碧云天的BeyoMag™ Biotin Magnetic Beads (生物素磁珠)，也称Biotin磁珠，由高质量的生物素(Biotin)与超顺磁性纳米级磁珠共价偶联而成，能够快速、高效、灵敏、特异性地与链霉亲和素(Streptavidin)或亲和素(Avidin)以及偶联了链霉亲和素或亲和素的抗体、核酸、蛋白、多肽、凝集素等分子结合。主要用于分离纯化偶联了亲和素或链霉亲和素的核酸、抗体、蛋白或相关复合物等，用于免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)、细胞分选、DNA-蛋白相互作用研究等。

生物素(Biotin)，即维生素B7(Vitamin B7)，也称D-Biotin、维生素H (Vitamin H)、Biso Ⅱ、I、辅酶R (Coenzyme R)，是B族维生素之一[1]。生物素被归类为杂环化合物，具有含硫环稠合脲基(Sulfur-containing ring fused ureido)和四氢噻吩基团(Tetrahydrothiophene group) [1, 2]。含有-N-CO-N-基团的脲基环(Ureido ring)在羧化反应中充当二氧化碳载体。生物素参与碳水化合物的消化、脂肪酸的合成和糖异生(Gluconeogenesis)等代谢过程。核染色质中组蛋白的生物素化在染色质稳定性和基因表达中发挥重要作用。生物素还可作为羧化酶(如丙酮酸羧化酶)的辅助因子，催化丙酮酸和二氧化碳形成草酰乙酸[2]。

生物素是一种小分子，它的存在不会影响大分子的生物学功能。生物素广泛应用于生物素-(链霉)亲和素系统(biotin-(strept)avidin system)，而且生物素是羧化酶的重要辅助因子，存在于各种代谢途径中[2]。生物素与亲和素(Avidin)或链霉亲和素(Streptavidin)的结合有助于将目标分子(抗体、核苷酸、蛋白A等)与标记系统(酶、荧光、化学发光探针)连接起来。这种复合物用于许多检测系统，例如免疫沉淀、免疫组织化学/流式细胞分析、Southern和Northern等。同时，这种方法也适用于各种目标分子的纯化和表征。此外，生物素还可用于培养少突胶质细胞，作为芽孢杆菌属物种生长的维生素补充剂，在免疫组织学过程中阻断内源性生物素[3]。

生物素磁珠在生物医药领域内应用非常广泛，可以特异性地结合(链霉)亲和素偶联的抗原或者抗体，作为免疫沉淀、细胞分选、ELISA等反应的载体；结合(链霉)亲和素偶联的DNA或RNA片段，从细胞或组织提取物中分离特定的核酸-蛋白质复合物，用于蛋白质与核酸相互作用研究；结合(链霉)亲和素偶联的核酸探针，用于DNA、RNA杂交实验或mRNA的分离和纯化等；还可用于纯化单链(链霉)亲和素偶联的DNA寡核苷酸、分离(链霉)亲和素偶联的PCR产物等。本产品的实验流程参考图1。

图1. 碧云天BeyoMag™ Biotin Magnetic Beads (生物素磁珠) (P2161)的实验流程图。

本产品结合量容量高。与同类的很多产品相比，本产品具有非常高的结合容量，对复杂样品中(链霉)亲和素偶联的分子可以快速进行分离纯化，而且磁珠粒径小，不易产生非特异吸附。本产品每毫升磁珠悬浊液含约10mg磁珠，含有≥4nmol高质量生物素，每毫克磁珠可结合≥30μg(链霉)亲和素，最高可达60μg(链霉)亲和素，可高效地进行免疫沉淀等实验。

本产品特异性强。本产品可特异性地结合(链霉)亲和素偶联的抗体、核酸、蛋白、多肽、凝集素等配体分子，获得的产物纯度高，可进一步用于Western、ELISA、Northern、qPCR、质谱分析等一系列后续的分析测试。

本产品结合(链霉)亲和素偶联分子速度快，吸附时间短，可快速高效结合配体。本产品所使用的纳米级磁珠(~200nm)具有超大比表面积，有效缩短了(链霉)亲和素与生物素结合所需的时间。缩短操作时间可以避免在长时间操作过程中配体分子的降解，有效保持配体分子的活性及完整性。

本产品使用便捷。本产品储存在特殊保护液中，不含甘油，磁性分离，无需离心。本产品不仅适用于少量样本的检测，也适用于高通量筛选(high-throughput screening)的自动化操作系统，不同操作方法之间一致性高。

本产品的主要指标如下表：

如果每个用品使用20μl磁珠，每毫升本产品可以用于50个样品。

4℃保存，一年有效。长期不使用，建议-20℃保存，可以保存更长时间。

本产品需维持pH为6-8，避免高速离心、干燥；请勿长时间将磁珠置于磁场中，否则可能会引起磁珠聚团。

本产品使用前要适当充分重悬，即颠倒若干次使磁珠混合均匀，混匀操作须轻柔，不宜剧烈涡旋震荡等，避免蛋白变性等。

在免疫沉淀或纯化时，建议设计阳性和阴性对照组。

待结合分子的类型、大小及(链霉)亲和素偶联方式和程度等都会影响结合效率，建议通过稀释法来确定每种具体应用的磁珠用量，同时可以考虑加大磁珠用量至待结合分子2-3倍摩尔数量以确保结合充分。

蛋白样品收集后宜尽快完成纯化工作，并应始终放置在4ºC或冰浴，以减缓蛋白降解或变性。为有效抑制蛋白降解，可以在蛋白样品中添加适量的蛋白酶抑制剂混合物，例如碧云天的P1005/P1006 蛋白酶抑制剂混合物(通用型, 100X)、P1048/P1049 蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(通用型, 质谱兼容, 50X)、P1010/P1011 蛋白酶抑制剂混合物(哺乳动物样品抽提用, 100X)、P1050/P1051 蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(哺乳动物样品抽提用, 50X)等。

如果使用真空泵等仪器吸取上清液，须注意真空泵的吸液强度，以免吸力过大而吸取到聚集的磁珠。

酸性溶液洗脱时磁珠可能会发生聚集，属于正常现象，不影响磁珠的正常使用。0.1%的非离子型去垢剂(如Triton X-100、Tween-20或NP-40)可有效防止磁珠聚集，并且不会影响磁珠的抗体结合效率。

酸性溶液洗脱或使用SDS-PAGE洗脱后的磁珠不可重复使用。为了尽量减少生物素的脱落，无论是手动操作还是自动操作，低pH洗脱步骤都不要超过10分钟。

高浓度的DTT、巯基乙醇、盐酸胍等对本产品与配体的结合可能有一定影响，但Western及IP细胞裂解液(P0013)、RIPA裂解液(P0013B/C/D)或NP-40裂解液(P0013F)等都完全适用。碧云天生产的不同裂解液的主要特点和差异，以及如何选择裂解液可参考我们的相关网页：http://www.beyotime.com/support/lysis-buffer.htm。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。