碧云天的Gel-Red Plus (增强版凝胶红)是一种Gel-Red、EB (Ethidium bromide, 溴化乙锭)的升级换代产品，用于凝胶中DNA、RNA等核酸的染色。Gel-Red Plus和Gel-Red (D0139/D0140)、NA-Red (D0128/D0130)、NA-Red Plus (D0131)一样具有安全(致突变性极低且检测不到显著的细胞毒性)、灵敏度高、稳定性好等优点，凝胶中的核酸在使用本产品染色后用适当紫外灯(300nm左右波长)检测呈现红色荧光，适用于原先使用EB为染料的凝胶成像系统。Gel-Red Plus相对于Gel-Red、NA-Red使用方法完全一致，但可获得更好的条带分离效果。

Gel-Red Plus可大大降低条带的拖尾和弯曲，条带更清晰、更均匀、背景更低。Gel-Red和NA-Red可能存在一定程度的条带拖尾、弯曲、背景高等现象，Gel-Red Plus基本解决了这些问题，而且分子量大的条带也可得到较为完美的分离效果。Gel-Red Plus的琼脂糖凝胶电泳图参考图1。

图1.碧云天Gel-Red Plus (EB升级换代产品, 10000X) (D0141)用于DNA marker琼脂糖凝胶电泳的效果图。泳道1-3分别为DNA Ladder (0.1-10 kb, 21 bands) (D0107)上样5μl、3μl、1μl的电泳检测效果；泳道4-6分别为DNA Ladder (0.2-12 kb, 12 bands) (D0110)上样5μl、3μl、1μl的电泳检测效果。实际检测效果会因核酸样品种类和大小、电泳槽、核酸染料、电泳条件等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。

Gel-Red Plus比EB和SYBR Green更安全。Gel-Red Plus在远高于其工作浓度范围时均没有细胞毒性及诱变性。艾姆斯氏试验(Ames test)结果表明，Gel-Red Plus的诱变性远小于EB。EB在多种致突变测试中呈现很强的诱变性，而Gel-Red Plus仅仅在浓度高达20微克/毫升时，并在S9代谢活化时有非常微弱的诱变性。Gel-Red Plus和碧云天另外几种安全型核酸染料Gel-Red、NA-Red、NA-Red Plus、NA-Green、NA-Green Plus、BeyoAIE™ NA-Green，由于它们特殊的化学结构使其难以进入细胞，从而大大降低甚至避免了染料的致突变性和细胞毒性。而SYBR Green染料可以穿透细胞膜，进入活细胞并染色DNA，并且有报道SYBR Green可以强烈增强紫外线诱导的基因突变。本产品用于活细胞染色的效果图参考图2。

图2.碧云天Gel-Red Plus (EB升级换代产品, 10000X) (D0141)对HeLa活细胞染色效果图。图A为HeLa细胞在明场下的形态图；图B为Gel-Red Plus染色效果图。可见，Gel-Red Plus几乎无法进入活细胞，细胞毒性极低。实测数据会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。

Gel-Red Plus检测灵敏度高，对于小分子量核酸的染色效果好。Gel-Red Plus的检测灵敏度比EB高8-10倍，在检测低浓度、微量DNA或RNA方面比EB更佳，尤其对小分子量的DNA检测非常灵敏。在使用浸泡染色法时，Gel-Red Plus和SYBR Gold的灵敏度相近甚至更高；与SYBR Gold不同的是，Gel-Red Plus预先配制在凝胶中也有很高的灵敏度。EB对于小分子量核酸的染色效果差，而Gel-Red Plus对于小分子量核酸的染色效果很好，便于观察酶切或PCR获得的小分子量核酸片段。推荐使用的Gel-Red Plus浓度，其检测效果略优于EB。

