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多肽与蛋白> 蛋白检测> 蛋白电泳
SDS-PAGE一步法红色上层胶预混液
产品编号: P0906-500ml
产品包装:500ml
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价格: ¥ 258.00
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产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
P0906-250ml SDS-PAGE一步法红色上层胶预混液 250ml 146.00元
P0906-500ml SDS-PAGE一步法红色上层胶预混液 500ml 258.00元

碧云天生产的SDS-PAGE一步法红色上层胶预混液,即SDS-PAGE One-step Red Stacking Gel Master Mix,提供了简单而又超快速地配制红色SDS-PAGE凝胶(即SDS聚丙烯酰胺凝胶)上层胶所需的主要试剂,包括Tris-HCl (pH6.8)、Acr-Bis (29:1)、电泳时无迁移红色染料、SDS等[1]。

本产品使用便捷。本上层胶预混液已经把SDS-PAGE凝胶上层胶成分预混合好,使用前仅需加入适量凝胶聚合催化剂(过硫酸铵或其替代物,如Ammonium persulfate substitute (ST005))和TEMED (ST728)即可简单快速地完成上层胶的配制。

本产品适用于一步法配胶,快速高效。本产品优化了配方,灌注下层胶(即分离胶)后,无需液封可直接加入上层胶(又称浓缩胶、堆积胶或积层胶),一步完成制胶,节约配胶时间。配合碧云天不同浓度的SDS-PAGE一步法下层胶预混液使用效果更佳,轻松超快速完成各种不同浓度SDS-PAGE凝胶的配制。

本产品上层胶为红色,指示清晰。本上层胶预混液含电泳时无迁移的红色染料,可使蛋白上样孔一目了然,便于上样,且易于判断上样孔是否歪曲或破损。该红色染料可以稳定存在于上层胶中,不会随着电泳进入下层胶,不会影响电泳和染色效果,有助于电泳后辨别并切除上层胶,便于后续转膜等实验的进行。

本产品配制的SDS-PAGE凝胶,具有优良的分离效果。电泳后蛋白条带平整、清晰、细腻、锐利,特别是小分子蛋白质条带更清晰。

本产品为4%固定浓度上层胶,通常可以满足各种常规用途。如您需要配制特殊浓度的上层胶,可以考虑单独购买Acr-Bis (29:1) (ST003)、10% SDS (ST628)、Tris-HCl (pH6.8) (ST768)和PAGE上层胶红色染料(500X, 无迁移) (P0712)等进行特殊浓度的SDS-PAGE凝胶红色上层胶配制。如果需要迁移性彩色上层胶可以购买SDS-PAGE一步法蓝色上层胶预混液(P0908)。

本产品的250ml包装约可配制125-250块常规大小的SDS-PAGE凝胶的上层胶,500ml包装约可配制250-500块常规大小的SDS-PAGE凝胶的上层胶。具体可以配制的凝胶数量和凝胶的厚薄以及凝胶的大小有关。

包装清单:
产品编号 产品名称 包装
P0906-250ml SDS-PAGE一步法红色上层胶预混液 250ml
P0906-500ml SDS-PAGE一步法红色上层胶预混液 500ml
说明书 1份
保存条件:

4ºC避光保存,一年有效。

注意事项:

