产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
D5893-100μl | BeyoFast™ ScaI | 100μl | 158.00元 |
碧云天生产的BeyoFast™系列快速内切酶是一系列经过基因工程重组、能够在5-15分钟内仅使用一种缓冲液就能快速完成DNA酶切的高品质限制性内切酶。
BeyoFast™系列快速内切酶适用于质粒DNA、PCR产物或基因组DNA等的快速酶切。
BeyoFast™系列快速内切酶具有如下优点。(1) 5-15分钟内就能完成酶切;(2) 所有BeyoFast™系列内切酶共用一种酶切缓冲液CutEZ™ Buffer,大大简化酶切反应体系,方便进行双酶切或多酶切;(3) 针对不同酶在CutEZ™ Buffer中活性存在差异的问题,调整了不同酶的浓度,可以统一按照每20μl体系加入1μl酶量的用量进行酶切反应;(4) Alkaline Phosphatase、Antarctic Phosphatase、T4 DNA Ligase、T4 Polynucleotide Kinase、T4 PNK (3' phosphatase minus)等很多修饰酶等都100%兼容CutEZ™ Buffer (具体的兼容性表请参考https://www.beyotime.com/product/D6018.htm),使“酶切-连接”和“酶切-修饰-连接”等反应体系可以兼容,支持一管化反应;(5) 良好的酶活冗余度,轻松应对底物过量或困难模板酶切。
酶活性检测:最适反应温度下,在20μl反应体系中,1μl BeyoFast™ ScaI能够在15min内完全消化1μg含有单个ScaI酶切位点的质粒。
图1.碧云天生产的BeyoFast™ ScaI (D5893)酶活性实测效果图。20μl反应体系中包含1μg pUCm-T载体(D2006) (2773bp),以及如图所示不添加或添加1µl BeyoFast™ ScaI,分别使用1X CutEZ™ Buffer和1X Easy-Load™ CutEZ™ Buffer,37ºC孵育15分钟进行酶切反应,随后80ºC孵育20分钟使酶失活,然后电泳并使用NA-Red (EB升级换代产品, 2000X) (D0128/D0130)进行核酸染色,再进行荧光成像分析。所使用的DNA marker为DNA Ladder (0.2-12 kb, 12 bands) (D0110)。实际检测效果会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异,图中效果仅供参考。
长时间酶切检测:最适反应温度下,将1μl BeyoFast™ ScaI与1μg λDNA共同温育3h,未检测到其他核酸酶污染或星号活性引起的底物非特异性降解,延时酶切可能出现星号活性。
酶切-连接-再酶切检测:最适反应温度下,使用1μl BeyoFast™ ScaI消化底物,回收酶切产物,在22ºC下使用适量T4 DNA Ligase可以将酶切产物重新连接,将连接产物再次回收后,使用相同的内切酶可以重新切开连接产物。
非特异性内切酶活性检测:最适反应温度下,将1μl BeyoFast™ ScaI与1μg超螺旋质粒DNA共同温育4h,使用琼脂糖凝胶电泳检测,质粒DNA仍然处于超螺旋状态。
蓝白斑检测:将含有单一lacZα基因的载体以1μl BeyoFast™ ScaI消化,重新连接后转化入大肠杆菌感受态细胞,涂布在含有对应抗生素、IPTG和X-gal的LB培养基平板上。连接正确的产物会生长出蓝色菌落,而连接错误(即DNA末端切口不完整)的产物将得到白色菌落。对于BeyoFast™系列限制酶而言,白色菌落比例应小于1%。
BeyoFast™ ScaI快速内切酶基本信息如下:
识别序列 | 同裂酶 | 酶切温度 | 失活条件 | 甲基化干扰? |
5'-AGT^ACT-3' 3'-TCA^TGA-5' |
BmcAI, ZrmI | 37ºC | 80ºC 20min | 有时有干扰 |
BeyoFast™ ScaI快速内切酶在不同反应缓冲液中的活性(缓冲液兼容性)如下:
Beyotime CutEZ™ Buffer | Beyotime Easy-Load™ CutEZ™ Buffer | Thermo FastDigest Buffer | NEB CutSmart® Buffer | Takara QuickCut™ Buffer |
100% | 100% | 100% | 100% | 100% |
注:活性数据来自碧云天BeyoFast™系列快速内切酶的标准反应体系下的检测。
BeyoFast™ ScaI快速内切酶识别位点的甲基化影响请参考下表:
Dam | Dcm | CpG | EcoKI | EcoBI |
无影响 | 无影响 | 无影响 | 无影响 | 序列可能重叠,剪切受阻 |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D5893-100μl | BeyoFast™ ScaI | 100μl |
D6018-1ml | 10X CutEZ™ Buffer | 1ml |
D6020-1ml | Easy-Load™ 10X CutEZ™ Buffer | 1ml |
— | 说明书 | 1份 |
-20ºC保存,两年有效。
注意事项:内切酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20ºC保存。
不含核酸酶的超纯水推荐选购碧云天的ST876 BeyoPure™ Ultrapure Water (DNase/RNase-Free, Sterile)。
如果发现预期的酶切位点不能切开,请确认是否存在甲基化干扰问题。
同裂酶对于不同的甲基化修饰可能具有不同敏感性,遇到可能存在甲基化干扰问题时,可以尝试同裂酶。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
Reagent | Plasmid DNA | PCR Product | Genomic DNA |
Ultrapure water | (17-x)µl | (26-x)µl | (40-x)µl |
10X CutEZ™ Buffer or Easy-Load™ 10X CutEZ™ Buffer |
2µl | 3µl | 5µl |
Substrate DNA | xµl (up to 1µg) | xµl (~0.2µg) | xµl (5µg) |
BeyoFast™ ScaI | 1µl | 1µl | 5µl |
Total volume | 20µl | 30µl | 50µl |
Incubate at 37ºC | 15min | 15-30min | 30-60min |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D5601-200μl | BeyoFast™ ApaLI | 200μl |
D5609-50μl | BeyoFast™ AscI | 50μl |
