碧云天产品助力科研，CNS文章使用产品大揭秘 (2020年第11期)

碧云天产品助力昼夜节律与IBD关联研究！
2020年10月14日，暨南大学吴宝剑团队在《Science Advances》发表了题为“An NF-κB–driven lncRNA orchestrates colitis and circadian clock”的研究成果。 溃疡性结肠炎和克罗恩病都属于炎症性肠病(IBDs)。IBDs是一种全球性疾病，具有极高的发病率，由于反复发作，会严重影响患者的生活和工作。然而对于IBDs的发病机制目前并没有明确的研究结果。 本研究在小鼠结肠中发现了一种结肠炎相关的节律性LncRNA，并命名为Lnc-UC，其在结肠炎小鼠的结肠中表达显著上调，同时具有明显的节律性。Lnc-UC能够抑制促炎因子的表达和NF-κB信号通路的激活， 敲除Lnc-UC会增加小鼠患结肠炎的几率。同时，野生型小鼠结肠炎的严重程度具有明显的节律性，而Lnc-UC敲除的小鼠中这种节律性则会消失。进一步机制研究发现，Lnc-UC能够与Cbx1相互作用， 以降低Rev-erbα启动子处的H3K9me3并诱导Rev-erbα转录和表达。因此，该研究表明Lnc-UC可以作为Rev-erbα的调节剂，将生物节律与结肠炎联系起来，为控制结肠炎症状提出了新策略。

在该研究中使用了多种碧云天高品质产品，包括Recombinant Murine TNF-α/TNFSF2、pNF-κB-luc (报告基因质粒)、BAY 11-7082 (NF-κB抑制剂)、快速银染试剂盒、细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒等。

碧云天产品助力线粒体自噬调控新机制研究！
2020年10月27日，《Molecular Cell》发表了以福州大学生命科学研究所杨宇丰课题组为主的多家合作研究单位的最新研究成果“Paradoxical Mitophagy Regulation by PINK1 and TUFm”。 线粒体自噬是一种细胞器选择性自噬过程，线粒体自噬失调与多种疾病有关，但关于线粒体自噬调控机制目前尚不十分清楚。研究人员通过多种研究方法揭示了一种由PINK1及其激酶底物TUFm所 介导的线粒体自噬调控新途径。研究人员通过免疫共沉淀-质谱鉴定了TUFm为PINK1的互作蛋白，进一步确认了它们之间存在内外源物理相互作用和遗传学互作，并且二者的相互作用并不依赖于Parkin或 其它线粒体蛋白翻译因子。同时，研究人员发现，PINK1能够发挥激酶活性，使得TUFm的Ser222发生磷酸化，从而导致TUFm促线粒体自噬的功能转变为抑制功能。P-S222-TUFm主要存在于在细胞质中， 竞争结合更多的Atg5单体，从而阻碍Atg5-Atg12复合体的形成来抑制线粒体自噬。本研究揭示了一种新的进化保守的线粒体自噬调控机制，为线粒体自噬和线粒体自噬相关疾病的研究提供了新的思路。

在该研究中使用了多种碧云天高品质产品，包括Hoechst 33342染色液、GFP抗体(小鼠单抗)、Protein A+G Agarose (Fast Flow, 1ml)预装柱等。

