Calpain 1 Large Subunit抗体

 产品编号: AC012
 产品包装: >20次
 产品价格: 873.00元
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AC012 Calpain 1 Large Subunit抗体 >20次 873.00元


来源

用途

交叉反应性

抗体识别位点

分子量

Rabbit

WB, IF

H, M, R

Calpain 1 large subunit

75/80kD

    WB, Western blot; IF, Immunofluorescence.
    H, human; M, mouse; R, rat.
    本Calpain 1 large subunit抗体(Calpain 1 large subunit antibody)为进口分装,用人工合成的人Calpain 1 large subunit一段多肽进行适当修饰后免疫rabbit,然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化得到的高纯度抗体。
    本Calpain 1 large subunit抗体可以检测内源性calpain 1 large subunit,也可以检测calpain 1 large subunit在Leu28位剪切产生的片段(calpain 1 large subunit autoproteolytically cleaved at Leu28)。
    Calpains是一类定位在细胞浆中,高度保守的,并且在哺乳动物组织中广泛存在的Ca2+依赖的半胱氨酸蛋白酶。有功能活性的calpain是由一个30kDa的调节亚基和一个80kDa左右的催化亚基组成的异源二聚体。Calpain 1和calpain 2的30kDa小亚基是相同的,但80kDa的大亚基则不同。在体外,calpain 1的激活需要微摩尔(μM)浓度的钙离子,calpain 2的激活则需要毫摩尔(mM)浓度的钙离子,因此calpain 1也被称为mu-calpain或μ-calpain,而calpain 2也被称为m-calpain。目前已有大量的关于calpain的活性调节的研究,表明其蛋白酶活性主要为转录后调节,机制主要有钙离子浓度调控、异源二聚体的亚细胞定位、通过EGFR-Erk信号通路诱导的磷酸化、内源性抑制剂(calpastatin)和自身剪切。Calpastatin可以抑制calpain在Gly27和Leu28之间的自身剪切。Calpains剪切的蛋白底物包括生长因子受体或激素受体、蛋白激酶、磷酸酯酶和细胞骨架蛋白等。Calpain可以影响细胞粘附和细胞骨架重排。Calpain可以通过激活Rac1和RhoA,影响focal adhesion形成,影响细胞的铺展和迁移(spreading and migration)。Calpain活性的控制受到药品开发研究的关注, calpain活性的抑制可以减缓肿瘤侵袭或改善慢性炎症。目前还发现calpain和2型糖尿病、神经退行性疾病、肌肉萎缩症、脑缺血和脑损伤有关。
    配套提供了Western一抗稀释液,可以用于Western检测时的一抗稀释。
    建议抗体使用时的稀释比例如下(实际使用时需根据抗原水平的高低作适当调整):

WB

IF

1:1000

1:100

    本抗体如果用于常规的Western检测,至少可以检测20次。
包装清单:

产品编号

产品名称

包装

AC012-1

Calpain 1 Large Subunit抗体

20μl

AC012-2

Western一抗稀释液

20ml

说明书

1份

保存条件:
    Calpain1 large subunit抗体-20℃保存,Western一抗稀释液-20℃或4℃保存,一年有效。Western一抗稀释液优先推荐4℃保存,长期不使用可以考虑-20℃保存,但冻融可能会导致出现轻微的浑浊和少量不溶物。
注意事项:
    对于本抗体,Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜,如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。
    在Western实验后,请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,4℃保存。
    回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明

使用说明:
1. Western检测:
A. 按照1:1000用碧云天提供的Western一抗稀释液稀释抗体。
B. 把经过封闭的蛋白膜与稀释好的一抗4℃缓慢摇动过夜,确保稀释的抗体至少能在摇动的瞬间覆盖蛋白
   膜。
C. 回收稀释的一抗,4℃保存以备下次继续使用。
D. 按照Western的实验步骤进行后续的洗涤、二抗孵育、洗涤和检测等操作。具体操作可以参考如下网页:
   http://www.beyotime.com/western.htm
2. 免疫染色:
    可以使用碧云天生产的免疫染色一抗稀释液(P0103)稀释抗体,使用后注意回收稀释好的一抗,具体操作可以参考如下网页: http://www.beyotime.com/immunol-staining.htm
3. 其它实验操作请自行参考适当的protocol进行。

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