pSTAT3-TA-luc(报告基因质粒)

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D2259 pSTAT3-TA-luc(报告基因质粒) 1μg 862.00元

    pSTAT3-TA-luc(报告基因质粒)是碧云天自行研发的用于检测STAT3(Signal transducer and
activator of transcription 3)转录活性水平的报告基因质粒。pSTAT3-TA-luc是以碧云天的pGL6-TA质粒为模板,在其多克隆位点插入了多个STAT3结合位点,可以高灵敏度地检测STAT3的激活水平。
    pGL6-TA质粒是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)报告基因检测的新一代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进,一方面对于luciferase的编码进行了改进,确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达,同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理,在保持原有功能不变的情况下,使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。
    pSTAT3-TA-luc质粒的主要信息如下:
    Base pairs                                                     5672
    STAT3 response element                                         32-86
    Minimal TA promoter (pTA)                                      109-131
    luc2 reporter gene                                             173-1825
    SV40 late poly(A) signal                                       1860-2081
    SV40 early enhancer/promoter                                   2129-2547
    Synthetic neomycin phosphotransferase
    (Neor) coding region                                           2572-3366
    Synthetic poly(A) signal                                       3391-3439
    Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region            3506-3525
    ColE1-derived plasmid replication origin                       3763
    Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region                  4554-5414
    Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site            5519-5672
    Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region            5621-5640
    pSTAT3-TA-luc质粒的图谱如下:
             
    pSTAT3-TA-luc的多克隆位点及STAT3 response element的详细图谱如下:
         BglI         KpnI  NheI   XhoI   STAT3 response element
    1   GGCCTAACTG GCCGGTACCG CTAGCCTCGA GTGCTTCCCG AACGTTGCTT
        CCGGATTGAC CGGCCATGGC GATCGGAGCT CACGAAGGGC TTGCAACGAA
                                               BglII      HindIII
    51  CCCGAACGTT GCTTCCCGAA CGTTGCTTCC GAACGTAGAT CTGCAGAAGC
        GGGCTTGCAA CGAAGGGCTT GCAACGAAGG CTTGCATCTA GACGTCTTCG
                Minimal TA promoter
    101 TTAGACACTA GAGGGTATA
        AATCTGTGAT CTCCCATAT

    pSTAT3-TA-luc中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pSTAT3-TA-luc)包括:
     Aat II    Afl II     Asc I    Ase I    Bsa I   BsaA I   BsiW I   BspM II
     BssH II   Eco72 I    EcoR I   EcoR V   Mlu I   Nde I    Nru I    PflM I
     Pme I     Pml I      PspA I   Rsr II   Sac I   Sma I    SnaB I   Spl I
     Srf I     Tth111 I   Vsp I    Xcm I    Xma I   Xmn I
    pSTAT3-TA-luc中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pSTAT3-TA-luc once)包括:

Sfi I      GGCCN,NNN`NGGCC   9
Bgl I      GCCN,NNN`NGGC     9
Acc65 I    G`GTAC,C          15
Asp718     G`GTAC,C          15
Kpn I      G,GTAC`C          19
Nhe I      G`CTAG,C          21
PaeR7 I    C`TCGA,G          27
Xho I      C`TCGA,G          27
Bgl II     A`GATC,T          88
Hind III   A`AGCT,T          98
BsrG I     T`GTAC,A          664
Dra III    CAC,NNN`GTG       1320
Gsu I      CTGGAG 21/19      1553
Bpm I      CTGGAG 22/20      1554
Apo I      R`AATT,Y          1936
Mun I      C`AATT,G          2000
BamH I     G`GATC,C          2093
Stu I      AGG|CCT           2526
EcoN I     CCTNN`N,NNAGG     3047

BsiC I      TT`CG,AA          3442
BstB I      TT`CG,AA          3442
Sal I       G`TCGA,C          3456
Afl III     A`CRYG,T          3706
ApaL I      G`TGCA,C          4020
HgiE II     ACCNNNNNNGGT   -1/134285
Not I       GC`GGCC,GC        4526
BstX I      CCAN,NNNN`NTGG    4550
BstE II     G`GTNAC,C         4553
Ahd I       GACNN,N`NNGTC     4628
Bsu36 I     CC`TNA,GG         4984
Pvu I       CG,AT`CG          4998
Sac II      CC,GC`GG          5022
Bst1107 I   GTA|TAC           5138
Xca I       GTA|TAC           5138
Spe I       A`CTAG,T          5457
BsmA I      GTCTC`/9          5469
BsmB I      CGTCTC 7/11       5470

    pSTAT3-TA-luc质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
    RVprimer3 (5621-5640):
    CTA GCA AAA TAG GCT GTC CC
    pSTAT3-TA-luc的全序列信息: D2259 pSTAT3-TA-luc-seq.txt
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D2259

pSTAT3-TA-luc(报告基因质粒)

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   -20℃保存。
注意事项:
    本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人
或单位。
    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明

使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。
   抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. pSTAT3-TA-luc可以用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可采用碧云天的萤火虫萤光素酶报告基因检
   测试剂盒(RG005/RG006)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG027/RG028)。
3. 可以激活STAT3的试剂,可以用作pSTAT3-TA-luc报告基因检测时的阳性对照。

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