D5617-25μl | BeyoFast™ AvrII | 25μl |
D5625-500μl | BeyoFast™ BamHI | 500μl |
D5633-125μl | BeyoFast™ BclI | 125μl |
D5641-100μl | BeyoFast™ BglII | 100μl |
D5649-50μl | BeyoFast™ BsaI | 50μl |
D5653-20μl | BeyoFast™ BspQI | 20μl |
D5657-100μl | BeyoFast™ BstBI | 100μl |
D5665-100μl | BeyoFast™ BstEII | 100μl |
D5670-100μl | BeyoFast™ Cfr9I | 100μl |
D5673-50μl | BeyoFast™ ClaI | 50μl |
D5681-50μl | BeyoFast™ DpnI | 50μl |
D5689-50μl | BeyoFast™ DpnII | 50μl |
D5692-200μl | BeyoFast™ DraI | 200μl |
D5697-25μl | BeyoFast™ EagI | 25μl |
D5699-20μl | BeyoFast™ EarI | 20μl |
D5705-600μl | BeyoFast™ EcoRI | 600μl |
D5713-200μl | BeyoFast™ EcoRV | 200μl |
D5721-30μl | BeyoFast™ Esp3I (BsmBI) | 30μl |
D5729-50μl | BeyoFast™ FspI | 50μl |
D5737-500μl | BeyoFast™ HindIII | 500μl |
D5745-500μl | BeyoFast™ HinfI | 500μl |
D5753-50μl | BeyoFast™ HpaI | 50μl |
D5761-30μl | BeyoFast™ KasI | 30μl |
D5769-200μl | BeyoFast™ KpnI | 200μl |
D5777-100μl | BeyoFast™ MluI | 100μl |
D5785-50μl | BeyoFast™ MnlI | 50μl |
D5789-200μl | BeyoFast™ MspI | 200μl |
D5793-30μl | BeyoFast™ NcoI | 30μl |
D5801-200μl | BeyoFast™ NdeI | 200μl |
D5809-30μl | BeyoFast™ NheI | 30μl |
D5817-50μl | BeyoFast™ NotI | 50μl |
D5825-50μl | BeyoFast™ NruI | 50μl |
D5833-25μl | BeyoFast™ NsiI | 25μl |
D5841-25μl | BeyoFast™ PacI | 25μl |
D5847-50μl | BeyoFast™ PmeI | 50μl |
D5849-500μl | BeyoFast™ PstI | 500μl |
D5857-200μl | BeyoFast™ PvuII | 200μl |
D5865-100μl | BeyoFast™ SacI | 100μl |
D5873-50μl | BeyoFast™ SacII | 50μl |
D5881-200μl | BeyoFast™ SalI | 200μl |
D5885-20μl | BeyoFast™ SapI | 20μl |
D5889-25μl | BeyoFast™ SbfI | 25μl |
D5893-100μl | BeyoFast™ ScaI | 100μl |
D5897-100μl | BeyoFast™ SfiI | 100μl |
D5905-100μl | BeyoFast™ SmaI | 100μl |
D5913-50μl | BeyoFast™ SpeI | 50μl |
D5921-50μl | BeyoFast™ SphI | 50μl |
D5929-60μl | BeyoFast™ SspI | 60μl |
D5937-100μl | BeyoFast™ StuI | 100μl |
D5945-200μl | BeyoFast™ TaqI | 200μl |
D5953-500μl | BeyoFast™ XbaI | 500μl |
D5958-50μl | BeyoFast™ XcmI | 50μl |
D5961-500μl | BeyoFast™ XhoI | 500μl |
D5966-100μl | BeyoFast™ XmaI | 100μl |
D6055S/M/L/XL | BamHI | 10/40/200/800kU |
D6095S/M/L/XL | BglII | 2/10/40/200kU |
D6128S/M/L/XL | BsaI | 1/5/20/200kU |
D6132S/M/L/XL | BspQI | 400U/2kU/10kU/40kU |
D6176S/M/L | Cfr9I | 2/10/40kU |
D6257S/M/L/XL | DpnI | 500U/2.5KU/10KU/50KU |
D6272S/M/L | DraI | 4/20/100kU |
D6292S/M/L/XL | EarI | 400U/2kU/10kU/40kU |
D6333S/M/L/XL | EcoRI | 10/40/200/800kU |
D6339S/M/L/XL | EcoRV | 4/20/100/400kU |
D6392S/M/L/XL | HindIII | 10/40/200/1000kU |
D6418S/M | KpnI | 4/20kU |
D6470S/M/L/XL | MspI | 4/20/100/500kU |
D6482S/M/L/XL | NcoI | 800U/4kU/20kU/100kU |
D6486S/M/L | NdeI | 4/20/100kU |
D6490S/M/L/XL | NheI | 800U/4kU/20kU/100kU |
D6498S/M/L/XL | NotI | 1/4/20/100kU |
D6542S/M/L/XL | PmeI | 800U/4kU/20kU/100kU |
D6590S/M/L/XL | SapI | 400U/2kU/10kU/40kU |
D6607S/M/L/XL | ScaI | 2/10/40/200kU |
D6635S/M/L/XL | SmaI | 2/10/40/200kU |
D6715S/M/L | XbaI | 10/40/200kU |
D6718S/M/L/XL | XcmI | 1/4/20/100kU |
D6723S/M/L/XL | XhoI | 2/10/40/200kU |
D6730S/M/L | XmaI | 2/10/40kU |