中文 | English
订货电话
400-1683301
800-8283301
电话订货时间:
工作日9:00-17:00
订货邮件
order@beyotime.com
订货QQ
4001683301
微信在线咨询
订单下载
碧云天订单.xls
核酸相关> DNA操作> 内切酶与外切酶
产品编号: D6402L
产品包装:10kU
选择包装
价格: ¥ 1998.00
产品简介
使用说明
产品文件
相关产品
相关论文
产品问答
产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
D6402S HpaI 500U 158.00元
D6402M HpaI 2kU 508.00元
D6402L HpaI 10kU 1998.00元

碧云天自主研发生产的HpaI,是从大肠杆菌表达纯化获得的一种限制性内切酶[1],是KspAI的同裂酶(Isoschizomers),其基本信息如下:

识别序列 缓冲液兼容性(%) 酶切温度 失活条件 甲基化干扰?
GTT^AAC 1X B 1X G 1X O 1X R 1X Y 2X Y 37ºC 80ºC 20min 有时有干扰
CAA^TTG 0-20 50-100 20-50 50-100 100 50-100

碧云天生产的HpaI酶切DNA双链的效果请参考图1。

图1. 碧云天生产的HpaI (D6402)和国外同类产品(Competitor)的酶活性检测效果对比图。使用本产品或国外N公司的HpaI,在20µl反应体系中加入图中指定量的本产品或国外N公司的HpaI,在1X Buffer Y中酶切含一个HpaI位点的300bp的DNA片段,37ºC孵育1小时进行酶切反应,酶切产物为两个长度相等的150bp片段,随后80ºC孵育20分钟使酶失活,然后电泳并进行核酸染色和荧光成像分析。如图所示,本产品与N公司的产品相比,具有类似的酶切效果。M, DNA marker (DNA Ladder (0.2-12 kb, 12 bands) (D0110))。实际检测效果会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。

酶储存液组成为:10mM Tris-HCl (pH7.4 at 25ºC), 50mM KCl, 1mM DTT, 0.1mM EDTA, 200µg/ml BSA, 50% Glycerol.

1X Buffer Y组成为:33mM Tris-acetate (pH7.9 at 37ºC), 10mM Magnesium acetate, 66mM Potassium acetate, 0.1mg/ml BSA.

酶切和连接效率:50倍过量的本内切酶消化1小时,>95%被酶切的片段可以被连接并被重新酶切(Recut)。

活性单位定义:One unit is defined as the amount of HpaI required to digest 1µg of λDNA in 1 hour at 37ºC in a total reaction volume of 50µl.

包装清单:
产品编号 产品名称 包装
D6402S-1 HpaI (20U/µl) 25µl
D6010Y-100µl 10X Buffer Y 100µl
说明书 1份

产品编号 产品名称 包装
D6402M-1 HpaI (20U/µl) 100µl
D6010Y-400µl 10X Buffer Y 400µl
说明书 1份

产品编号 产品名称 包装
D6402L-1 HpaI (20U/µl) 500µl
D6010Y-2ml 10X Buffer Y 2ml
说明书 1份
保存条件:

-20ºC保存,至少两年有效。

注意事项:

内切酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20ºC保存。

超纯水推荐选购BeyoPure™ Ultrapure Water (DNase/RNase-Free, Sterile) (ST876)。

如果发现预期的酶切位点不能切开,请确认是否存在甲基化干扰问题。

特别注意:甘油含量大于5%,低盐浓度,pH>8.0或酶超量(约20倍以上)可能会导致星号活性,即产生非特异性酶切。

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1. 单酶切时可以参考如下反应体系进行:
Reagent Volume
DNA Substrate xµl (≤1µg)
Ultrapure Water (18-x-y)µl
10X Buffer Y 2µl
HpaI yµl (0.5-1µl)
Total volume 20µl
Incubate at 37ºC for 1h, 2-6h or overnight
注:请把Buffer和水等充分混匀后再加入内切酶,加入内切酶后可以用枪吹打或轻轻Vortex混匀。通常参考上述条件孵育1小时已经足够,但多孵育数小时甚至孵育过夜也不会产生负面影响。如果酶切较长时间甚至酶切过夜,可以使用更少量的酶。待酶切DNA量较大时,可以适当延长酶切时间或按比例放大酶切体系。
2. 双酶切或多酶切时,需选择适当的可以兼容两个或多个内切酶的缓冲液,然后参考上表设置反应体系。如果没有合适的缓冲液可以选择,可以在一种酶消化完毕后进行纯化,纯化完毕后再进行另外一种酶切反应。
参考文献:
1. Ito H, Shimato H, Sadaoka A, et al. Nucleic Acids Res. 1992, 20(4):705-709.
相关产品:
产品编号 产品名称 包装
D6049 ApaI 2000U
D6050 AscI 400U/2kU/10kU/50kU
D6052 AvrII 200U/1kU/5kU
D6053 BamHI 2000U
D6055 BamHI 10/40/200/800kU
D6093 BglII 500U
D6095 BglII 2/10/40/200kU
D6128 BsaI 1/5/20/200kU
D6132 BspQI 400U/2kU/10kU/40kU
D6133 Nt.BspQI 500U/2kU/10kU
D6176 Cfr9I 2/10/40kU
D6257 DpnI 500U/2.5KU/10KU/50KU
D6266 DpnII 500U/2kU/10kU
D6272 DraI 4/20/100kU
D6292 EarI 400U/2kU/10kU/40kU
D6329 EcoRI 2000U
D6330 EcoRI 5000U
D6333 EcoRI 10/40/200/800kU
D6337 EcoRV 1500U
D6339 EcoRV 4/20/100/400kU
D6352 FseI 50U/200U/1kU
D6365 HaeIII 2/10/40kU
D6369 HhaI 1/5/20/100kU
D6389 HindIII 2000U
D6390 HindIII 5000U
D6392 HindIII 10/40/200/1000kU
D6402 HpaI 500U/2kU/10kU
D6403 HpaII 1/5/20kU
D6417 KpnI 1000U
D6418 KpnI 4/20kU
D6436 MboI 200U/1kU/5kU
D6449 MluI 1000U
D6468 MseI 400U/2kU/10kU/40kU
D6470 MspI 4/20/100/500kU
D6472 MspJI 200U/1kU/5kU
D6481 NcoI 200U
D6482 NcoI 800U/4kU/20kU/100kU
D6485 NdeI 400U
D6486 NdeI 4/20/100kU
D6489 NheI 200U
D6490 NheI 800U/4kU/20kU/100kU
D6497 NotI 150U
D6498 NotI 1/4/20/100kU
D6538 PleI 500U/2Ku/10kU
D6542 PmeI 800U/4kU/20kU/100kU
D6565 PstI 1000U
D6566 PstI 3000U
D6568 PstI 4/20/100kU
D6581 PvuII 1000U
D6585 RsaI 200U
D6590 SapI 400U/2kU/10kU/40kU
D6593 SacI 500U
D6597 SalI 1000U
D6598 SalI 2/10/40/200kU
D6607 ScaI 2/10/40/200kU
D6619 SgeI 250U/1Ku/5kU
D6633 SmaI 500U
D6635 SmaI 2/10/40/200kU
D6652 SphI 500U/2Ku/10kU
D6658 SspI 500U/2kU/10kU
D6685 TaqI 2/10/40kU
D6713 XbaI 1500U
D6715 XbaI 10/40/200kU
D6718 XcmI 1/4/20/100kU
D6721 XhoI 2000U
D6723 XhoI 2/10/40/200kU
D6730 XmaI 2/10/40kU
D6847-50μl SgeI 50μl
物质安全数据单
输入右侧验证码点击下载:
更换校验码
质检证书
输入批号搜寻COA
搜索
相关产品请点击如下按钮:
使用本产品的文献:
购物车
会员
顶部