GC-rich PCR Buffer(4种套装)

产品简介

产品简介：

产品编号	产品名称	产品包装	产品价格
D7226	GC-rich PCR Buffer(4种套装)	共2ml	116.00元

    GC-rich PCR Buffer(4管套装)提供了4种不同的GC-rich PCR Buffer，为扩增高GC含量的DNA片段提供了多种不同的选择，大大提高了高GC含量DNA片段的扩增成功率。
    各种GC-rich PCR Buffer可以单独使用，也可以组合使用。这样可以在更多条件下优化PCR条件。
    提供了推荐的几种经过优化的GC-rich PCR Buffer的组合方式，便于用户直接选用。
    根据相关文献报道，单一的GC-rich PCR Buffer对于某一个高GC含量的DNA片段的扩增效果很好，但对于另外一个高GC含量的DNA片段则很可能会扩增效果不太理想。正因为很难采用一种通用的GC-rich PCR Buffer完成对于不同的高GC含量DNA片段的扩增，因此对于高GC含量DNA片段的扩增一直是分子生物学操作过程中的一个难点。针对这一实际情况，碧云天推出了可以给予用户多种条件进行优化组合的4管套装GC-rich PCR Buffer。
    本GC-rich PCR Buffer(4种套装)可以适用于各种常见的耐热DNA 聚合酶例如Taq DNA polymerase、Pfu DNA polymerase等。
包装清单：

产品编号	产品名称	包装
D7226-1	5×GC-rich PCR Buffer A	0.5ml
D7226-2	5×GC-rich PCR Buffer B	0.5ml
D7226-3	5×GC-rich PCR Buffer C	0.5ml
D7226-4	5×GC-rich PCR Buffer D	0.5ml
－	说明书	1份

保存条件：
    -20℃保存。
注意事项：
    在使用本试剂盒提供的GC-rich PCR Buffer的同时，必须同时使用和DNA聚合酶配套的最终浓度为1×的含镁离子PCR Buffer。
    由于PCR反应非常灵敏可以扩增目的基因序列超过1000万倍，在操作时请注意避免微量待扩增DNA的污染，并尽量考虑设置不加模板的空白对照以确认是否有待扩增DNA的污染。
    为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明

使用说明：
1. PCR反应参数的设置也可以参考特定的耐热DNA聚合酶的说明进行。通常对于扩增高GC含量DNA片段的
情况，延伸时间可以比常规的延伸时间适当延长一些。
2. PCR反应体系的设置可以参考特定的耐热DNA聚合酶进行，仅仅添加适量本试剂盒所提供的GC-rich
PCR buffer即可。可以参考如下反应体系设置PCR反应：

试剂	最终浓度	体积	体积
双蒸水或MilliQ水	-	(26.75-x)μl	(10.7-y)μl
10×PCR Buffer(with Mg²⁺)	1×	5μl	2μl
5× GC-rich Buffer	1×	10μl	4μl
dNTP(2.5mM each)	0.2mM each	4μl	1.6μl
模板DNA	10pg-1μg*	xμl	yμl
引物混合物(10μM each)	0.8μM	4μl	1.6μl
Taq DNA Polymerase(5U/μl)	1.25U/50μl	0.25μl	0.1μl
总体积	-	50μl	20μl

3. 也可以尝试采用0.5×GC-rich Buffer:

试剂	最终浓度	体积	体积
双蒸水或MilliQ水	-	(31.75-x)μl	(12.7-y)μl
10×PCR Buffer (with Mg²⁺)	1×	5μl	2μl
5× GC-rich Buffer	0.5×	5μl	2μl
dNTP (2.5mM each)	0.2mM each	4μl	1.6μl
模板DNA	10pg-1μg*	xμl	yμl
引物混合物(10μM each)	0.8μM	4μl	1.6μl
Taq DNA Polymerase (5U/μl)	1.25U/50μl	0.25μl	0.1μl
总体积	-	50μl	20μl

4. 还可以尝试在PCR反应体系中同时含有2-4种不同的1× GC-rich Buffer或0.5× GC-rich Buffer。
   以形成不同的组合用于优化PCR反应条件。优先推荐的GC-rich Buffer 及其组合(最终浓度)包括：
   (A) 1×GC-rich Buffer A
   (B) 1×GC-rich Buffer B
   (C) 0.5×GC-rich Buffer B
   (D) 1×GC-rich Buffer C
   (E) 2×GC-rich Buffer C
   (F) 1×GC-rich Buffer C + 1×GC-rich Buffer D
   (G) 2×GC-rich Buffer C + 1×GC-rich Buffer D
   (H) 1×GC-rich Buffer C + 0.2×GC-rich Buffer B
   (I) 2×GC-rich Buffer C + 0.2×GC-rich Buffer B
5. 可以根据初步的PCR扩增效果，再对效果较好的GC-rich Buffer再进行优化组合，进一步优化GC-rich
   Buffer的组合。最后根据PCR反应的扩增效果，选择最佳的GC-rich PCR buffer或其组合。

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