pMyc-TA-luc(报告基因质粒)

 产品编号: D2198
 产品包装: 1μg
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D2198 pMyc-TA-luc(报告基因质粒) 1μg 862.00元

    pMyc-TA-luc(报告基因质粒)是碧云天自行研发的用于检测Myc转录活性水平的报告基因质粒。
pMyc-TA-luc是以碧云天的pGL6-TA质粒为模板,在其多克隆位点插入了多个Myc结合位点(E-box DNA binding element),可以高灵敏度地检测Myc的激活水平。Myc可以和Max形成异源二聚体,结合到E-box DNA binding element,启动促进细胞增殖的基因转录。
    pGL6-TA质粒是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)报告基因检测的新一代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进,一方面对于luciferase的编码进行了改进,确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达,同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理,在保持原有功能不变的情况下,使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。
    pMy-TA-luc质粒的主要信息如下:
    Base pairs                                                     5647
    Myc response element                                           26-61
    Minimal TA promoter (pTA)                                      84-106
    luc2 reporter gene                                             148-1800
    SV40 late poly(A) signal                                       1835-2056
    SV40 early enhancer/promoter                                   2104-2522
    Synthetic neomycin phosphotransferase
    (Neor) coding region                                           2547-3341
    Synthetic poly(A) signal                                       3366-3414
    Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region            3481-3500
    ColE1-derived plasmid replication origin                       3738
    Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region                  4529-5389
    Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site            5494-5647
    Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region            5596-5615
    pMyc-TA-luc质粒的图谱如下:
             
    pMyc-TA-luc的多克隆位点及Myc response element(E-box DNA binding element)的详细图谱如下:
        BglI         KpnI  NheI        Myc response element
    1  GGCCTAACTG GCCGGTACCG CTAGCCACGT GCACGTGCAC GTGCACGTGC
       CCGGATTGAC CGGCCATGGC GATCGGTGCA CGTGCACGTG CACGTGCACG
                   BglII      HindIII      Minimal TA promoter
    51 ACGTGCACGT GAGATCTGCA GAAGCTTAGA CACTAGAGGG TATATAATGG
       TGCACGTGCA CTCTAGACGT CTTCGAATCT GTGATCTCCC ATATATTACC

    pMyc-TA-luc中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pMyc-TA-luc)包括:
     Aat II     Afl II   Asc I   Ase I  Bsa I  BsiW I   BspM II  BssH II
     EcoR I     EcoR V   Mlu I   Nde I  Nru I  PaeR7 I  PflM I   Pme I
     Psp1406 I  PspA I   Rsr II  Sac I  Sma I  SnaB I   Spl I    Srf I
     Tth111 I   Vsp I    Xcm I   Xho I  Xma I  Xmn I
    pMyc-TA-luc中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pMyc-TA-luc once)包括:

Sfi I     GGCCN,NNN`NGGCC  9
Bgl I     GCCN,NNN`NGGC    9
Acc65 I   G`GTAC,C         15
Asp718    G`GTAC,C         15
Kpn I     G,GTAC`C         19
Nhe I     G`CTAG,C         21
Bgl II    A`GATC,T         63
Hind III  A`AGCT,T         73
BsrG I    T`GTAC,A         639
Dra III   CAC,NNN`GTG      1295
Gsu I     CTGGAG 21/19     1528
Bpm I     CTGGAG 22/20     1529
Apo I     R`AATT,Y         1911
Mun I     C`AATT,G         1975
BamH I    G`GATC,C         2068
Stu I     AGG|CCT          2501
EcoN I    CCTNN`N,NNAGG    3022
BsiC I    TT`CG,AA         3417

BstB I     TT`CG,AA         3417
Sal I      G`TCGA,C         3431
Afl III    A`CRYG,T         3681
ApaL I     G`TGCA,C         3995
HgiE II    ACCNNNNNNGGT  -1/134260
Not I      GC`GGCC,GC       4501
BstX I     CCAN,NNNN`NTGG   4525
BstE II    G`GTNAC,C        4528
Ahd I      GACNN,N`NNGTC    4603
Bsu36 I    CC`TNA,GG        4959
Pvu I      CG,AT`CG         4973
Sac II     CC,GC`GG         4997
Bst1107 I  GTA|TAC          5113
Xca I      GTA|TAC          5113
Spe I      A`CTAG,T         5432
BsmA I     GTCTC`/9         5444
BsmB I     CGTCTC 7/11      5445

    pMyc-TA-luc质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
    RVprimer3 (5596-5615):
    CTA GCA AAA TAG GCT GTC CC
    pMyc-TA-luc的全序列信息: D2198 pMyc-TA-luc-seq.txt
包装清单:

产品编号

产品名称

包装

D2198

pMyc-TA-luc(报告基因质粒)

1μg

说明书

1份

保存条件:
   -20℃保存。
注意事项:
    本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人
或单位。
    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明

使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。
   抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. pMyc-TA-luc可以用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可采用碧云天的萤火虫萤光素酶报告基因检测
   试剂盒(RG005/RG006)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG027/RG028)。
3. 可以激活Myc的试剂,可以用作pMyc-TA-luc报告基因检测时的阳性对照。

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