碧云天Lipo293™ Plus转染试剂转染EGFP表达质粒至HEK293 (A, B)、HEK293T (C, D)和HEK293E (E, F) 48小时后的细胞效果图:
Lipo293F™ Plus转染试剂与同类转染试剂(Competitor)转染表达EGFP的质粒至Expi293F™细胞,转染48小时后的细胞效果图:
细胞转染主要面临两个问题:一是转染试剂毒性高,细胞存活率低;二是转染效率低。但是常规转染试剂很难兼顾二者,转染效率高的转染试剂细胞毒性大,细胞毒性低的转染试剂转染效率不高。碧云天全新推出Lipo293™ Plus转染试剂(C0522)、Lipo293F™ Plus转染试剂(C0519)和BeyoPEI™转染试剂(C0541),该系列产品细胞毒性极低、转染效率高、无动物源性成分,兼容血清和抗生素,支持贴壁细胞的转染和悬浮细胞转染。
选购指南
Lipo293™ Plus转染试剂适用于把质粒、RNA和寡核苷酸高效瞬时转染到贴壁培养的HEK293细胞系列中,也能用于其它贴壁细胞的转染。但转染其它细胞时,更加推荐使用碧云天生产的Lipo6000™转染试剂(C0526)、Lipo8000™转染试剂(C0533)和BeyoPEI™转染试剂(C0541);
Lipo293F™ Plus转染试剂专门适用于悬浮培养的HEK293细胞,也同样适用于293系列贴壁细胞的转染。但转染293系列贴壁细胞时,推荐使用性价比更高的Lipo293™ Plus转染试剂(C0522)或Lipo293™转染试剂(C0521);
BeyoPEI™转染试剂适用于把质粒、RNA和寡核苷酸高效瞬时转染到贴壁或悬浮细胞中,适用于多种细胞系包括HEK293、HEK293T、HEK293F、HEK293Expi、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3、Sf9、HepG2和HeLa细胞等。
产品特点:
● 与国外同类产品效果一致:Lipo293F™ Plus与Thermo公司的293fectin™ Transfection Reagent和FreeStyle™ MAX Reagent、Merck公司的293-Free™ Transfection Reagent的用途和使用效果基本一致;BeyoPEI™转染试剂与Polysciences公司的PEI MAX®-Transfection Grade Linear Polyethylenimine Hydrochloride (MW 40,000)、Transporter 5® Transfection Reagent和Polyplus公司的jetPEI®、PEIpro®基本一致;
● 转染效率高:转染细胞目的蛋白表达质粒后,一般在24小时后可进行蛋白表达水平检测,48-72小时后可达到比较理想的蛋白表达水平。其中,Lipo293™ Plus和Lipo293F™ Plus的转染效率可达90%;
● 兼容性好,操作简单:可以在血清和抗生素存在的情况下进行细胞转染,转染后无需更换培养液,操作更简便;
● 不含动物源成分:该系列转染试剂均为化学合成,因此不含任何动物源成分。
产品效果:
图1. Lipo293™ Plus转染试剂转染的效果图。Lipo293™ Plus转染试剂转染EGFP表达质粒至HEK293 (A, B)、HEK293T (C, D)和HEK293E (E, F) 48小时后的细胞效果图。
图2.Lipo293F™ Plus转染试剂与同类转染试剂(Competitor)转染表达EGFP的质粒至Expi293F™细胞,转染48小时后的细胞效果图。
推荐转染用量
细胞转染时,转染试剂与DNA的使用量可参考下表,用户可适当优化摸索最佳转染条件。
表1. Lipo293™ Plus转染试剂用于贴壁细胞培养时,DNA与Lipo293™ Plus转染试剂用量。
96-well | 48-well | 24-well | 12-well | 6-well | 6cm dish | 10cm dish | |
Lipo293™ Plus转染试剂 | 0.2μl | 0.5μl | 1μl | 2μl | 5μl | 10μl | 30μl |
无血清培养液或Opti-MEM® Medium | 5μl | 12.5μl | 25μl | 50μl | 125μl | 250μl | 750μl |
DNA | 100ng | 250ng | 500ng | 1μg | 2.5μg | 5μg | 15μg |
无血清培养液或Opti-MEM® Medium | 5μl | 12.5μl | 25μl | 50μl | 125μl | 250μl | 750μl |
单独稀释好的Lipo293™ Plus转染试剂和DNA,混匀并室温静止放置15分钟 | |||||||
每孔加入的混合物的量 | 10μl | 25μl | 50μl | 100μl | 250μl | 500μl | 1500μl |
按照上述用量每孔均匀滴加Lipo293™ Plus细胞转染试剂和DNA的混合物,继续培养48-72小时 |
表2. Lipo293F™ Plus转染试剂用于悬浮细胞培养时,DNA与Lipo293F™ Plus转染试剂用量。
转染体系体积 | 10ml | 20ml | 50ml | 100ml | 200ml | 500ml |
细胞培养液 | 0.5ml | 1ml | 2.5ml | 5ml | 10ml | 25ml |
DNA | 10μg | 20μg | 50μg | 100μg | 200μg | 500μg |
细胞培养液 | 0.5ml | 1ml | 2.5ml | 5ml | 10ml | 25ml |
Lipo293F™ Plus转染试剂 | 20μl | 40μl | 100μl | 200μl | 400μl | 1ml |
将配制好的Lipo293F™ Plus转染试剂稀释液加入到配制好的DNA稀释液中,室温孵10-20分钟 随后加入到培养的悬浮细胞中继续培养24-96小时,后续进行目的蛋白的检测和纯化。 |
