产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
PI664 | Human IL-38/IL-1F10 ELISA Kit | 96次 | 3403.00元 |
碧云天研发的Human IL-38/IL-1F10 ELISA Kit (Human IL-38/IL-1F10 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即人白细胞介素38酶/IL-1家族成员10联免疫吸附检测试剂盒,是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液中的IL-38的ELISA试剂盒。
本产品检测灵敏度高,特异性强,重复性好。多次重复检测结果表明,最小检出量为32.2pg/ml,与人的IL-1Ra、IL-36Ra均没有交叉反应,与小鼠IL-38有17.9%交叉反应,板内、板间变异系数均<10%。
白细胞介素(Interleukin)是构成免疫信号通路重要组成部分。白细胞介素38 (Interleukin 38, IL-38),即IL-1家族成员10 (IL-1 family member 10, IL-1F10),由IL-1F10基因编码,属于IL-1家族和IL-36亚家族的成员。IL-38在组织中广泛表达,如皮肤、脾、胸腺、扁桃体等。成熟的IL-38由152个氨基酸组成,无信号肽和caspase-1切割位点,在先天性和适应性免疫的调节中发挥着重要作用。
IL-38的特异性受体是IL-1受体相关蛋白2 (IL-1 receptor related protein 2, IL-1 RRP2),即IL-36R。IL-38的基因序列与IL-36受体拮抗剂(IL-1 Receptor antagonist, IL-36Ra)的基因具有43%的同源性,二者具有相似的生物学功能。IL-38可以以类似于IL-36Ra的形式阻断IL-36R信号传导的激活[1]。
IL-38与多种疾病有关,包括心血管和自身免疫疾病,可以作为抗炎细胞因子在炎症性疾病中发挥作用。研究表明,系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus, SLE)患者血清中的IL-38浓度高于健康患者。当用重组IL-38治疗自发性SLE的小鼠模型时,小鼠的蛋白尿和皮肤损伤等症状显著较少。同时也发现这些小鼠血清中IL-17和IL-22的水平也较低, 这说明IL-38可以抑制Th17细胞产生IL-17和IL-22等炎症介质[2,3]。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA)检测样品中人IL-38/IL-1F10的浓度,其原理见图1。人IL-38/IL-1F10特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标准品或样品时,其中的人IL-38/IL-1F10会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗人IL-38/IL-1F10抗体后,生物素化抗人IL-38/IL-1F10抗体与人IL-38/IL-1F10结合,形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin (HRP-Streptavidin),由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合,因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液,固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。人IL-38/IL-1F10浓度与A450值呈正比,通过绘制标准曲线,对照样品吸光度值,即可计算出样品中靶蛋白浓度。
图1. 双抗体夹心ELISA原理图 。
一个包装的本试剂盒,包括标准品检测,可以进行96次检测。
包装清单:产品编号 | 产品名称 | 包装 |
PI664-1 | 人IL-38/IL-1F10抗体预包被板 | 8孔×12条 |
PI664-2 | 样品分析缓冲液 | 5ml |
PI664-3 | 标准品稀释液 | 10ml |
PI664-4 | 人IL-38/IL-1F10标准品 | 2-4瓶 |
PI664-5 | 人IL-38/IL-1F10生物素化抗体 | 10ml |
PI664-6 | 辣根过氧化物酶标记Streptavidin | 10ml |
PI664-7 | 洗涤液(20X) | 30ml |
PI664-8 | TMB溶液 | 10ml |
PI664-9 | 终止液 | 5ml |
PI664-10 | 封板膜(透明) | 2张 |
PI664-11 | 封板膜(白色) | 2张 |
— | 说明书 | 1份 |
标准品4℃保存,1-2周内有效,-20℃保存6个月内有效,试剂盒其它组分4℃保存6个月内有效。除标准品外,试剂盒其它组分严禁冻存。
注意事项:由于标准品一般是冻干粉,在制备后需要严格校准,所以标准品的瓶数及每瓶标准品所需加入的稀释液体积请以实际收到的试剂盒及标准品标签上的标注为准。
洗涤液(20X)在低温下可能有结晶,如果发现有结晶,请室温水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。
为保证标准品的精确性,标准品配制使用后,如果有剩余请勿再次使用。
TMB溶液请勿接触氧化剂和金属,否则容易失效。
加样时,请注意每个样品或标准品必须更换枪头,一方面避免交叉污染,另一方面也避免吸取体积的误差。
由于本试剂盒均经过独立测试,所以请勿混用不同货号和不同批次的试剂盒组分,即使是同种试剂盒不同批次的试剂盒组分也不能混用。多个试剂盒同时检测时,请独立使用各个试剂盒中的试剂,请勿使用不同试剂盒中相同名称的组分。
充分混匀对保证反应结果的精准性很重要,在加液后请轻轻晃动整个96孔板,以保证混匀。
本试剂盒很多操作在室温进行,要求严格控制室温在25-28℃。温度低于25℃会导致最终检测到的吸光度显著下降。
洗涤过程非常重要,洗涤不充分会使精确度下降并导致结果误差较大。
检测标准品和样品时建议设置重复孔,以确保检测结果的可信度。
加样过程中须避免气泡的产生。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
P5111-1mg | Recombinant Human IL-1 RA | 1mg |
P5111-100μg | Recombinant Human IL-1 RA | 100μg |
PI664 | Mouse VCAM-1/CD106 ELISA Kit | 96次 |