pIL-6-promoter-luc(报告基因质粒)

 产品编号: D2386
 产品包装: 1μg
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D2386 pIL-6-promoter-luc(报告基因质粒) 1μg 862.00元

    pIL-6-promoter-luc(报告基因质粒)是碧云天自行研发的用于检测IL-6 promoter转录活性水平的报告基因质粒。
    pIL-6-promoter-luc是以碧云天的pGL6质粒为模板,在其多克隆位点插入了human IL-6的启动子序
列(-637bp~+53bp),可以高灵敏度地检测IL-6 promoter的激活水平。
    IL-6(Interleukin-6),中文名为白细胞介素-6,简称白介素6,是一种非常重要的炎性细胞因子,
在炎性疾病的发生发展过程中起重要作用,常作为炎症反应的重要指标。
    pGL6质粒是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)报告基因检测的新一
代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进,一方面对于luciferase的编码进行了改进,确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达,同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理,在保持原有功能不变的情况下,使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。
    pIL-6-promoter-luc质粒的主要信息如下:
    Base pairs                                                  6252
    IL-6 promoter                                               20-707
    luc2 reporter gene                                          753-2405
    SV40 late poly(A) signal                                    2440-2661
    SV40 early enhancer/promoter                                2709-3127
    Synthetic neomycin phosphotransferase (Neor) coding region  3152-3946
    Synthetic poly(A) signal                                    3971-4019
    Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region         4086-4105
    ColE1-derived plasmid replication origin                    4343
    Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region               5134-5994
    Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site         6099-6252
    Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region         6201-6220
    pIL-6-promoter-luc质粒的图谱如下:
             
    pIL-6-promoter-luc的多克隆位点及IL-6 promoter的详细图谱如下:
         BglI         KpnI                 IL-6 promoter
    1   GGCCTAACTG GCCGGTACCT GGAGACGCCT TGAAGTAACT GCACGAAATT
        CCGGATTGAC CGGCCATGGA CCTCTGCGGA ACTTCATTGA CGTGCTTTAA
    51  TGAGGGTGGC CAGGCAGTTC TACAACAGCC GCTCACAGGG AGAGCCAGAA
        ACTCCCACCG GTCCGTCAAG ATGTTGTCGG CGAGTGTCCC TCTCGGTCTT
    101 CACAGAAGAA CTCAGATGAC TGGTAGTATT ACCTTCTTCA TAATCCCAGG
        GTGTCTTCTT GAGTCTACTG ACCATCATAA TGGAAGAAGT ATTAGGGTCC
    151 CTTGGGGGGC TGCGATGGAG TCAGAGGAAA CTCAGTTCAG AACATCTTTG
        GAACCCCCCG ACGCTACCTC AGTCTCCTTT GAGTCAAGTC TTGTAGAAAC
    201 GTTTTTACAA ATACAAATTA ACTGGAACGC TAAATTCTAG CCTGTTAATC
        CAAAAATGTT TATGTTTAAT TGACCTTGCG ATTTAAGATC GGACAATTAG
    251 TGGTCACTGA AAAAAAAAAT TTTTTTTTTT CAAAAACCAT AGCTTTAGCT
        ACCAGTGACT TTTTTTTTTA AAAAAAAAAA GTTTTTGGTA TCGAAATCGA
    301 TATTTTTTTT CTCTTTGTAA AACTTCGTGC ATGACTTCAG CTTTACTCTT
        ATAAAAAAAA GAGAAACATT TTGAAGCACG TACTGAAGTC GAAATGAGAA
    351 TGTCAAGACA TGCCAAAGTG CTGAGTCACT AATAAAAGAA AAAAAGAAAG
        ACAGTTCTGT ACGGTTTCAC GACTCAGTGA TTATTTTCTT TTTTTCTTTC
                                      NheI
    401 TAAAGGAAGA GTGGTTCTGC TTCTTAGCGC TAGCCTCAAT GACGACCTAA
        ATTTCCTTCT CACCAAGACG AAGAATCGCG ATCGGAGTTA CTGCTGGATT
    451 GCTGCACTTT TCCCCCTAGT TGTGTCTTGC GATGCTAAAG GACGTCACAT
        CGACGTGAAA AGGGGGATCA ACACAGAACG CTACGATTTC CTGCAGTGTA
    501 TGCACAATCT TAATAAGGTT TCCAATCAGC CCCACCCGCT CTGGCCCCAC
        ACGTGTTAGA ATTATTCCAA AGGTTAGTCG GGGTGGGCGA GACCGGGGTG
    551 CCTCACCCTC CAACAAAGAT TTATCAAATG TGGGATTTTC CCATGAGTCT
        GGAGTGGGAG GTTGTTTCTA AATAGTTTAC ACCCTAAAAG GGTACTCAGA
                                      TATA box
    601 CAATATTAGA GTCTCAACCC CCAATAAATA TAGGACTGGA GATGTCTGAG
        GTTATAATCT CAGAGTTGGG GGTTATTTAT ATCCTGACCT CTACAGACTC
            +1
    651 GCTCATTCTG CCCTCGAGCC CACCGGGAAC GAAAGAGAAG CTCTATCTCC
        CGAGTAAGAC GGGAGCTCGG GTGGCCCTTG CTTTCTCTTC GAGATAGAGG
               BglII      HindIII
    701 CCTCCAGAGA TCTGCAGAAG CTTGGCAATC CGGTACTGTT GGTAAAGCCA
        GGAGGTCTCT AGACGTCTTC GAACCGTTAG GCCATGACAA CCATTTCGGT

