产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
D4712-1μg | pMT/V5-His/lacZ (S2果蝇细胞阳性对照质粒) | 1μg | 888.00元 |
D4712-100μg | pMT/V5-His/lacZ (S2果蝇细胞阳性对照质粒) | 100μg | 1169.00元 |
pMT/V5-His/lacZ (S2果蝇细胞阳性对照质粒)是碧云天自行研发生产的S2果蝇细胞(Drosophila Schneider 2)诱导型表达质粒pMT/V5-His A (D4716),pMT/V5-His B (D4719)和pMT/V5-His C (D4721)的阳性对照质粒。本质粒转染S2果蝇细胞后,可通过β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒(RG0039)或Western Blot测定S2果蝇细胞中由lacZ基因的转录的β-半乳糖苷酶原(β-galactosidase)表达情况,评估S2果蝇细胞的转染效果、重组蛋白表达水平,辅助摸索磷酸钙法转染S2果蝇细胞的最佳条件。
S2果蝇细胞,也称S2果蝇胚胎细胞、S2细胞、S2昆虫细胞,源自20-24小时龄的黑腹果蝇胚胎晚期的原代细胞培养物[1]。S2果蝇细胞在培养皿或培养瓶中为半贴壁细胞,在摇瓶中为悬浮细胞,无需CO2,可在室温(26-28ºC)培养,生长速度快,细胞密度高,可通过瞬时转染或稳定细胞系表达外源重组蛋白,兼容无血清培养基,已广泛用于大规模重组蛋白的生产[2]。
本质粒采用的MT启动子(The Drosophila metallothionein promoter)受重金属离子的(Zn2+, Cd2+)的严格调控,因此S2果蝇细胞可通过加入CuSO4或CdCl2瞬时高效启动外源基因表达。建议使用500-1000μM CuSO4或10μM CdCl2诱导外源基因表达。CuSO4细胞毒性低于CdCl2,CdCl2启动效率高于CuSO4 [3]。
本质粒可与pCoPuro (D4701)、pCoBlast (D4705)或pCoHygro (D4708)共转染至S2果蝇细胞,后续通过嘌呤霉素(Puromycin Dihydrochloride) (ST551)、灭瘟素S (Blasticidin S HCl) (ST018)或潮霉素B (Hygromycin B) (ST1389)筛选得到诱导型表达β-半乳糖苷酶原的S2果蝇稳定细胞株。
本质粒含有V5标签(GKPIPNPLLGLDST)和His标签(HHHHHH),便于重组蛋白的检测和纯化。
本质粒具有氨苄青霉素(Ampicillin)抗性,可利用其氨苄青霉素抗性转化大肠杆菌后筛选阳性菌。
pMT/V5-His/lacZ质粒的图谱如下:
pMT/V5-His/lacZ质粒的主要信息如下:
Base pairs | 6554 |
M13 Forward | 379-395 |
MT promoter | 411-833 |
lacZ | 874-3918 |
MCS (Multiple Cloning Site) | 3919-3945 |
V5 Tag | 3946-3987 |
6X His Tag | 3997-4014 |
SV40 poly (A) signal | 4056-4190 |
M13 Reverse | 4334-4350 |
lac operator | 4358-4374 |
lac promoter | 4382-4412 |
CAP binding site | 4427-4448 |
ori | 4736-5324 |
Ampicillin | 5495-6355 |
Ampicillin promoter | 6356-6460 |
pMT/V5-His/lacZ表达基因的详细图谱见说明书:https://www.beyotime.com/Manual/D4712 pMT/V5-His/lacZ (S2果蝇细胞阳性对照质粒).pdf
pMT/V5-His/lacZ中没有的酶切位点包括:
AarI | AatI | AbsI | AccIII | AcvI | AflII | AjuI |
AloI | Aor13HI | ApaI | AscI | AsiSI | AspI | AspA2I |
AsuNHI | AvrII | BamHI | BarI | BbrPI | BbvCI | BfrI |
BglII | BlnI | BmtI | BoxI | BplI | BsaAI | BseAI |
Bsp13I | Bsp19I | Bsp68I | Bsp120I | Bsp1407I | BspEI | BspOI |
BspTI | BsrGI | BssT1I | Bst98I | BstAFI | BstAUI | BstBAI |
BstENI | BstPAI | BstSNI | BtuMI | Cfr9I | Cfr42I | CpoI |
CsiI | CspI | CspCI | Eco72I | Eco105I | Eco130I | Eco147I |
EcoNI | EcoRI | EcoT14I | EcoT22I | ErhI | FalI | FseI |
FspAI | I-CeuI | I-PpoI | I-SceI | KflI | Kpn2I | KspI |
MabI | Mph1103I | MreI | MroI | MspCI | Nb.BbvCI | NcoI |
NheI | NruI | NsiI | Nt.BbvCI | PacI | PalAI | PasI |
PceI | PflFI | PI-PspI | PI-SceI | PmaCI | PmlI | Ppu21I |
PpuMI | PshAI | Psp5II | PspCI | PspOMI | PspPPI | PsrI |
PsyI | RgaI | RigI | RruI | RsrII | Rsr2I | SacII |
SanDI | SexAI | SfaAI | SfiI | Sfr303I | SgfI | SgrAI |
SgrBI | SgrDI | SgsI | SmaI | SmiI | SnaBI | SrfI |
SseBI | SspBI | SstII | StuI | StyI | SwaI | TspMI |
Tth111I | Vha464I | XagI | XmaI | XmaCI | XmaJI | Zsp2I |