表3. BeyoPEI™转染试剂用于贴壁细胞培养时,DNA与BeyoPEI™转染试剂用量。
96-well | 48-well | 24-well | 12-well | 6-well | 6cm dish | 10cm dish | |
细胞培养液 | 5μl | 10μl | 25μl | 25μl | 50μl | 100μl | 250μl |
DNA | 100ng | 200ng | 500ng | 1μg | 2μg | 4μg | 8μg |
细胞培养液(需减去转染试剂体积) | 5μl | 10μl | 25μl | 25μl | 50μl | 100μl | 250μl |
BeyoPEI™转染试剂 | 0.1-0.5μl | 0.2-1μl | 0.5-2.5μl | 1-5μl | 2-10μl | 4-20μl | 8-40μl |
将配制好的BeyoPEI™转染试剂稀释液加入到配制好的DNA稀释液中,室温孵育10-20分钟 | |||||||
每孔加入的复合物的量 | 10μl | 20μl | 50μl | 50μl | 100μl | 200μl | 500μl |
按照上述用量每孔均匀滴加DNA与BeyoPEI™复合物,继续培养。 |
表4. BeyoPEI™转染试剂用于悬浮细胞培养时,DNA与BeyoPEI™转染试剂用量。
转染体系体积 | 10ml | 20ml | 50ml | 100ml | 200ml | 500ml |
细胞培养液 | 0.5ml | 1ml | 2.5ml | 5ml | 10ml | 25ml |
DNA | 10μg | 20μg | 50μg | 100μg | 200μg | 500μg |
细胞培养液 | 0.5ml | 1ml | 2.5ml | 5ml | 10ml | 25ml |
BeyoPEI™转染试剂 | 20μl | 40μl | 100μl | 200μl | 400μl | 1ml |
将配制好的BeyoPEI™转染试剂稀释液加入到配制好的DNA稀释液中,室温孵育10-20分钟 随后加入到培养的悬浮细胞中继续培养24-96小时,后续进行目的蛋白的检测和纯化。 |
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293悬浮细胞的转染 | 贴壁细胞的转染 |
产品信息:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
C0522-0.5ml | Lipo293™ Plus转染试剂 | 0.5ml |
C0522-1.5ml | Lipo293™ Plus转染试剂 | 1.5ml |
C0522-7.5ml | Lipo293™ Plus转染试剂 | 5×1.5ml |
C0519-1ml | Lipo293F™ Plus转染试剂t | 1ml |
C0519-10ml | Lipo293F™ Plus转染试剂t | 10ml |
C0519-100ml | Lipo293F™ Plus转染试剂t | 100ml |
C0541-1ml | BeyoPEI™转染试剂 | 1ml |
C0541-10ml | BeyoPEI™转染试剂 | 10ml |
C0541-100ml | BeyoPEI™转染试剂 | 100ml |
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C0518-1ml | Lipo293F™转染试剂 | 1ml | |
C0518-10ml | Lipo293F™转染试剂 | 10ml | |
C0518-100ml | Lipo293F™转染试剂 | 100ml | |
C0519-1ml | Lipo293F™ Plus转染试剂 | 1ml | |
C0519-10ml | Lipo293F™ Plus转染试剂 | 10ml | |
C0519-100ml | Lipo293F™ Plus转染试剂 | 100ml | |
C0521-0.5ml | Lipo293™转染试剂 | 0.5ml | |
C0521-1.5ml | Lipo293™转染试剂 | 1.5ml | |
C0521-7.5ml | Lipo293™转染试剂 | 5×1.5ml | |
C0526FT | Lipo6000™转染试剂(试用装) | 0.1ml | |
C0526-0.5ml | Lipo6000™转染试剂 | 0.5ml | |
C0526-1.5ml | Lipo6000™转染试剂 | 1.5ml | |
C0526-7.5ml | Lipo6000™转染试剂 | 5×1.5ml | |
C0533-0.5ml | Lipo8000™转染试剂 | 0.5ml | |
C0533-1.5ml | Lipo8000™转染试剂 | 1.5ml | |
C0533-7.5ml | Lipo8000™转染试剂 | 5×1.5ml | |
C0533FT | Lipo8000™转染试剂(试用装) | 0.1ml | |
C0535-0.5ml | LipoRNAi™转染试剂 | 0.5ml | |
C0535-1.5ml | LipoRNAi™转染试剂 | 1.5ml | |
C0535-7.5ml | LipoRNAi™转染试剂 | 5×1.5ml | |
C0541-1ml | BeyoPEI™转染试剂 | 1ml | |
C0541-10ml | BeyoPEI™转染试剂 | 10ml | |
C0541-100ml | BeyoPEI™转染试剂 | 100ml | |
C0551FT | LipoInsect™转染试剂(试用装) | 0.1ml | |
C0551-0.5ml | LipoInsect™转染试剂 | 0.5ml | |
C0551-1.5ml | LipoInsect™转染试剂 | 1.5ml | |
C0551-7.5ml | LipoInsect™转染试剂 | 5×1.5ml | |
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