pNFκB-TA-luc(报告基因质粒)

 产品编号: D2207
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D2207 pNFκB-TA-luc(报告基因质粒) 1μg 862.00元

    pNFκB-TA-luc(报告基因质粒)是碧云天自行研发的用于检测NFκB转录活性水平的报告基因质粒。
pNFκB-TA-luc是以碧云天的pGL6-TA质粒为模板,在其多克隆位点插入了多个NFκB结合位点,可以高灵敏度地检测NFκB的激活水平。
    pGL6-TA质粒是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)报告基因检测的
新一代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进,一方面对于luciferase的编码进行了改进,确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达,同时对整个质粒中所有的可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理,在保持原有功能不变的情况下,使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。
    pNFκB-TA-luc质粒的主要信息如下:
    Base pairs                                              5651
    NFκB response element (κB)                              26-65
    Minimal TA promoter (pTA)                               88-110
    luc2 reporter gene                                      152-1804
    SV40 late poly(A) signal                                1839-2060
    SV40 early enhancer/promoter                            2108-2526
    Synthetic neomycin phosphotransferase
     (Neor) coding region                                   2551-3345
    Synthetic poly(A) signal                                3370-3418
    Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region     3485-3504
    ColE1-derived plasmid replication origin                3742
    Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region           4533-5393
    Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site     5498-5651
    Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region     5600-5619
    pNFκB-TA-luc质粒的图谱如下:
             
    pNFκB-TA-luc的多克隆位点及NFκB response element的详细图谱如下:
        BglI         KpnI  NheI        NFkB response elememt
     1 GGCCTAACTG GCCGGTACCG CTAGCGGGAA TTTCCGGGAA TTTCCGGGAA
       CCGGATTGAC CGGCCATGGC GATCGCCCTT AAAGGCCCTT AAAGGCCCTT
                       BglII      HindIII      Minimal TA promoter
    51 TTTCCGGGAA TTTCCAGATC TGCAGAAGCT TAGACACTAG AGGGTATATA
       AAAGGCCCTT AAAGGTCTAG ACGTCTTCGA ATCTGTGATC TCCCATATAT
    pNFκB-TA-luc中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pNFκB-TA-luc)包括:
    Aat II     Afl II     Asc I      Ase I      Bsa I     BsaA I     BsiW I     BspM II
    BssH II    Eco72 I    EcoR I     EcoR V     Mlu I     Nde I      Nru I      PaeR7 I
    PflM I     Pme I      Pml I      Psp1406 I  PspA I    Rsr II     Sac I      Sma I
    SnaB I     Spl I      Srf I      Tth111 I   Vsp I     Xcm I      Xho I      Xma I
    pNFκB-TA-luc中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pNFκB-TA-luc once)包括:

Sfi I       GGCCN,NNN`NGGCC 9
Bgl I       GCCN,NNN`NGGC   9
Acc65 I     G`GTAC,C        15
Asp718      G`GTAC,C        15
Kpn I       G,GTAC`C        19
Nhe I       G`CTAG,C        21
Bgl II      A`GATC,T        67
Hind III    A`AGCT,T        77
BsrG I      T`GTAC,A        643
Dra III     CAC,NNN`GTG     1299
Gsu I       CTGGAG 21/19    1532
Bpm I       CTGGAG 22/20    1533
Mun I       C`AATT,G        1979
BamH I      G`GATC,C        2072
Stu I       AGG|CCT         2505
EcoN I      CCTNN`N,NNAGG   3026
BsiC I      TT`CG,AA        3421

BstB I      TT`CG,AA        3421
Sal I       G`TCGA,C        3435
Afl III     A`CRYG,T        3685
ApaL I      G`TGCA,C        3999
HgiE II     ACCNNNNNNGGT -1/134264
Not I       GC`GGCC,GC      4505
BstX I      CCAN,NNNN`NTGG  4529
BstE II     G`GTNAC,C       4532
Ahd I       GACNN,N`NNGTC   4607
Bsu36 I     CC`TNA,GG       4963
Pvu I       CG,AT`CG        4977
Sac II      CC,GC`GG        5001
Bst1107 I   GTA|TAC         5117
Xca I       GTA|TAC         5117
Spe I       A`CTAG,T        5436
BsmA I      GTCTC`/9        5448
BsmB I      CGTCTC 7/11     5449

    pNFκB-TA-luc质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
    RVprimer3(5600-5619):
    CTA GCA AAA TAG GCT GTC CC
    pNFκB-TA-luc的全序列信息:D2207-pNFkappaB-TA-luc-seq.txt
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D2207

pNFκB-TA-luc(报告基因质粒)

1μg

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   -20℃保存。
注意事项:
    本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人
或单位。
    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明

使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。
   抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. pNFκB-TA-luc可用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可以采用碧云天的萤火虫萤光素酶报告基因检
   测试剂盒(RG005/RG006)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG027/RG028)。
3. TNF-α、IL-1β和LPS等是常见的可以激活NFκB的试剂,可以用作pNFκB-TA-luc报告基因检测时的阳
   性对照。


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