使用说明:
1.按照实验要求制备单细胞悬液,加入适量BeyoFC™流式检测细胞染色缓冲液(
C1711)洗涤细胞,4ºC,350×g离心5分钟,弃上清。
2.加入适量BeyoFC™流式检测细胞染色缓冲液重悬细胞,调整细胞密度至合适范围。推荐细胞密度为5-10×10
6 cells/ml。
3.(选做)根据对应的抗体说明书进行细胞表面荧光染色。
4.染色结束后(如有),加入适量BeyoFC™流式检测细胞染色缓冲液洗涤细胞,4ºC,350×g离心5分钟,弃上清。
5.重复步骤4一次。
6.对于每10
6个细胞,推荐加入200µl BeyoFC™流式检测细胞固定液(
C1713),重悬细胞进行固定。通常室温固定10-20分钟即可,具体固定时间可根据实验条件、细胞类型等条件调整。经测试,BeyoFC™流式检测细胞固定液可对细胞进行1-2小时较长时间的固定。固定结束后,4ºC,350×g离心5分钟,弃上清。
7.加入适量碧云天BeyoFC™流式检测细胞染色缓冲液洗涤细胞1-2次,4ºC,350×g离心5分钟,弃上清。
8.加入1ml BeyoFC™流式检测细胞通透与洗涤液(Saponin),充分重悬细胞,在室温下避光孵育10-15分钟以通透细胞。4ºC,350×g离心5分钟,弃上清。
注:碧云天同时提供BeyoFC™流式检测细胞固定与通透缓冲液(C1719),仅需一步即可同时实现固定及通透步骤,如需获取可点击相关产品或查询网站。
9.加入适量BeyoFC™流式检测细胞染色缓冲液洗涤细胞,4ºC,350×g离心5分钟,弃上清。
10.重复步骤9 1-2次,然后按照对应的抗体说明书进行胞浆抗原、细胞因子、趋化因子等的免疫荧光染色及流式检测。
注:上述使用说明仅供参考,可根据细胞类型、实际检测效果及流式细胞仪配置等进行一些优化或调整。
参考文献:
1.McKinnon KM. Curr Protoc Immunol. 2018. 120:5.1.1-5.1.11.
相关产品:
产品编号 |
产品名称 |
包装 |
FFC005-1bag |
BeyoGold™流式细胞管(5ml, 透明, 无菌) |
25个/袋 |
FFC005-20bags |
BeyoGold™流式细胞管(5ml, 透明, 无菌) |
25个/袋, 20袋/箱 |
C0025-200ml |
人外周血淋巴细胞分离液 |
200ml |
C0027S |
大鼠外周血淋巴细胞分离试剂盒 |
200ml |
C0029S |
小鼠外周血淋巴细胞分离试剂盒 |
200ml |
C0031S |
兔外周血淋巴细胞分离试剂盒 |
200ml |
C0071 |
BeyoClick™ EdU-488细胞增殖检测试剂盒 |
50-500次/200-2000次 |
C0075 |
BeyoClick™ EdU-555细胞增殖检测试剂盒 |
50-500次/200-2000次 |
C0078 |
BeyoClick™ EdU-594细胞增殖检测试剂盒 |
50-500次/200-2000次 |
C0081 |
BeyoClick™ EdU-647细胞增殖检测试剂盒 |
50-500次/200-2000次 |
C1052 |
细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒 |
50次 |
C1053 |
7-AAD细胞活力检测试剂盒 |
200次/1000次 |
C1055 |
一步法细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒 |
50次/200次 |
C1062 |
Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒 |
20次/50次/100次 |
C1065 |
Annexin V-PE细胞凋亡检测试剂盒 |
20次/50次/100次 |
C1067 |
Annexin V-EGFP细胞凋亡检测试剂盒 |
20次/50次 |
C1069 |
Annexin V-mCherry细胞凋亡检测试剂盒 |
20次/50次/100次 |
C1070 |
Annexin V-mCherry/SYTOX Green细胞凋亡检测试剂盒 |
20次/50次 |
C1711 |
BeyoFC™流式检测细胞染色缓冲液 |
100ml/500ml |
C1713 |
BeyoFC™流式检测细胞固定液 |
100ml/500ml |
C1715 |
BeyoFC™流式检测细胞通透与洗涤液(Triton X-100) |
100ml/500ml |
C1717 |
BeyoFC™流式检测细胞通透与洗涤液(Saponin) |
100ml/500ml |
C1719 |
BeyoFC™流式检测细胞固定与通透缓冲液 |
100ml |
C1731 |
BeyoFC™ PI/RNase即用型染色液 |
100ml |
C1734 |
BeyoFC™ PI染色液(50X) |
0.5ml/2ml |
C1737 |
BeyoFC™ 7-AAD染色液(50X) |
1ml/5ml |
C1740 |
BeyoFC™ Foxp3/转录因子破膜试剂盒 |
150次 |
C1743 |
BeyoFC™固定与通透试剂盒 |
200次 |
C1746 |
BeyoFC™ Plus固定与通透试剂盒(含阻断剂Monensin) |
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50次/200次 |
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BeyoFC™ FcR封闭剂(Anti-mouse CD16/CD32) |
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BeyoFC™小鼠脾脏单细胞悬液制备试剂盒 |
20次/100次 |
C3702 |
红细胞裂解液 |
120ml/500ml |