pARE-luc(报告基因质粒)

 产品编号: D2112
 产品包装: 1μg
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D2112 pARE-luc(报告基因质粒) 1μg 862.00元

    pARE-luc(报告基因质粒)是碧云天自行研发的用于检测基于顺式作用元件antioxidant response
element(ARE,抗氧化响应元件)的转录活性水平的报告基因质粒。pARE-luc是以碧云天的pGL6质粒为模板,在其多克隆位点插入了2个ARE结合位点,可以高灵敏度地检测顺式作用元件ARE的激活水平,可以用于检测细胞的抗氧化水平或氧化应激状态。
    pGL6质粒模板是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)报告基因检测的
新一代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进,一方面对于luciferase的编码进行了改进,确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达,同时整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理,在保持原有功能不变的情况下,使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。
    pARE-luc质粒的主要信息如下:
    Base pairs                                                          5622
    ARE response element(ARE RE)                                        32-77
    luc2 reporter gene                                                  123-1775
    SV40 late poly(A)signal                                             1810-2031
    SV40 early enhancer/promoter                                        2079-2497
    Synthetic neomycin phosphotransferase
    (Neor)coding region                                                 2522-3316
    Synthetic poly(A)signal                                             3341-3389
    Reporter Vector primer 4(RVprimer4)binding region                   3456-3475
    ColE1-derived plasmid replication origin                            3713
    Synthetic Beta-lactamase(Ampr)coding region                         4504-5364
    Synthetic poly(A)signal/transcriptional pause site                  5469-5622
    Reporter Vector primer 3(RVprimer3)binding region                   5571-5590
    pARE-luc质粒的图谱如下:
            
    pARE-luc的多克隆位点及ARE response element的详细图谱如下:
        BglI         KpnI  NheI   XhoI   ARE response element
    1  GGCCTAACTG GCCGGTACCG CTAGCCTCGA GACTGAGGGT GACTCAGCAA
       CCGGATTGAC CGGCCATGGC GATCGGAGCT CTGACTCCCA CTGAGTCGTT
                                    BglII      HindIII
    51 AATCACTGAG GGTGACTCAG CAAAATCAGA TCTGCAGAAG CTTGGCAATC
       TTAGTGACTC CCACTGAGTC GTTTTAGTCT AGACGTCTTC GAACCGTTAG
    pARE-luc中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pARE-luc)包括:
    Aat II    Afl II   Asc I     Ase I    Bsa I       BsaA I     BsiW I
    BspM II   BssH II  Eco72 I   EcoR I   EcoR V      Mlu I      Nde I
    Nru I     PflM I   Pme I     Pml I    Psp1406 I   PspA I     Rsr II
    Sac I     Sma I    SnaB I    Spl I    Srf I       Tth111 I   Vsp I
    Xcm I     Xma I
    pARE-luc中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pARE-luc once)包括:

Sfi I      GGCCN,NNN`NGGCC  9
Bgl I      GCCN,NNN`NGGC    9
Acc65 I    G`GTAC,C         15
Asp718     G`GTAC,C         15
Kpn I      G,GTAC`C         19
Nhe I      G`CTAG,C         21
PaeR7 I    C`TCGA,G         27
Xho I      C`TCGA,G         27
Bgl II     A`GATC,T         79
Hind III   A`AGCT,T         89
BsrG I     T`GTAC,A         614
Dra III    CAC,NNN`GTG      1270
Gsu I      CTGGAG 21/19     1503
Bpm I      CTGGAG 22/20     1504
Apo I      R`AATT,Y         1886
Mun I      C`AATT,G         1950
BamH I     G`GATC,C         2043
Stu I      AGG|CCT          2476

EcoN I      CCTNN`N,NNAGG   2997
BsiC I      TT`CG,AA        3392
BstB I      TT`CG,AA        3392
Sal I       G`TCGA,C        3406
Afl III     A`CRYG,T        3656
ApaL I      G`TGCA,C        3970
HgiE II     ACCNNNNNNGGT -1/134235
Not I       GC`GGCC,GC      4476
BstX I      CCAN,NNNN`NTGG  4500
BstE II     G`GTNAC,C       4503
Ahd I       GACNN,N`NNGTC   4578
Bsu36 I     CC`TNA,GG       4934
Pvu I       CG,AT`CG        4948
Sac II      CC,GC`GG        4972
Bst1107 I   GTA|TAC         5088
Xca I       GTA|TAC         5088
Spe I       A`CTAG,T        5407
BsmB I      CGTCTC 7/11     5420

    pARE-luc质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
    RVprimer3(5571-5590):
    CTA GCA AAA TAG GCT GTC CC
    pARE-luc的全序列信息:D2112 pARE-luc-seq.txt
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产品编号

产品名称

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D2112

pARE-luc(报告基因质粒)

1μg

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保存条件:
   -20℃保存。
注意事项:
    本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人
或单位。
    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明

使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提
   获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. pARE-luc可以用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可以采用碧云天的萤火虫萤光素酶报告基因检测
   试剂盒(RG005/RG006)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG027/RG028)。

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1. Li C, Pan Z, Xu T, Zhang C, Wu Q, Niu Y.
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   through PI3K/Akt/GSK-3β signaling events in PC12 cells exposed to lead.

   Neurotoxicol Teratol. 2014 Sep 4;46C:1-9. doi: 10.1016/j.ntt.2014.08.007.
2. Huang K, Chen C, Hao J, Huang J, Wang S, Liu P, Huang H.
   Polydatin promotes Nrf2-ARE anti-oxidative pathway through activating Sirt1 to resist AGEs-
   induced upregulation of fibronetin and transforming growth factor-β1 in rat glomerular
   messangial cells.

   Mol Cell Endocrinol. 2014 Sep 2. pii: S0303-7207(14)00271-8. doi: 10.1016/
   j.mce.2014.08.014.




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