pMT/V5-His/lacZ中的单酶切位点包括:
Acc65I | AfeI | AgeI | AhdI | BlpI | BmgBI | Bpu10I |
BseRI | BsiWI | BspQI | BssHII | BstAPI | BstBI | BstEII |
BstZ17I | Bsu36I | DraIII | Eco53kI | EcoO109I | EcoRV | KasI |
KpnI | MauBI | MfeI | MscI | NarI | NotI | PaeR7I |
PluTI | PmeI | PsiI | PspXI | SacI | SalI | SapI |
SbfI | ScaI | SfoI | SpeI | XbaI | XhoI |
pMT/V5-His/lacZ质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
M13 Forward (379-395): 5'-GTAAAACGACGGCCAGT-3'
M13 Reverse (4334-4350): 5'-CAGGAAACAGCTATGAC-3'
pMT/V5-His/lacZ的全序列信息: D4712 pMT/V5-His/lacZ (S2果蝇细胞阳性对照质粒) 全序列.txt
包装清单:产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D4712-1µg | pMT/V5-His/lacZ (S2果蝇细胞阳性对照质粒) | 1µg |
D4712-100µg | pMT/V5-His/lacZ (S2果蝇细胞阳性对照质粒) | 100µg |
— | 说明书 | 1份 |
-20ºC保存。
注意事项:本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D4701-1µg | pCoPuro (S2果蝇细胞稳定细胞株筛选质粒) | 1µg |
D4701-100µg | pCoPuro (S2果蝇细胞稳定细胞株筛选质粒) | 100µg |
D4705-1µg | pCoBlast (S2果蝇细胞稳定细胞株筛选质粒) | 1µg |
D4705-100µg | pCoBlast (S2果蝇细胞稳定细胞株筛选质粒) | 100µg |
D4708-1µg | pCoHygro (S2果蝇细胞稳定细胞株筛选质粒) | 1µg |
D4708-100µg | pCoHygro (S2果蝇细胞稳定细胞株筛选质粒) | 100µg |
D4712-1µg | pMT/V5-His/lacZ (S2果蝇细胞阳性对照质粒) | 1µg |
D4712-100µg | pMT/V5-His/lacZ (S2果蝇细胞阳性对照质粒) | 100µg |
D4716-1µg | pMT/V5-His A (S2果蝇细胞诱导型表达质粒) | 1µg |
D4716-100µg | pMT/V5-His A (S2果蝇细胞诱导型表达质粒) | 100µg |
D4719-1µg | pMT/V5-His B (S2果蝇细胞诱导型表达质粒) | 1µg |
D4719-100µg | pMT/V5-His B (S2果蝇细胞诱导型表达质粒) | 100µg |
D4721-1µg | pMT/V5-His C (S2果蝇细胞诱导型表达质粒) | 1µg |
D4721-100µg | pMT/V5-His C (S2果蝇细胞诱导型表达质粒) | 100µg |
D4724-1µg | pMT/BiP/V5-His/EGFP (S2果蝇细胞阳性对照质粒) | 1µg |
D4724-100µg | pMT/BiP/V5-His/EGFP (S2果蝇细胞阳性对照质粒) | 100µg |
D4727-1µg | pMT/BiP/V5-His A (S2果蝇细胞诱导型表达质粒) | 1µg |
D4727-100µg | pMT/BiP/V5-His A (S2果蝇细胞诱导型表达质粒) | 100µg |
D4732-1µg | pMT/BiP/V5-His B (S2果蝇细胞诱导型表达质粒) | 1µg |
D4732-100µg | pMT/BiP/V5-His B (S2果蝇细胞诱导型表达质粒) | 100µg |
D4735-1µg | pMT/BiP/V5-His C (S2果蝇细胞诱导型表达质粒) | 1µg |
D4735-100µg | pMT/BiP/V5-His C (S2果蝇细胞诱导型表达质粒) | 100µg |
D4739-1µg | pMT/BiP/V5-His/CoPuro (S2果蝇细胞诱导型表达质粒) | 1µg |
D4739-100µg | pMT/BiP/V5-His/CoPuro (S2果蝇细胞诱导型表达质粒) | 100µg |
D4742-1µg | pMT/BiP/V5-His/CoPuro-P2A-mCherry (S2果蝇细胞诱导型表达质粒) | 1µg |
D4742-100µg | pMT/BiP/V5-His/CoPuro-P2A-mCherry (S2果蝇细胞诱导型表达质粒) | 100µg |
D4745-1µg | pMT/BiP/V5-His/CoPuro-P2A-ZsGreen (S2果蝇细胞诱导型表达质粒) | 1µg |
D4745-100µg | pMT/BiP/V5-His/CoPuro-P2A-ZsGreen (S2果蝇细胞诱导型表达质粒) | 100µg |
D4748-1µg | pAc5.1/V5-His/lacZ (S2果蝇细胞阳性对照质粒) | 1µg |
D4748-100µg | pAc5.1/V5-His/lacZ (S2果蝇细胞阳性对照质粒) | 100µg |
D4751-1µg | pAc5.1/V5-His A (S2果蝇细胞组成型表达质粒) | 1µg |
D4751-100µg | pAc5.1/V5-His A (S2果蝇细胞组成型表达质粒) | 100µg |
D4755-1µg | pAc5.1/V5-His B (S2果蝇细胞组成型表达质粒) | 1µg |
D4755-100µg | pAc5.1/V5-His B (S2果蝇细胞组成型表达质粒) | 100µg |
D4759-1µg | pAc5.1/V5-His C (S2果蝇细胞组成型表达质粒) | 1µg |
D4759-100µg | pAc5.1/V5-His C (S2果蝇细胞组成型表达质粒) | 100µg |