问:您好,我用该预制胶电泳是marker分离得很好。但是转膜后,marker全花了。曝光未显示任何蛋白,包括内参。所有的条件都一直的情况下,更换成自制的胶并不再出现上述问题,请问是什么原因,谢谢/ 佚名 (游客) 2018-04-21 23:24:59

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碧云爱答(管理员)说: 2018-04-23 15:06:02

建议转膜时间再优化一下。 湿转时300-400mA恒定电流转膜30-60分钟,随着时间增加电压会逐步降低,例如从约150-200V降低到100-150V左右。由于本预制胶厚度为1mm,须适当控制转膜时间,以免蛋白转到膜外。可以根据预制胶上残留的预染marker及膜上的预染marker确定转膜效率,并对转膜条件进行适当调整。如果出现预制胶和膜上的预染marker都很少,说明蛋白有可能是转到膜外了。

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