产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
R7096S | RNase T1 | 100000U | 398.00元 |
R7096M | RNase T1 | 500000U | 1618.00元 |
碧云天生产的RNase T1 (Ribonuclease T1),中文名为核糖核酸酶T1,是由碧云天自主研发的PerfectProtein™技术平台通过大肠杆菌表达、纯化获得的高品质重组RNase T1。
RNase T1来源于米曲霉(Aspergillus oryzae),是一种核糖核酸内切酶,特异性地在单链RNA的鸟嘌呤核糖核苷酸(G)后进行切割。在反应中,RNase T1切割鸟嘌呤核糖核苷酸3'-磷酸基团和相邻核糖核苷酸5'-羟基之间的磷酸二酯键,形成2’,3’环磷酸腺苷中间体,即使3’末端形成G-cP,随后水解为相应的3’末端带有GMP (G-P)的寡核苷酸[1]。RNase T1的活性不依赖于金属离子。
碧云天生产的RNase T1对含单个G的单链RNA的酶切效果请参考图1。
图1. 碧云天生产的RNase T1对含单个G的单链RNA的酶切效果图。M: Small RNA Ladder (R0206)。反应体系(20μl): 50mM Tris-HCl (pH7.5 at 25℃), 2mM EDTA, 2mM DTT, 2U/μl RNase Inhibitor (R0102, 抑制RNase A等但不会抑制RNase T1), 2μM RNA Oligos,图中指定量的来自T公司和Beyotime生产的RNase T1。配制好反应体系后,37℃孵育15min进行反应。反应结束后,立即加入4μl 6X DNA Loading Buffer,100℃加热10min,取6μl进行尿素(7M)变性聚丙烯酰胺(15%)凝胶电泳。将1μl Small RNA Ladder与1μl 2X RNA Loading Buffer (R0215)混合,100℃加热10min,取2μl分别与样品一起进行凝胶电泳。电泳结束后,将Gel-Red (EB升级换代产品,10000X) (D0140)用双蒸水进行1:5000稀释,室温染色15min,并在紫外灯下观察实验结果。如图所示,40nt的底物RNA Oligos经RNase T1切割后,产生15nt和25nt的 RNA Oligo产物。本产品与T公司的产品相比,对单链RNA具有基本一致的酶切效果。图中效果仅供参考,不同的实验条件下获得的实际检测效果可能会略有不同。
用途:去除DNA中的RNA;去除制备的重组蛋白中的RNA;RNA测序;与RNase A结合使用于核糖核酸酶保护分析(RNA protection assay);测定不含G或低G含量DNA模板的转录水平。
来源:由大肠杆菌表达,表达基因为米曲霉(Aspergillus oryzae)的rntA基因。
分子量:12.4kDa。
活性定义:One unit of the enzyme causes an increase in absorbance of 1.0 at 260nm in 15min when yeast RNA is hydrolyzed at 37℃ and pH7.5.
纯度:纯度≥95%;不含DNA内切酶和外切酶,不含其它核糖核酸酶。
酶储存溶液:50mM Tris-HCl (pH7.4), 50% (v/v) glycerol.
Reaction Buffer (10X): 500mM Tris-HCl (pH7.5), 20mM EDTA.
失活或抑制:金属离子Mg2+ (100mM MgCl2约抑制40%的活性)、Ca2+ (10mM CaCl2约抑制30%的活性)、Zn2+、Fe2+、Cu2+和单核苷酸(2'-GMP、3'-GMP等)均可抑制RNase T1的活性,Guanylyl 2'-5' guanosine是RNase T1的特异性抑制剂[2]。RNase T1对热有较高的耐受性,在pH6.0的溶液中,可100℃加热耐受10min;但在pH>9.0的碱性溶液中不稳定。RNase T1的热失活是可逆的。将反应体系加热到100℃并不能终止反应[3]。可通过柱纯化或酚/氯仿抽提的方法去除RNase T1。
包装清单:产品编号 | 产品名称 | 包装 |
R7096S-1 | RNase T1 (1000U/μl) | 100μl |
R7096S-2 | 10X Reaction Buffer | 1ml |
— | 说明书 | 1份 |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
R7096M-1 | RNase T1 (1000U/μl) | 500µl |
R7096M-2 | 10X Reaction Buffer | 5ml |
— | 说明书 | 1份 |
-20℃保存,至少两年有效。
注意事项:酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
Reagent | Volume | Final Concentration |
DEPC Water (DNase, RNase free) | (16.4-x)μl | - |
10X Reaction Buffer | 2μl | 1X |
RNase Inhibitor (40U/μl) | 1μl | 2U/μl |
DTT (100mM) | 0.4μl | 2mM |
Single-stranded RNA Containing G Nucleotide | xμl | RNA≤50ng/μl |
RNase T1 (1000U/μl) | 0.2μl | 10U/μl |
Total volume | 20μl | - |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D0139 | Gel-Red (EB升级换代产品, 10000X) | 0.2ml |
D0140 | Gel-Red (EB升级换代产品, 10000X) | 1ml |
D7089 | RNase H | 100U |
R0021 | DEPC水(DNase, RNase free) | 100ml |
R0022 | DEPC水(DNase, RNase free) | 500ml |
R0102-2kU | RNase Inhibitor | 2000U |
R0102-10kU | RNase Inhibitor | 10000U |
R0102-50kU | RNase Inhibitor | 50000U |
R0206 | Small RNA Ladder | 100μl |
R0215 | 2X RNA Loading Buffer | 1ml |
R7090S | Thermostable RNase H | 250U |
R7090M | Thermostable RNase H | 1000U |
R7090L | Thermostable RNase H | 5000U |
R7096S | RNase T1 | 100,000U |
R7096M | RNase T1 | 500,000U |
ST576 | RNase A (10mg/ml, DNase free) | 1ml |
ST577 | RNase A (100mg/ml, DNase free) | 0.5ml |
ST578 | RNase A (10mg/ml) | 1ml |
ST579 | RNase A (100mg/ml) | 0.5ml |