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产品简介
产品简介：
| 产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
| P0211 | TMB显色液(组化或膜HRP显色用) | 100ml | 222.00元 |
TMB显色液(组化或膜HRP显色用)(TMB Horseradish Peroxidase Color Development Solution for
Immunohistochemistry or Blotting)是一种采用了最新单一溶液TMB显色技术，通过辣根过氧化物酶(HRP)催化TMB显色，用于免疫组化、原位杂交或膜显色等的显色液。本显色液也可以用于原位检测细胞或组织内源性的过氧化物酶。
通常的TMB显色试剂由多个组份组成，必须在使用前进行配制，并且容易产生沉淀，使用相对不太方
便，并且也容易导致结果不太稳定。本TMB显色液采用了最新的TMB显色技术，把所有的相关试剂全部配制在一个溶液中，仅由单一溶液组成，简化了操作步骤，并且使检测结果更加稳定可靠。
TMB，即3，3′，5，5′-Tetramethylbenzidine，是辣根过氧化物酶的常用底物。在辣根过氧化物酶或其他适当过氧化物酶的催化下，TMB会产生可溶性蓝色产物。蓝色产物通常可以在370nm或620-650nm测定吸光度。
本试剂盒主要适用于免疫组化或原位杂交时HRP的显色检测，以及Western、Southern、Northern等HRP
的膜显色检测。
用于免疫组化检测时，如果每个样品的显色液用量为0.1ml，则可以检测1000个样品；对于膜的显色检
测，如果每次使用2.5ml显色液，则可以检测40次。
包装清单：
产品编号 |
产品名称 |
包装 |
P0211 |
TMB显色液(组化或膜HRP显色用) |
100ml |
— |
说明书 |
1份 |
保存条件：
4℃避光保存，一年有效。
注意事项：
TMB对人体有刺激性，请注意适当防护。
如果发现TMB辣根过氧化物酶显色液出现混浊或颜色变成蓝色，应该停止使用。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明
使用说明：
1. 对于免疫组化检测：
a. 参考免疫组化的实验步骤，在与辣根过氧化物酶标记的抗体孵育后，用适当洗涤液洗涤3-5次，每次
3-5分钟。
b. 洗涤完毕后，去除洗涤液，滴加约100微升TMB显色液。
c. 室温避光孵育3-30分钟或更长时间(可在湿盒中显色过夜)，直至显色至预期深浅。
d. 去除染色液，加入去离子水或重蒸水孵育10分钟以终止反应。
e. 拍照记录或适当封片后拍照记录。如果有必要，可以使用中性红染色液(C0123)进行复染后再进行拍
照记录或适当封片后拍照记录。
2. 对于膜的HRP显色检测：
a. 参考相应的实验步骤，在与辣根过氧化物酶标记的抗体孵育后，用适当洗涤液洗涤3-5次，每次5分钟
左右。
b. 洗涤完毕后，去除洗涤液，
c. 滴加约适量TMB显色液充分覆盖膜。
d. 室温避光孵育3-30分钟或更长时间(可长达数小时)，直至显色至预期深浅。
e. 直接拍照记录。
常见问题：
1. 背景显色太深。
a. 如果背景显色太深，一方面需考虑使用适当的封闭液进行封闭，例如选购适当的封闭液或使用和一抗
相同来源的血清(10%)进行封闭。另一方面，请选购经过适当吸附的二抗，以减小二抗的非特异性吸
附。
b. 可以考虑缩短显色时间，或降低二抗浓度。另外，选择适当强度的洗涤液，或延长洗涤时间也会有所
帮助。
2. 没有显色或显色太弱。
a. 适当提高一抗或二抗的浓度。检测二抗效果，滴一滴稀释二抗在离心管内，检测二抗是否可以被正常
显色。
b. 可以考虑使用更加灵敏的放大检测体系，例如使用生物素检测体系。
c. 可以适当延长显色时间。
d. 如果上述改进不能获得预期效果，对于免疫组化或Western，可以考虑更换效果更好的一抗；对于
Southern、Northern或原位杂交，则可以考虑更换探针。
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1. Du G, Ye L, Zhang G, Dong Q, Liu K, Tian J.
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J Cancer Res Clin Oncol. 2012 Jun 15.
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