产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
P0399S | BeyoBCA蛋白浓度测定试剂盒(高灵敏度) | 200次 | 356.00元 |
P0399M | BeyoBCA蛋白浓度测定试剂盒(高灵敏度) | 1000次 | 1236.00元 |
P0399L | BeyoBCA蛋白浓度测定试剂盒(高灵敏度) | 5000次 | 3498.00元 |
碧云天研发生产的BeyoBCA蛋白浓度测定试剂盒(高灵敏度),即BeyoBCA Protein Assay Kit (High Sensitivity),也称BeyoBCA蛋白浓度检测试剂盒(高灵敏度) (BeyoBCA Protein Assay Kit with High Sensitivity)或BeyoBCA Plus蛋白定量试剂盒(BeyoBCA Plus Protein Assay Kit),是一种仅需室温孵育15分钟,就可以进行下限低至2µg/ml的高灵敏的蛋白浓度检测的试剂盒。本试剂盒在不需要进行超高灵敏度检测时候,仅需室温孵育5分钟,就可以完成蛋白浓度的检测。
本试剂盒根据目前最常用的两种蛋白浓度检测方法之一BCA法改良研制而成[1],提供改进的BeyoBCA试剂以及高质量的蛋白标准品,仅需室温孵育约15分钟,就可以实现简单便捷、高稳定性、高灵敏度、高兼容性和宽线性范围蛋白浓度测定。
本试剂盒与Thermo公司的Pierce™ Dilution-Free™ Rapid Gold BCA Protein Assay Kit (A55860/A55861/A55862)检测原理和检测方法基本一致。
本试剂盒具有4-2000μg/ml的超宽浓度检测范围。本试剂盒的检测上限与BCA蛋白浓度测定试剂盒(P0011/P0012)或BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型) (P0009/P0010)接近,但检测下限可低至10µg/ml以下,极大的拓宽了低浓度范围的检测能力。
本试剂盒检测灵敏度极高,样品用量少。本试剂盒检测样品体积为1-20µl,可节约样品用量。室温孵育15分钟的优先推荐条件下,检测浓度下限达到2µg/ml,最小检测蛋白量低至0.04µg;延长室温孵育时间的情况下,检测下限还可进一步降低。
本试剂盒检测速度快,孵育条件简便。标准检测条件下,仅需在室温孵育15分钟即可进行吸光度测定。
本试剂盒在4-2000µg/ml浓度范围内有较好的线性关系。本产品的标准曲线参考图1。其中图1A为最优先推荐的室温孵育15分钟该标准检测条件下的标准曲线;图1B为室温孵育15、30和60分钟的较低浓度的标准曲线比较;图1C为蛋白浓度在2000µg/ml以内的室温孵育5分钟的标准曲线,可参考进行快速检测。孵育时间可以根据检测需要灵活调整,更长的孵育时间可以在一定程度上提升检测灵敏度。
图1.碧云天BeyoBCA蛋白浓度测定试剂盒(高灵敏度) (P0399)检测BSA标准曲线的效果图。图A为本试剂盒优先推荐的室温孵育15分钟该标准检测条件下的BSA标准曲线检测效果图。图B为室温孵育15、30和60分钟的标准曲线对比。图C为室温孵育5分钟的标准曲线,同样具有很好的蛋白浓度检测效果,但检测灵敏度会略差于孵育15分钟时的效果。图中数据仅供参考,实际的检测效果可能会略有不同。
本试剂盒化学兼容性好。使用本试剂盒测定蛋白浓度,不受绝大部分样品中的化学物质的影响,但受螯合剂和某些略高浓度的还原剂或去垢剂的影响,需确保EDTA不高于5mM,Tween 20不高于0.5%,且无二硫苏糖醇(DTT)、三(2-羧乙基)膦盐酸盐(TCEP)。本试剂盒对于碧云天生产的常用裂解液(P0013/P0013B)完全兼容,使用这些产品裂解的样品可以不稀释直接进行蛋白浓度检测。使用碧云天的P0013C裂解的样品,样品体积不能超过10μl。本试剂盒兼容胺反应性标记试剂(如生物素化试剂)。本试剂盒对样品中各种物质的详细的兼容性如下表。如果样品中含有1-2%的Tween 20,设置含有相应量Tween 20的空白对照,作为样品空白用于背景扣除(参考使用说明的步骤3d),也可以尝试进行蛋白浓度检测。如果样品中含有其它不兼容的化学物质,可以尝试设置适当的含有相应不兼容化合物的空白对照,以确认是否可以顺利进行蛋白浓度检测。
Substance | Compatible Concentration |
Acetonitrile | 50% |
Acetone | 50% |
Ammonium bicarbonate | 50mM |
DMSO | 50% |
DTT (Dithiothreitol) | Not compatible |
EDTA | 5mM |
Formic acid | 0.5% |
Iodoacetamide | 1M |
Methanol | 25% |
SDS | 1% |