    pIL-6-promoter-luc中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pIL-6-promoter-luc)包括:
     Afl II    Asc I       Ase I    Bsa I    BsaA I   BsiW I   BspM II   BssH II
     Eco72 I   EcoR I      EcoR V   Mlu I    Nde I    Nru I    PflM I    Pme I
     Pml I     Psp1406 I   PspA I   Rsr II   Sac I    Sma I    SnaB I    Spl I
     Srf I     Tth111 I    Vsp I    Xcm I    Xma I    Xmn I
    pIL-6-promoter-luc中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pIL-6-promoter-luc once)包括:

Sfi I      GGCCN,NNN`NGGCC  9
Bgl I      GCCN,NNN`NGGC    9
Acc65 I    G`GTAC,C         15
Aat II     G,ACGT`C         496
PaeR7 I    C`TCGA,G         664
Xho I      C`TCGA,G         664
Bgl II     A`GATC,T         709
Hind III   A`AGCT,T         719
BsrG I     T`GTAC,A         1244
Dra III    CAC,NNN`GTG      1900
Mun I      C`AATT,G         2580
BamH I     G`GATC,C         2673
Stu I      AGG|CCT          3106
EcoN I     CCTNN`N,NNAGG    3627
BsiC I     TT`CG,AA         4022
BstB I     TT`CG,AA         4022
Sal I      G`TCGA,C         4036

Asp718      G`GTAC,C        15
Kpn I       G,GTAC`C        19
Nhe I       G`CTAG,C        430
Afl III     A`CRYG,T        4286
ApaL I      G`TGCA,C        4600
HgiE II     ACCNNNNNNGGT -1/134865
Not I       GC`GGCC,GC      5106
BstX I      CCAN,NNNN`NTGG  5130
BstE II     G`GTNAC,C       5133
Ahd I       GACNN,N`NNGTC   5208
Bsu36 I     CC`TNA,GG       5564
Pvu I       CG,AT`CG        5578
Sac II      CC,GC`GG        5602
Bst1107 I   GTA|TAC         5718
Xca I       GTA|TAC         5718
Spe I       A`CTAG,T        6037

    pIL-6-promoter-luc质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
    RVprimer3(6201-6220):
    CTA GCA AAA TAG GCT GTC CC
    pIL-6-promoter-luc的全序列信息: D2386 pIL-6-promoter-luc-seq.txt
包装清单:

产品编号

产品名称

包装

D2386

pIL-6-promoter-luc(报告基因质粒)

1μg

说明书

1份

保存条件:
   -20℃保存。
注意事项:
    本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人
或单位。
    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明

使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。
   抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. pIL-6-promoter-luc可以用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可以采用碧云天的萤火虫萤光素酶报
   告基因检测试剂盒(RG005/RG006)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG027/RG028)。
3. LPS等常见的可以激活IL-6 promoter的试剂,可以用作pIL-6-promoter-luc报告基因检测时的阳性对
   照。

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