧云爱答说: 2023-06-30 13:46:44

一般不需要加上面的垫片,如果加了,需要配专用推杆使用,目前我们没有产品出售

问:请问非变性裂解液可以自己配制吗?试剂盒里的用完了 小云 2023-05-04 17:36:33

碧云爱答说: 2023-05-06 14:59:37

可以,查看P2233-10ml BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐变性剂型)使用说明中的配方