进行上层胶配制时,需要另外准备过硫酸铵或其替代物(ST005)以及TEMED (ST728)。

上层胶预混液长期静置后染料可能会出现沉淀,不影响正常使用,使用前请摇晃均匀。

本产品含有Acr-Bis,对人体有毒,操作时请特别小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1.根据目的蛋白的分子量大小选择并配制合适浓度的SDS-PAGE下层胶(即分离胶)。
不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围如下:
SDS-PAGE分离胶浓度 最佳分离范围
6%胶 50-150kDa
8%胶 30-90kDa
10%胶 20-80kDa
12%胶 12-60kDa
15%胶 10-40kDa
2.称取适量过硫酸铵或其替代物(ST005),用超纯水或其它高纯度的水配制10%溶液。注:过硫酸铵或其替代物配成溶液后容易失效,需注意存放及时间限制。超纯水推荐使用ST872 BeyoPure™ Ultrapure Water (Sterile)。
3.配制一块常用PAGE胶(胶板宽度为10厘米)所用下层胶和上层胶体积(下层胶按6厘米高度计算,上层胶按1.5厘米高度计算,均含约0.3ml的冗余量)参见下表。
凝胶厚度 下层胶体积 上层胶体积
0.75mm 4.0ml 1.0ml
1.0mm 5.4ml 1.5ml
1.5mm 8.0ml 2.0ml
注:下层胶体积已包含适量冗余,请勿全部用于灌制下层胶,以免灌胶时上层胶高度不够。
4.参考下表,下层胶灌注后,在SDS-PAGE一步法红色上层胶预混液中,按照1%的比例加入相应量的10%过硫酸铵或其替代物溶液,按照0.1%的比例加入相应量的TEMED。例如10ml SDS-PAGE一步法红色上层胶预混液中,加入100μl 10%过硫酸铵或其替代物溶液和10μl TEMED,适当混匀。可直接将配制好的上层胶混合液紧贴玻璃板均匀轻柔注入,随后小心插入梳子等待凝固,通常10-30分钟内胶会凝固。也可用蒸馏水或异丙醇封住液面,直至下层胶凝固充分后再进行SDS-PAGE上层胶的配制。
注1:本上层胶预混液使用前须摇匀。
注2:一步法直接加入上层胶混合液时一定要轻缓并左右平移加入,而不是集中在一个位置灌制,以免上层胶溶液冲入下层胶而破坏上下层胶分界线的平整度,建议使用1ml移液器缓慢、均匀、左右平移加入。
注3:一步法直接加入上层胶混合液,上下层胶分界线的平整度可能会稍差于液封法,但不影响后续电泳结果。
注4:具体的凝固时间和温度及光照有关,说明书中10%过硫酸铵或其替代物和TEMED的推荐用量是室温为25ºC时的用量。为达到与25ºC时相近的凝固时间,当室温低于25ºC时,可以适当同时加大10%过硫酸铵或其替代物和TEMED的用量,例如20ºC时建议用量是正常推荐用量的1.5倍,15ºC时建议用量是正常推荐用量的2倍。
成分 配制不同体积SDS-PAGE上层胶所需各成分的体积(毫升)
SDS-PAGE一步法红色上层胶预混液 2 3 4 6 8 10
10%过硫酸铵或其替代物 0.02 0.03 0.04 0.06 0.08 0.1
TEMED 0.002 0.003 0.004 0.006 0.008 0.01
5.配制好的凝胶如果当天不能使用,可以在4ºC保存1-2天后使用,但通常新鲜配制凝胶的电泳效果更佳。
6.具体的电泳及Western实验操作可以参考如下网页:https://www.beyotime.com/support/western.htm
参考文献:
1.Laemmli UK. Nature. 1970. 227(5259):680-5.
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P0943-500ml 15% SDS-PAGE一步法下层胶预混液 500ml
P0012A SDS-PAGE凝胶配制试剂盒 可制30-50块胶
P0012AC SDS-PAGE凝胶快速配制试剂盒 可制30-50块胶
P0670-250ml 10% SDS-PAGE下层胶预混液 250ml
P0670-500ml 10% SDS-PAGE下层胶预混液 500ml
P0672-250ml 12% SDS-PAGE下层胶预混液 250ml
P0672-500ml 12% SDS-PAGE下层胶预混液 500ml
P0675-250ml 15% SDS-PAGE下层胶预混液 250ml
P0675-500ml 15% SDS-PAGE下层胶预混液 500ml
P0676-250ml 6% SDS-PAGE下层胶预混液 250ml
P0676-500ml 6% SDS-PAGE下层胶预混液 500ml
P0678-250ml 8% SDS-PAGE下层胶预混液 250ml
P0678-500ml 8% SDS-PAGE下层胶预混液 500ml
P0683-250ml SDS-PAGE上层胶预混液 250ml
P0683-500ml SDS-PAGE上层胶预混液 500ml
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P0692 12% SDS-PAGE凝胶超快速配制试剂盒 可制30-50块胶
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P0701-0.2ml PAGE上层胶蓝色染料(500X) 0.2ml
P0701-1ml PAGE上层胶蓝色染料(500X) 1ml
P0705-0.2ml PAGE上层胶红色染料(500X) 0.2ml
P0705-1ml PAGE上层胶红色染料(500X) 1ml
P0712-0.2ml PAGE上层胶红色染料(500X, 无迁移) 0.2ml
P0712-1ml PAGE上层胶红色染料(500X, 无迁移) 1ml
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