产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
D2711-1μg | pCMV-N-mCherry (红色荧光蛋白) | 1μg | 888.00元 |
D2711-100μg | pCMV-N-mCherry (红色荧光蛋白) | 100μg | 1169.00元 |
pCMV-N-mCherry是碧云天自行研发的哺乳动物细胞表达质粒,用于表达N端含mCherry (DsRed的突变体,一种非常明亮的红色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子,可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的前面有一个mCherry的完整编码序列,因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达N端含有mCherry标签的融合蛋白。利用mCherry的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达水平和细胞内定位,也可以利用mCherry抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。mCherry与GFP没有序列同源性,不能使用GFP抗体检测mCherry。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可以使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
pCMV-N-mCherry质粒的主要信息如下:
Feature Nucleotide | Position |
CMV promoter | 1-602 |
T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
mCherry | 677-1384 |
Multiple cloning site | 1385-1474 |
T7 promoter and T7 primer binding site | 1494-1515 |
SV40 polyA signal | 1527-1910 |
f1 origin of ss-DNA replication | 2048-2354 |
bla promoter | 2379-2503 |
SV40 promoter | 2523-2861 |
Neomycin/kanamycin resistance ORF | 2896-3687 |
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 3688-4146 |
pUC origin | 4275-4942 |
pCMV-N-mCherry质粒(4994bp)的图谱如下:
pCMV-N-mCherry质粒的详细图谱见说明书:https://www.beyotime.com/Manual/D2711 pCMV-N-mCherry.pdf。
pCMV-N-mCherry中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-N-mCherry)包括:
AclI | AflII | AscI | AsiSI | BaeI | BcgI | BlpI |
BmgBI | BsiWI | BsmBI | BspEI | BspQI | BssHII | BstXI |
BstZ17I | EarI | EcoNI | FseI | NotI | NruI | PmeI |
PmlI | PpuMI | PshAI | PspXI | SacII | SapI | ScaI |
SmaI | SwaI | TspMI | XmaI | XmnI |
pCMV-N-mCherry中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-N-mCherry once)包括:
NdeI | CA`TA,TG | 240 | BglII | A`GATC,T | 1421 | |
SnaBI | TAC|GTA | 346 | PaeR7I | C`TCGA,G | 1427 | |
CspCI | ,NN`(N)11CAA(N)5GTGG(N)10,NN` | 382 | XhoI | C`TCGA,G | 1427 | |
NheI | G`CTAG,C | 597 | XbaI | T`CTAG,A | 1433 | |
BmtI | G,CTAG`C | 597 | SpeI | A`CTAG,T | 1439 | |
SacI | G,AGCT`C | 651 | PspOMI | G`GGCC,C | 1445 | |
Eco53kI | GAG|CTC | 653 | ApaI | G,GGCC`C | 1445 | |
AfeI | AGC|GCT | 660 | PvuI | CG,AT`CG | 1525 | |
AgeI | A`CCGG,T | 664 | BclI | T`GATC,A | 1681 | |
AhdI | GACNN,N`NNGTC | 871 | MfeI | C`AATT,G | 1774 | |
SbfI | CC,TGCA`GG | 1032 | HpaI | GTT|AAC | 1787 | |
BbsI | GAAGACNN`NNNN, | 1112 | BtsI | GCAGTG,NN` | 1861 | |
PflMI | CCAN,NNN`NTGG | 1113 | MluI | A`CGCG,T | 1910 | |
BbvCI | CC`TCA,GC | 1215 | DraIII | CAC,NNN`GTG | 2137 | |
Bpu10I | CC`TNA,GC | 1215 | SfiI | GGCCN,NNN`NGGCC | 2796 | |
BsgI | GTGCAG(N)14,NN` | 1269 | ClaI | AT`CG,AT | 2864 | |
SgrAI | CR`CCGG,YG | 1358 | BspDI | AT`CG,AT | 2864 | |
XcmI | CCANNNN,N`NNNNTGG | 1362 | EagI | C`GGCC,G | 2930 | |
