pCMV-C-Myc

 产品编号: D2672
 产品包装: 1μg
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产品简介

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产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
D2672 pCMV-C-Myc 1μg 862.00元

    pCMV-C-Myc是碧云天自行研发的用于在哺乳动物细胞中表达C端和Myc tag(Myc标签)融合的目的蛋白的表达质粒。含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达;在多克隆位点的3'端含有一个可以编码Myc标签的序列,因此可以表达出含有Myc标签的融合蛋白,可以方便地使用抗Myc的抗体来识别目的蛋白,有利于目的蛋白检测和分离纯化。质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
    pCMV-C-Myc质粒的主要信息如下:
    Feature Nucleotide                                             Position
    CMV promoter                                                   1-602
    T3 promoter and T3 primer binding site                         620-639
    multiple cloning site                                          680-740
    c-Myc tag                                                      741-770
    T7 promoter and T7 primer binding site                         823-844
    SV40 polyA signal                                              856-1239
    f1 origin of ss-DNA replication                                1377-1681
    bla promoter                                                   1706-1830
    SV40 promoter                                                  1850-2188
    neomycin/kanamycin resistance ORF                              2223-3014
    HSV-thymidine kinase(TK)polyA signal                           3015-3473
    pUC origin                                                     3602-4269
    pCMV-C-Myc质粒的图谱如下:
       
    pCMV-C-Myc的多克隆位点的详细图谱如下:
                                       XmaI                 PstI
        SacI                           SmaI    BamHI  HindIII
    651 GAGCTCCACC GCGGTGGCGG CCGCTCTAGC CCGGGCGGAT CCAAGCTTCT
        CTCGAGGTGG CGCCACCGCC GGCGAGATCG GGCCCGCCTA GGTTCGAAGA
                                                           Myc
            EcoRI  EcoRV SalI   BglII XhoI   XbaI   E  Q  K  L
    701 GCAGGAATTC GATATCGTCG ACAGATCTCT CGAGTCTAGA GAGCAGAAAC
        CGTCCTTAAG CTATAGCAGC TGTCTAGAGA GCTCAGATCT CTCGTCTTTG
        tag                 
          I  S  E   E  D  L      ApaI
    751 TCATCTCTGA AGAGGATCTG TAAGGGCCCG GTACCTTAAT TAATTAAGGT
        AGTAGAGACT TCTCCTAGAC ATTCCCGGGC CATGGAATTA ATTAATTCCA
    pCMV-C-Myc中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-C-Myc)包括:
    Afl II    Age I       Ahd I     Asc I     Bbs I       Bbv II    Blp I
    Bsg I     BsiW I      BsmB I    BspM II   BsrG I      BssH II   Bst1107 I
    BstE II   Eco47 III   Eco72 I   EcoN I    Esp I       Fse I     Nru I
    PflM I    Pme I       Pml I     PpuM I    Psp1406 I   Sap I     Sca I
    Spe I     Spl I
    pCMV-C-Myc中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-C-Myc once)包括:

Nde I      CA`TA,TG       241
SnaB I     TAC|GTA        347
Nhe I      G`CTAG,C       598
Sac I      G,AGCT`C       656
Sac II     CC,GC`GG       663
BstX I     CCAN,NNNN`NTGG 664
Not I      GC`GGCC,GC     669
PspA I     C`CCGG,G       681
Xma I      C`CCGG,G       681
Srf I      GCCC|GGGC      683
Sma I      CCC|GGG        683
BamH I     G`GATC,C       688
Hind III   A`AGCT,T       694
Pst I      C,TGCA`G       704
EcoR I     G`AATT,C       706
EcoR V     GAT|ATC        714
Sal I      G`TCGA,C       718
Acc I      GT`MK,AC       719
Bgl II     A`GATC,T       724
PaeR7 I    C`TCGA,G       730
Xho I      C`TCGA,G       730
Xba I      T`CTAG,A       736
Ear I      CTCTTC 7/10    755
Bsp120 I   G`GGCC,C       775
Apa I      G,GGCC`C       779

Pvu I       CG,AT`CG           857
Bcl I       T`GATC,A          1011
Mun I       C`AATT,G          1104
Hpa I       GTT|AAC           1117
Mlu I       A`CGCG,T          1240
Dra III     CAC,NNN`GTG       1470
Sfi I       GGCCN,NNN`NGGCC   2127
BseR I      GAGGAG 16/14      2170
Stu I       AGG|CCT           2173
Cla I       AT`CG,AT          2192
Kas I       G`GCGC,C          2351
Nar I       GG`CG,CC          2352
Ehe I       GGC|GCC           2353
Bbe I       G,GCGC`C          2355
Msc I       TGG|CCA           2434
Tth111 I    GACN`N,NGTC       2470
BsrD I      GCAATG, 8         2585
Bsp1286 I   G,DGCH`C          2655
Rsr II      CG`GWC,CG         2868
BsiC I      TT`CG,AA          3034
BstB I      TT`CG,AA          3034
Bsa I       GGTCTC 7/11       3341
HgiE II     ACCNNNNNNGGT-1/13 3681
ApaL I      G`TGCA,C          3956

    pCMV-C-Myc质粒中对于插入片段进行测序时,推荐使用的正向测序引物T3和反向测序引物T7的序列如下:
    T3 primer(620-639): 5′AATTAACCCTCACTAAAGGG 3′
    T7 primer(823-844): 5′GTAATACGACTCACTATAGGGC 3′
    pCMV-C-Myc的全序列信息: D2672 pCMV-C-Myc-seq.txt
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产品编号

产品名称

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D2672

pCMV-C-Myc

1μg

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保存条件:
   -20℃保存。
注意事项:
    本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人
或单位。
    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明

使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。
   抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. pCMV-C-Myc质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,需注意插入基因片段和tag之间
   的读码框要一致,即需要避免发生移码突变。构建的质粒可以用常规方法转染细胞。

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使用本产品的文献:
1. Wang PH, Yang LS, Gu ZH, Weng SP, Yu XQ, He JG.
   Nucleic acid-induced antiviral immunity in shrimp.
   Antiviral Res.2013 Jun 15.pii:S0166-3542(13)00156-3.doi:10.1016/j.antiviral.2013.05.016.
   [Epub ahead of print].




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