使用说明:
1.按照实验要求制备单细胞悬液,加入适量BeyoFC™流式检测细胞染色缓冲液(C1711)洗涤细胞,4ºC,350×g离心5分钟,弃上清。
2.加入适量BeyoFC™流式检测细胞染色缓冲液重悬细胞,调整细胞密度至合适范围。推荐细胞密度为5-10×106 cells/ml。
3.(选做)根据对应的抗体说明书进行细胞表面荧光染色。
4.染色结束后(如有),加入适量BeyoFC™流式检测细胞染色缓冲液洗涤细胞,4ºC,350×g离心5分钟,弃上清。
5.重复步骤4一次。
6.对于每106个细胞,推荐加入200µl BeyoFC™流式检测细胞固定液,重悬细胞进行固定。通常室温固定10-20分钟即可,具体固定时间可根据实验条件、细胞类型等条件调整,经测试,本产品可对细胞进行1-2小时较长时间的固定。固定结束后,4ºC,350×g离心5分钟,弃上清。
7.加入适量BeyoFC™流式检测细胞染色缓冲液洗涤细胞1-2次,4ºC,350×g离心5分钟,弃上清。
8.选择合适的试剂进行后续的通透及免疫荧光染色步骤。推荐使用碧云天BeyoFC™流式检测细胞通透与洗涤液(Triton X-100) (C1715)、BeyoFC™流式检测细胞通透与洗涤液(Saponin) (C1717)、BeyoFC™ Foxp3/转录因子破膜试剂盒(C1740)或BeyoFC™固定与通透试剂盒(C1743)。
注:上述使用说明仅供参考,可根据细胞类型、实际检测效果及流式细胞仪配置等进行一些优化或调整。
参考文献:
1.Alison J. Hobro, Nicholas I. Smith. Vibrational Spectroscopy. 2017. 91. 31-45.
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