碧云天产品助力核酸免疫识别与线粒体功能关联研究！
2020年11月9日，浙江大学徐平龙研究团队在《Molecular Cell》发表了题为“TBK1-mediated DRP1 Targeting Confers Nucleic Acid Sensing to Reprogram Mitochondrial Dynamics and Physiology”的研究成果。 该研究揭示了核酸天然免疫识别（innate nucleic acid sensing）通过MAVS-TBK1-DRP1信号轴调控线粒体形态和生理功能的重要发现。核酸天然免疫识别是一种进化上高度保守的细胞生物学和免疫学机制，存在于几乎所有类型的细胞 中。研究发现，在RNA免疫识别活化过程中，线粒体呈现显著融合的形态。这一现象涉及TBK1和DRP1的参与，定位于线粒体外膜的RNA识别关键分子MAVS激活后，招募DRP1至MAVS信号复合体，随后被复合体中的TBK1磷酸化修饰。 其中TBK1对DRP1蛋白S412和S684位点的磷酸化能够有效阻止DRP1形成高次序聚合的环状结构，因而抑制正常DRP1分裂线粒体的功能。而因DRP1失活形成的高度融合的线粒体是MAVS形成高次序聚集以及RNA免疫识别信号正常激活的必要 条件，阻止MAVS-TBK1-DRP1信号轴，能够强烈抑制抗病毒免疫应答，TBK1-DRP1信号也在细胞营养应激诱导的线粒体动力学调控和细胞命运决定中起关键功能。本研究首次揭示了核酸免疫识别对线粒体形态与功能的控制， 也揭示了线粒体动力学以及DRP1蛋白活性的全新调控机制，为抗病毒研究和自身免疫疾病的防治提供了新的理论基础。

该研究中使用了多种碧云天高品质产品，包括非变性非还原性蛋白上样缓冲液(5X)和一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒。

碧云天产品助力猪高通量功能基因筛选平台研究！
2020年10月14日， 华中农业大学动物遗传育种团队在《Nature Communications》杂志在线发表了题为“CRISPR screening of porcine sgRNA library identifies host factors associated with Japanese encephalitis virus replication”的研究成果。 日本脑炎病毒(JEV)是一种通过蚊虫传播的人畜共患病毒，能够引起哺乳动物脑炎以及繁殖障碍。然而具体是何种宿主基因参与该病毒入侵、复制和组装过程目前尚不明晰。本研究中，研究人员首次构建了基于猪全基因组CRISPR/Cas9敲除文库技术的高通量功能基因筛选平台， 包括几乎全部蛋白编码基因，长链非编码RNA和微小RNA，利用该平台筛选和鉴定出了参与JEV复制的必需宿主基因，并对包括EMC3和CALR在内的6个基因进行了功能分析。同时，研究人员还发现了4种与HSPGs代谢相关的基因，它们都与HSPGs磺化过程有关，能够促进JEV进入猪宿主细胞。 本研究对于猪饲养和繁殖过程中JEV相关疾病的治疗和预防具有重要意义。同时，该文库的构建对于功能基因组研究和品种改良也具有重要的产业价值，为基因功能鉴定和育种提供了新思路。

该研究中使用了多种碧云天高品质试剂盒，包括DAPI染色液、GAPDH Mouse Monoclonal Antibody、辣根过氧化物酶标记山羊抗小鼠IgG(H+L)、BeyoClick™ EdU-555细胞增殖检测试剂盒等。

碧云天产品助力促进水稻氮利用和提高产量机制研究！
2020年10月15日， 中科院遗传与发育生物学研究所、植物基因组学国家重点实验室周奕华研究组与中国水稻所钱前院士团队及扬州大学刘巧泉教授团队在《Nature Communications》在线发 表题为“MYB61 is regulated by GRF4 and promotes nitrogen utilization and biomass production in rice”的合作研究结果。N元素是一种促进C代谢和提高农作物产量的主要营养元素。 氮元素利用率和产量之间的分子关联目前尚不明晰。本研究中，研究人员通过遗传学及分子生物学实验发现MYB61基因的启动子区域在籼稻日本晴中存在一个helitron转座子插入， 此自然突变造成了粳稻日本晴和籼稻9311在纤维素合成水平及氮利用率间的差异。MYB61转录可被低氮诱导，并受到氮代谢关键控制因子GRF4的调控。GRF4可以直接结合在MYB61基因的启动子区，增强MYB61的表达， 而helitron转座子的插入则会下调其表达。GRF4-MYB61调控模块整合了控制纤维素合成水平和氮利用效率的作用通路。MYB61存在籼粳分化，启动子区的helitron转座子插入仅在粳稻中被检测到。田间测试证实， 籼稻形式的MYB61可提高纤维素合成水平及氮利用效率，将9311形式的MYB61导入多个粳稻品种均表现出增产效应，且在低氮情况下增产效果尤为明显。该项研究揭示了碳-氮代谢的直接分子联系、鉴定了整合碳-氮代谢的关键节点， 为提高水稻等农作物的氮利用效率及实现农业生产减施增效提供了分子工具和新途径。