Gel-Red Plus的稳定性好，染色重复性高。含SYBR Green的凝胶核酸染色的重复性比较差，通常是由于SYBR系列染料的稳定性差导致的。而Gel-Red的稳定性很好，可以室温长时间保存及使用微波炉加热。Gel-Red Plus的光稳定性良好，可以在室内正常光线下操作而无需避光。由于其热稳定性和光稳定性，含Gel-Red Plus的凝胶在核酸染色时的重复性非常好。

Gel-Red Plus可以使用和EB相同的检测体系。Gel-Red Plus和EB的激发光和发射光都非常接近，可以直接用Gel-Red Plus替换EB，而不必更换已有的凝胶观察、拍照或成像系统(约300nm激发)。Gel-Red Plus的激发光谱和发射光谱请参考图3。

图3.Gel-Red Plus的激发光谱和发射光谱

Gel-Red Plus的使用方法和EB一致。Gel-Red Plus可以按适当比例直接加入琼脂糖中配制成凝胶，也可以在电泳完毕后对凝胶进行染色。前者更加方便，而后者灵敏度要更高一些。但由于Gel-Red Plus本身已经非常灵敏，通常采用把Gel-Red Plus直接配制在凝胶中就可以了。对于一些特殊情况，如核酸样品量特别少的情况等，则可以考虑电泳后再对凝胶进行染色。

Gel-Red Plus对条带迁移几乎没有影响。使用Gel-Red Plus时，样品的上样量不影响条带美观，即使上样量很高，也可获得良好的条带分离效果。

通过凝胶回收试剂盒(如碧云天或类似的凝胶回收试剂盒)或酚氯仿抽提，可以有效去除与DNA或RNA结合的Gel-Red Plus，从而确保不会影响后续的连接、酶切、PCR、测序等常规的分子生物学用途。

室温保存，两年有效。须避免太阳光或紫外线的直射。

为确保使用的不是假冒的Gel-Red Plus，可以用细胞培养液把Gel-Red Plus稀释至1X，然后对培养的活细胞进行染色。随后在荧光显微镜下尝试用各种激发光观察，如果发现活细胞细胞核出现明显的荧光，则可以判定为假冒产品。如果各种激发光下活细胞均无荧光，则说明该核酸染料是不能进入活细胞的高度安全的染料。具有强致突变性的吖啶橙(Acridine Orange)染色核酸后呈现荧光，但其可以染色活细胞，而Gel-Red Plus不会染色活细胞。

制备好的Gel-Red Plus琼脂糖凝胶，在4ºC避光条件下通常可以保存3-5天。

Gel-Red Plus琼脂糖凝胶再次熔化使用时，为取得更好的观察效果，需要添加适量Gel-Red Plus。

电泳之后的凝胶不建议重复使用。

电泳后再使用Gel-Red Plus染色的凝胶一般不需要脱色。如果发现背景太高，可以使用不含核酸酶的水进行脱色处理。

Gel-Red和Gel-Green系列产品除了可以染色双链DNA外，也可染色单链DNA和RNA。Gel-Red Plus对单链核酸的染色灵敏度约为对双链DNA染色灵敏度的一半。Gel-Red Plus对单链核酸的染色灵敏度约为Gel-Green Plus的5倍。

如果使用聚丙烯酰胺凝胶，请使用浸泡染色法染胶，并延长染色时间至30分钟-1小时。

如果观察到条带弥散或者分离不理想，建议使用浸泡染色法染色以确认是否与染料有关。如果浸泡染色法染色后仍然出现类似的问题，说明与染料无关，请尝试以下方法：使用新鲜配制的电泳缓冲液、降低核酸的上样量、降低染料的浓度、降低琼脂糖浓度、选用更长的凝胶、降低电泳电压一倍以上并延长凝胶电泳时间以改善电泳效果、使用更薄的梳齿等。

本产品兼容常用的电泳缓冲液，例如TAE和TBE。

Gel-Red类产品不属于有毒有害物质，并通过了环境安全相关测试，相关废弃物无需特殊处理，可参考常规化学试剂进行处理。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。