pCMV-N-Myc

 产品编号: D2756
 产品包装: 1μg
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产品简介

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产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
D2756 pCMV-N-Myc 1μg 862.00元

    pCMV-N-Myc是碧云天自行研发的用于在哺乳动物细胞中表达N端和Myc tag(Myc标签)融合的目的蛋白
的表达质粒。含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达;在多克隆位点的5'端含有一个可以编码Myc标签的序列,因此可以表达出含有Myc标签的融合蛋白,可以方便地使用抗Myc的抗体来识别目的蛋白,有利于目的蛋白检测和分离纯化。质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
    pCMV-N-Myc质粒的主要信息如下:
    Feature Nucleotide                                                Position
    CMV promoter                                                      1-602
    T3 promoter and T3 primer binding site                            620-639
    Myc tag                                                           679-708
    multiple cloning site                                             711-784
    T7 promoter and T7 primer binding site                            827-848
    SV40 polyA signal                                                 860-1243
    f1 origin of ss-DNA replication                                   1381-1687
    bla promoter                                                      1712-1836
    SV40 promoter                                                     1856-2194
    neomycin/kanamycin resistance ORF                                 2229-3020
    HSV-thymidine kinase(TK)polyA signal                              3021-3479
    pUC origin                                                        3608-4275
    pCMV-N-Myc质粒的图谱如下:
     
    pCMV-N-Myc的多克隆位点的详细图谱如下:
                                                   Myc tag    
        SacI                       M  E  Q  K   L  I  S   E  E
    651 GAGCTCCACC GCGGTGGCGG CCGCCATGGA GCAGAAACTC ATCTCTGAAG
        CTCGAGGTGG CGCCACCGCC GGCGGTACCT CGTCTTTGAG TAGAGACTTC
                   XmaI                PstI
          D  L     SmaI   BamHI  HindIII      EcoRI  EcoRV SalI
    701 AGGATCTGAG CCCGGGCGGA TCCAAGCTTC TGCAGGAATT CGATATCGTC
        TCCTAGACTC GGGCCCGCCT AGGTTCGAAG ACGTCCTTAA GCTATAGCAG
           BglII XhoI   XbaI   SpeI  ApaI   KpnI
    751 GACAGATCTC TCGAGTCTAG AACTAGTGGG CCCGGTACCT TAATTAATTA
        CTGTCTAGAG AGCTCAGATC TTGATCACCC GGGCCATGGA ATTAATTAAT
    pCMV-N-Myc中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-N-Myc)包括:
    Afl II    Age I       Ahd I     Asc I     Bbs I       Bbv II    Blp I
    Bsg I     BsiW I      BsmB I    BspM II   BsrG I      BssH II   Bst1107 I
    BstE II   Eco47 III   Eco72 I   EcoN I    Esp I       Fse I     Nru I
    PflM I    Pme I       Pml I     PpuM I    Psp1406 I   Sap I     Sca I
    Spl I     Xca I
    pCMV-N-Myc中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-N-Myc once)包括:

Nde I      CA`TA,TG       241
SnaB I     TAC|GTA        347
Nhe I      G`CTAG,C       598
Sac I      G,AGCT`C       656
Sac II     CC,GC`GG       663
BstX I     CCAN,NNNN`NTGG 664
Not I      GC`GGCC,GC     669
Ear I      CTCTTC 7/10    693
PspA I     C`CCGG,G       712
Xma I      C`CCGG,G       712
Srf I      GCCC|GGGC      714
Sma I      CCC|GGG        714
BamH I     G`GATC,C       719
Hind III   A`AGCT,T       725
Pst I      C,TGCA`G       735
EcoR I     G`AATT,C       737
EcoR V     GAT|ATC        745
Sal I      G`TCGA,C       749
Acc I      GT`MK,AC       750
Bgl II     A`GATC,T       755
PaeR7 I    C`TCGA,G       761
Xho I      C`TCGA,G       761
Xba I      T`CTAG,A       767
Spe I      A`CTAG,T       773
Bsp120 I   G`GGCC,C       779

Apa I       G,GGCC`C          783
Pvu I       CG,AT`CG          861
Bcl I       T`GATC,A          1015
Mun I       C`AATT,G          1108
Hpa I       GTT|AAC           1121
Mlu I       A`CGCG,T          1244
Dra III     CAC,NNN`GTG       1474
Sfi I       GGCCN,NNN`NGGCC   2133
BseR I      GAGGAG 16/14      2176
Stu I       AGG|CCT           2179
Cla I       AT`CG,AT          2198
Kas I       G`GCGC,C          2357
Nar I       GG`CG,CC          2358
Ehe I       GGC|GCC           2359
Bbe I       G,GCGC`C          2361
Msc I       TGG|CCA           2440
Tth111 I    GACN`N,NGTC       2476
BsrD I      GCAATG, 8         2591
Bsp1286 I   G,DGCH`C          2661
Rsr II      CG`GWC,CG         2874
BsiC I      TT`CG,AA          3040
BstB I      TT`CG,AA          3040
Bsa I       GGTCTC 7/11       3347
HgiE II     ACCNNNNNNGGT-1/13 3687
ApaL I      G`TGCA,C          3962

    pCMV-N-Myc质粒中对于插入片段进行测序时,推荐使用的正向测序引物T3和反向测序引物T7的序列
如下:
    T3 primer(620-639): 5′AATTAACCCTCACTAAAGGG 3′
    T7 primer(827-848): 5′GTAATACGACTCACTATAGGGC 3′
    pCMV-N-Myc的全序列信息: D2756 pCMV-N-Myc-seq.txt
包装清单:

产品编号

产品名称

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D2756

pCMV-N-Myc

1μg

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保存条件:
   -20℃保存。
注意事项:
    本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人
或单位。
    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明

使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。
   抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. pCMV-N-Myc质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,需注意插入基因片段和tag之间
   的读码框要一致,即需要避免发生移码突变。构建的质粒可以用常规方法转染细胞。

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1. Xia M, Gonzalez P, Li C, Meng G, Jiang A, Wang H, Gao Q, Debatin KM, Beltinger C, Wei J.
   Mitophagy enhances oncolytic measles virus replication by mitigating DDX58/RIG-I-like
   receptor signaling.

   J Virol. 2014 May;88(9):5152-64. doi: 10.1128/JVI.03851-13. Epub 2014 Feb 26.




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