在该研究中使用了多种碧云天高品质产品，包括EMSA/Gel-Shift 结合缓冲液(5X)、EMSA探针生物素标记试剂盒。

更多文献信息请见下表：

Product Name	Citations	Institute	Doi.
细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒（P0027）	Wang et al., Sci. Adv. 2020; 6 : eabb5202	暨南大学	doi: 10.1126/sciadv.abb5202
快速银染试剂盒（P0017S）
BAY 11-7082 (NF-κB抑制剂)（S1523-2mg）
pNFκB-luc (报告基因质粒)（P6020-5μg）
一氧化氮检测试剂盒(S0021S)	Lv et al., Sci. Adv. 2020; 6 : eabb7788	浙江大学	doi: 10.1126/sciadv.abb7788
RIPA裂解液(强中弱套装)(P0013E)
GSH和GSSG检测试剂盒(S0053)
MK2206 (Akt抑制剂)(SF2712)	Cui et al., Sci. Adv. 2020; 6 : eaaz7290	延边大学	doi: 10.1126/sciadv.aaz7290
RIPA裂解液(强)(P0013B)
QuickMutation™ Plus基因定点突变试剂盒(D0208S)	Cui et al., Sci. Adv. 2020; 6 : eabb8543	上海科技大学	doi: 10.1126/sciadv.abb8543
GSH和GSSG检测试剂盒(S0053)	Yang et al., Sci. Adv. 2020; 6 : eabc1725	沈阳药科大学	doi: 10.1126/sciadv.abc1725
活性氧检测试剂盒(S0033S)	Chen et al., Sci. Adv. 2020; 6 : eaba0942	中南大学湘雅医院	doi: 10.1126/sciadv.aba0942
RIPA裂解液(强)(P0013B)	Li et al., Sci. Adv. 2020; 6 : eaba0682	中科院昆明动物研究所	doi: 10.1126/sciadv.aba0682
RIPA裂解液(强)(P0013B)	Lv et al., 2021, Cell Metabolism 33, 1–18	东方肝胆外科医院	doi.org/10.1016/j.cmet.2020.10.021
非变性非还原性蛋白上样缓冲液(5X)(P0016N)	Chen et al., 2020, Molecular Cell 80, 1–18	浙江大学	doi.org/10.1016/j.molcel.2020.10.018
一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(绿色荧光)(C1086)
Hoechst 33342染色液(C1025)	Lin et al., 2020, Molecular Cell 80, 1–14	福州大学	doi.org/10.1016/j.molcel.2020.10.007
GFP抗体(小鼠单抗)(AG281)
Protein A+G Agarose (Fast Flow, 1ml)预装柱(P2028)
DAPI染色液(C1005)	Nat Commun 11, 5178 (2020)	华中农业大学	doi.org/10.1038/s41467-020-18936-1
GAPDH Mouse Monoclonal Antibody(AF5009)
辣根过氧化物酶标记山羊抗小鼠IgG(H+L)(A0216)
BeyoClick™ EdU-555细胞增殖检测试剂盒(C0075S)
碱性磷酸酶检测试剂盒(P0321S)	Nat Commun 11, 5596 (2020).	华西口腔医院	doi.org/10.1038/s41467-020-19360-1
β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒(RG0039)
Alexa Fluor 555标记驴抗兔IgG(H+L)(A0453)
EMSA/Gel-Shift 结合缓冲液(5X)(GS005)	Nat Commun 11, 5219 (2020).	中科院遗传与发育生物学研究所	doi.org/10.1038/s41467-020-19019-x
EMSA探针生物素标记试剂盒(GS008)
Cell Counting Kit-8 (CCK-8试剂盒)(C0038)	Nat Commun 11, 5486 (2020)	深圳大学医学部第一附属医院	doi.org/10.1038/s41467-020-19314-7
BCA蛋白浓度测定试剂盒(P0012S)	Nat Commun 11, 5405 (2020).	中山大学	doi.org/10.1038/s41467-020-19259-x