TCEP | Not compatible |
Tris | 100mM |
Trifluoroacetic acid | 0.5% |
Triton X-100 | 1% |
Tween 20 | 0.5% |
Urea | 1M |
如果待检测样品浓度偏高,推荐使用BeyoBCA蛋白浓度快速测定试剂盒(P0398),该试剂盒具有0.04-10mg/ml的超宽浓度检测范围,能更好兼容高浓度蛋白样品,很多常见情况下可以免稀释,室温孵育5分钟后就能进行吸光度检测。
本试剂盒和BeyoBCA蛋白浓度快速测定试剂盒(P0398)及BCA蛋白浓度测定试剂盒(P0011/P0012)、BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型) (P0009/P0010)的主要特点和差异比较请参考下表。优先推荐选购BeyoBCA蛋白浓度快速测定试剂盒(P0398),检测浓度范围非常宽,通常可以免稀释测定蛋白浓度,并且仅需室温孵育5分钟,共计约10分钟就可以完成蛋白浓度的测定。经费比较宽裕的情况下推荐选购本试剂盒,一方面可以实现高灵敏度检测,同时也可以进行室温孵育5分钟的快速检测,并且也同样具有非常宽的线性范围(主要为中低浓度范围),但价格略高。
产品编号 | P0398 | P0399 | P0011/P0012 | P0009/P0010 |
产品名称 | BeyoBCA蛋白浓度快速测定试剂盒 | BeyoBCA蛋白浓度测定试剂盒(高灵敏度) | BCA蛋白浓度测定试剂盒 | BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型) |
检测方法 | 显色法 | 显色法 | 显色法 | 显色法 |
检测范围 | 40-10,000µg/ml | 4-2000µg/ml | 50-2000μg/ml | 20-1000μg/ml |
检测浓度下限 | 20µg/ml | 2µg/ml | 25µg/ml | 10µg/ml |
待测样品体积 | 1-10µl | 1-20µl | 1-20µl | 1-20µl |
EDTA兼容性 | ≤5mM | ≤5mM | ≤10mM | ≤10mM |
还原剂兼容性 | No | No | DTT≤1mM、β-巯基乙醇≤0.01% | DTT≤1mM、β-巯基乙醇≤0.01% |
去垢剂兼容性 | Tween 20≤0.5%、Triton X-100≤5%、SDS≤1% | Tween 20≤0.5%、Triton X-100≤1%、SDS≤1% | Tween 20≤5%、Triton X-100≤5%、SDS≤5% | Tween 20≤5%、Triton X-100≤5%、SDS≤5% |
检测时间 | 5分钟 | 15分钟 | 20-30分钟 | 20-30分钟 |
孵育温度 | 室温 | 室温 | 37ºC | 37ºC |
便捷性 | ★★★★★ | ★★★★★ | ★★★★ | ★★★★ |
推荐指数 | ★★★★★ | ★★★★ | ★★★★ | ★★★★ |
本试剂盒小包装可检测200个样品,中包装可检测1000个样品,大包装可检测5000个样品。
包装清单:产品编号 | 产品名称 | 包装 |
P0399S-1 | BeyoBCA Plus Reagent A | 18ml |
P0399S-2 | BeyoBCA Plus Reagent B | 17.5ml |
P0399S-3 | BeyoBCA Plus Reagent C | 0.8ml |
P0399S-4 | Protein Standard (BSA) | 20mg |
P0399S-5 | BSA Preparation Solution | 1ml |
— | 说明书 | 1份 |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
P0399M-1 | BeyoBCA Plus Reagent A | 90ml |
P0399M-2 | BeyoBCA Plus Reagent B | 87ml |
P0399M-3 | BeyoBCA Plus Reagent C | 4ml |
P0399M-4 | Protein Standard (BSA) | 30mg |
P0399M-5 | BSA Preparation Solution | 1.5ml |
— | 说明书 | 1份 |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
P0399L-1 | BeyoBCA Plus Reagent A | 450ml |
P0399L-2 | BeyoBCA Plus Reagent B | 435ml |
P0399L-3 | BeyoBCA Plus Reagent C | 20ml |
