碧云天生产的CellTiter-Lumi™发光法细胞活力检测试剂盒(CellTiter-Lumi™ Luminescent Cell Viability Assay Kit)，简称CTL发光法细胞活力检测试剂盒或CTL，是一种通过化学发光法测定细胞内ATP含量从而用于超高灵敏度、超宽线性范围定量检测活细胞数目的试剂盒。

本产品是CellTiter-Lumi™ II发光法细胞活力检测试剂盒(简称CTL II，产品编号为C0056)的不同包装版本，两者的检测效果完全一致。本产品，即CTL为即用型液体，其优点是无需配制即可以直接使用，但长期保存需要置于-80℃，如果在-20℃保存时间较长后检测效果会逐渐下降。CTL II，为CTL的冻干粉版本，优点是在-20℃保存特别稳定，缺点是使用前需要使用提供的缓冲液充分溶解底物冻干粉后才能使用。

本试剂盒的性能基本达到甚至在有些方面优于国外同类产品。本产品的用途与CellTiter-Lumi™ Plus Luminescent Cell Viability Assay(简称CTL Plus)及Promega公司的CellTiter-Glo® Luminescent Cell Viability Assay(简称CellTiter-Glo®或CTG)基本相同，检测灵敏度和发光检测数据略优于CTL Plus，显著优于CTG，线性范围和CTL Plus和CTG相近，但

本产品线性范围宽。96孔板中，在12个至3万个细胞范围内有良好的线性关系。不同细胞的检测数量上限会有显著不同。对于一些ATP含量特别高的细胞，在细胞数量达到3万个后可能会不呈现线性关系，但化学发光读数还是会继续升高的。如果检测的细胞数量超过3万，推荐使用检测上限更高的CellTiter-Lumi™ Plus发光法细胞活力检测试剂盒(C0068)或CellTiter-Lumi™ Plus II发光法细胞活力检测试剂盒(C0057)。

本产品发光强度高。对于相同的细胞样品，通常在3万个细胞数量范围内，本产品的发光效果比CTL Plus强约20-100%，比国外同类产品强1-3倍，实测效果会因细胞种类的不同而有所不同。例如，对于NIH3T3和HeLa细胞的检测，CTL的发光强度比CTL Plus高约40-100%，比国外同类产品强约2-3倍；而对于Jurkat细胞的检测，CTL的发光强度则比CTL Plus强约20-70% ，比国外同类产品强约1.5-3倍(图1D)。

本产品检测灵敏度高。使用本产品检测细胞数量仅为25个/孔时，发光强度可达空白孔的2倍左右。本产品与CTL Plus和国外同类产品(Competitor P)的检测效果比较参见图1。

图1. 本产品CellTiter-Lumi™ Luminescent Cell Viability Assay Kit (CTL)和同类产品CellTiter-Lumi™ Plus Luminescent Cell Viability Assay (CTL Plus)及国外同类产品(Competitor P)对不同细胞的检测效果。图A-C为CTL、CTL Plus和Competitor P对不同数量HeLa细胞在白色96孔板中的检测效果，图D为CTL、CTL Plus和Competitor P对2.5万个/孔NIH3T3、HeLa和Jurkat细胞在白色96孔板中的检测效果。实际读数会因细胞种类、检测仪器等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。

本产品操作简单，读数稳定，检测速度快，完成检测仅需约10分钟。本产品比常见的MTT、alamarBlue、Calcein-AM、WST-1、CCK-8等其它细胞活力测定方法更加简单快捷。只需把试剂盒提供的单一即用型试剂CellTiter-Lumi™发光法检测试剂与培养细胞等体积混合，反应10分钟后即可进行化学发光检测。无需洗涤细胞，也无需更换或去除培养液。并且化学发光比较稳定，在反应开始后的10分钟内下降不超过10%，30分钟内的下降不超过30%。

本产品稳定性好。本试剂盒中的CellTiter-Lumi™发光法检测试剂稳定性好，反复冻融5次对检测效果基本无影响，反复冻融10次检测效果下降不超过10%。本产品4℃保存3天对检测效果无显著影响，4℃保存7天检测效果下降不超过10%。室温保存1天，仍可保留80%以上的检测效果。37℃保存1天，可保持60%以上的检测效果。

本产品使用灵活便捷。本产品不仅适合少量样品的检测，也非常适合大量样品的高通量筛选(high-throughput screening)检测。

ATP，作为最重要的能量分子，在细胞的各种生理、病理过程中起着重要作用。ATP是细胞新陈代谢的一个重要指标，也是具有代谢活性细胞的重要标志性分子，并和活细胞数目成良好的线性关系。因此，ATP含量能很好地反应活细胞的数目，即本试剂盒可以通过测定ATP含量来进行细胞计数或检测细胞活力。

本试剂盒通过ATP检测细胞活力的原理参见图2。借助ATP依赖的萤光素酶催化的萤光素发光反应，ATP可以通过测定化学发光来进行定量。由于ATP含量能很好地反映活细胞的数目，而ATP含量和发光强度成正比，这样就可以简单地通过化学发光强度来计算出细胞活力或细胞数目。

图2. 碧云天CellTiter-Lumi™发光法细胞活力检测试剂盒(CTL)检测ATP的原理图。

碧云天的CellTiter-Lumi™系列产品的主要特点和差异请参考下表。对于待检测的细胞量可能超过3万时，推荐选购Plus系列；对于检测数据的稳定性要求特别高时，推荐选购Steady系列产品；对于希望在-20℃长期稳定保存CTL系列产品的情况，推荐选购II系列的冻干粉包装。

碧云天各种细胞增殖和细胞毒性检测试剂盒的比较和选择，请参考http://www.beyotime.com/support/cell-proliferation.htm。

对于96孔板，推荐使用100μl细胞培养液和100μl的检测试剂，总体积为200μl，此时本试剂盒每10ml可以进行100次检测。对于384孔板，推荐使用25μl细胞培养液和25μl的检测试剂，总体积为50μl，此时本试剂盒每10ml可以进行400次检测。也可以用其它体积的试剂进行检测，但细胞培养液和检测试剂体积的比例须为1:1。

-20℃避光保存，至少一年有效。-80℃避光保存，可以保存更长时间。

本产品在-20℃保存其检测效果会逐渐下降，保存一年后其发光效果会降低约35%。因此，如果希望本产品的发光效果更加稳定，推荐在-80℃避光保存，或者可以考虑选购在-20℃保存非常稳定的CellTiter-Lumi™ II发光法细胞活力检测试剂盒(C0056)。

本试剂盒的检测试剂中含有萤光素酶，反复冻融会导致其逐渐失活。尽管经测试本试剂反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，为取得良好的使用效果，第一次解冻后可适当分装保存，但需注意分装的容器不能有ATP污染。反复冻融过程中，可能会导致检测试剂中出现少量沉淀，此时宜平衡至室温，并尽量溶解。如仍有残留的不溶物，可以离心去除后使用，经测试不会影响后续的检测效果。

待测药物的溶剂含量较高时可能会干扰萤光素酶反应，从而影响化学发光信号。可以通过设置含有溶剂的细胞培养液对照孔排除溶剂的干扰。经测试，最终反应体系中DMSO含量在2%以内不会对反应产生影响。

检测时需使用白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明的96孔板或384孔板，相邻孔之间会产生相互干扰。

使用说明中提供了检测ATP标准品的方法，实际检测细胞活力时通常并不需要检测ATP标准品。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。