BsrGI | T`GTAC,A | 1377 | Tth111I | GACN`N,NGTC | 3142 | |
BamHI | G`GATC,C | 1385 | PflFI | GACN`N,NGTC | 3142 | |
HindIII | A`AGCT,T | 1391 | BsrDI | GCAATG,NN` | 3257 | |
EcoRI | G`AATT,C | 1403 | RsrII | CG`GWC,CG | 3540 | |
EcoRV | GAT|ATC | 1411 | BstBI | TT`CG,AA | 3706 | |
SalI | G`TCGA,C | 1415 | BsaI | GGTCTCN`NNNN, | 4013 | |
AccI | GT`MK,AC | 1416 | PciI | A`CATG,T | 4942 |
pCMV-N-mCherry质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
N-mCherry primer (1284-1303): 5′-AGTTGGACATCACCTCCCAC-3′
T7 primer (1494-1515): 5′-GTAATACGACTCACTATAGGGC-3′
pCMV-N-mCherry的全序列信息:D2711 pCMV-N-mCherry-seq.txt
pCMV-N-mCherry质粒转染细胞后的表达效果请参考图1。
图1. pCMV-N-mCherry质粒转染细胞后的表达效果图。左侧为明场照片,右侧为荧光照片。
包装清单:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D2711-1μg | pCMV-N-mCherry (红色荧光蛋白) | 1μg |
D2711-100μg | pCMV-N-mCherry (红色荧光蛋白) | 100μg |
— | 说明书 | 1份 |
保存条件:
-20℃保存。
注意事项:
本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
1. 首次使用1μg包装的本产品时,请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. 100μg包装的本产品质粒浓度为0.1μg/μl,共1ml。可以直接用于酶切或者转染细胞。
3. pCMV-N-mCherry质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
相关产品:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D2602-1μg | pCMV-Blank | 1μg |
D2602-100μg | pCMV-Blank | 100μg |
D2621-1μg | pCMV-C-BFP (蓝色荧光蛋白) | 1μg |
D2621-100μg | pCMV-C-BFP (蓝色荧光蛋白) | 100μg |
D2623-1μg | pCMV-C-CFP (青色荧光蛋白) | 1μg |
D2623-100μg | pCMV-C-CFP (青色荧光蛋白) | 100μg |
D2624-1μg | pCMV-C-DsRed (红色荧光蛋白) | 1μg |
D2624-100μg | pCMV-C-DsRed (红色荧光蛋白) | 100μg |
D2626-1μg | pCMV-C-EGFP (绿色荧光蛋白) | 1μg |
D2626-100μg | pCMV-C-EGFP (绿色荧光蛋白) | 100μg |
D2628-1μg | pCMV-C-mCherry (红色荧光蛋白) | 1μg |
D2628-100μg | pCMV-C-mCherry (红色荧光蛋白) | 100μg |
D2630-1μg | pCMV-C-YFP (黄色荧光蛋白) | 1μg |
D2630-100μg | pCMV-C-YFP (黄色荧光蛋白) | 100μg |
D2632-1μg | pCMV-C-Flag | 1μg |
D2632-100μg | pCMV-C-Flag | 100μg |
D2639-1μg | pCMV-C-HA | 1μg |
D2639-100μg | pCMV-C-HA | 100μg |
D2650-1μg | pCMV-C-His | 1μg |
D2650-100μg | pCMV-C-His | 100μg |
D2672-1μg | pCMV-C-Myc | 1μg |
D2672-100μg | pCMV-C-Myc | 100μg |
D2701-1μg | pCMV-N-BFP (蓝色荧光蛋白) | 1μg |
D2701-100μg | pCMV-N-BFP (蓝色荧光蛋白) | 100μg |
D2703-1μg | pCMV-N-CFP (青色荧光蛋白) | 1μg |
D2703-100μg | pCMV-N-CFP (青色荧光蛋白) | 100μg |
D2705-1μg | pCMV-N-DsRed (红色荧光蛋白) | 1μg |
D2705-100μg | pCMV-N-DsRed (红色荧光蛋白) | 100μg |
D2707-1μg | pCMV-N-EGFP (绿色荧光蛋白) | 1μg |
D2707-100μg | pCMV-N-EGFP (绿色荧光蛋白) | 100μg |
D2711-1μg | pCMV-N-mCherry (红色荧光蛋白) | 1μg |
D2711-100μg | pCMV-N-mCherry (红色荧光蛋白) | 100μg |
D2716-1μg | pCMV-N-YFP (黄色荧光蛋白) | 1μg |
D2716-100μg | pCMV-N-YFP (黄色荧光蛋白) | 100μg |
D2722-1μg | pCMV-N-Flag | 1μg |
D2722-100μg | pCMV-N-Flag | 100μg |
D2733-1μg | pCMV-N-HA | 1μg |
D2733-100μg | pCMV-N-HA | 100μg |
D2737-1μg | pCMV-N-His | 1μg |
D2737-100μg | pCMV-N-His | 100μg |
D2756-1μg | pCMV-N-Myc | 1μg |
D2756-100μg | pCMV-N-Myc | 100μg |