P0399L-4 | Protein Standard (BSA) | 30mg×2 |
P0399L-5 | BSA Preparation Solution | 5ml |
— | 说明书 | 1份 |
4ºC保存,一年有效。其中BeyoBCA Plus Reagent B须避光保存;Protein Standard (BSA)配制成溶液后-20ºC冻存。
注意事项:通常推荐室温孵育15分钟条件下进行蛋白浓度检测。当蛋白浓度过低时,推荐延长孵育时间,例如孵育30分钟或更长时间。蛋白浓度不是非常低时,推荐室温孵育5分钟。不推荐在37ºC下进行孵育,温度升高会影响背景吸光度,从而使检测灵敏度降低。
BeyoBCA Plus Reagent A、B、C长期储存后如果有沉淀析出,可37ºC水浴加热或搅拌使沉淀溶解,若仍出现浑浊,则应充分振荡混匀,并在获得澄清透明溶液后使用。
需酶标仪一台,测定波长为480nm。需96孔板。如果没有酶标仪,也可以使用普通的分光光度计测定,但测定时,需根据比色皿的最小检测体积,适当加大工作液的用量使不小于最小检测体积,样品和标准品的用量可相应按比例放大也可不变。使用分光光度计测定蛋白浓度时,每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少。
如果样品中EDTA浓度高于5mM但低于10mM,或含有浓度低于1mM的二硫苏糖醇(DTT)、浓度低于0.01%的β-巯基乙醇(β-Mercaptoethanol)等还原剂时,推荐使用碧云天BCA蛋白浓度测定试剂盒(P0011/P0012)或BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型) (P0009/P0010)。
如果样品稀释液或裂解液本身就有较高背景,或样品中EDTA浓度高于10mM,或样品含有较高浓度的二硫苏糖醇(DTT)、β-巯基乙醇(β-Mercaptoethanol)等还原剂时,推荐使用碧云天Bradford蛋白浓度测定试剂盒(P0006)或Bradford蛋白浓度测定试剂盒(去垢剂兼容型) (P0006C)。
所有试剂需平衡至室温后再使用,使用完毕后各试剂应立即按照试剂盒要求的条件保存。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
Vial Number | Volume of Dilution Buffer | Volume of Protein Standard | Final Concentration |
A | 0μl | 150μl Protein Standard (BSA) (2000μg/ml) | 2000μg/ml |
B | 75μl | 75µl of Vial A | 1000μg/ml |
C | 75μl | 75µl of Vial B | 500μg/ml |
D | 75μl | 75µl of Vial C | 250μg/ml |
E | 75μl | 75µl of Vial D | 125μg/ml |
F | 75μl | 75µl of Vial E | 62.5μg/ml |
G | 75μl | 75µl of Vial F | 31.25μg/ml |
H | 75μl | 75µl of Vial G | 15.625μg/ml |
I | 75μl | 75µl of Vial H | 7.8125μg/ml |
J | 75μl | 0μl | 0μg/ml |
Samples | 1 | 10 | 20 | 50 |
Reagent A (µl) | 90 | 900 | 1800 | 4500 |
Reagent B (µl) | 86.4 | 864 | 1728 | 4320 |
Reagent C (µl) | 3.6 | 36 | 72 | 180 |
BeyoBCA Plus Working Solution (µl) | 180 | 1800 | 3600 | 9000 |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
P0006 | Bradford蛋白浓度测定试剂盒 | 1000次 |
P0006C | Bradford蛋白浓度测定试剂盒(去垢剂兼容型) | 800次 |
P0007 | 蛋白标准(5mg/ml BSA) | 1ml |
P0009/P0010 | BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型) | 200/500/5000次 |
P0011/P0012 | BCA蛋白浓度测定试剂盒 | 200/500/5000次 |
P0398 | BeyoBCA蛋白浓度快速测定试剂盒 | 200/1000/5000次 |
P0399 | BeyoBCA蛋白浓度测定试剂盒(高灵敏度) | 200/1000/5000次 |