产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
L16215 | NUAK1基因敲除质粒 | 5µg | 999.00元 |
L16216 | NUAK1基因敲除慢病毒 | 10^8 TU | 6999.00元 |
L16217 | NUAK1基因敲除HEK293T细胞 | 1支/瓶 | 7999.00元 |
L16218 | NUAK1基因敲除HEK293T细胞RIPA裂解液 | 100µg | 1258.00元 |
L16219 | NUAK1基因敲除HEK293T细胞Trizol裂解液 | 500µl | 1258.00元 |
NUAK1 Knockout HEK293T RIPA Lysate(NUAK1基因敲除HEK293T细胞RIPA裂解液)是通过同时表达Cas9、目的基因sgRNA和puromycin抗性基因并实现了目的基因CRISPR敲除的多克隆HEK293T细胞的RIPA裂解液。该细胞中目的基因的敲除已经通过T7EI法的验证。本产品可用于该目的基因敲除后其信号通路相关蛋白的研究,也可以用于该基因相应抗体的验证。
本RIPA裂解液源于可同时表达Cas9、目的基因sgRNA和puromycin抗性基因的慢病毒感染HEK293T细胞并经过puromycin筛选后获得的多克隆细胞。制备该细胞的相应慢病毒的基因序列的关键图谱信息请参考图1。
图1. 可同时表达sgRNA、Cas9和puromycin抗性的慢病毒其基因序列的关键图谱信息。
该细胞中目的基因的敲除已经通过T7EI法的验证。
由于本细胞是通过CRISPR/Cas9技术获得的多克隆细胞,基于CRISPR/Cas9技术的特点,理论上平均有2/3的细胞发生移码突变而导致了目的基因的敲除,平均有1/3的细胞并未发生移码突变。很多情况下有约2/3的细胞发生目的基因的敲除,已经足以进行很多的目的基因的生物学功能的研究了。如果希望获得100%基因敲除的细胞,可以自行使用本产品筛选单克隆细胞,或者委托碧云天进行单克隆细胞株的筛选服务。
本RIPA裂解液用于实验时,建议同时选购无任何靶向的对照细胞RIPA裂解液Control Knockout HEK293T RIPA Lysate (L00025)或靶向GFP的对照RIPA裂解液GFP Knockout HEK293T RIPA Lysate (L00027)。
碧云天同时提供基于CRISPR/Cas9技术的NUAK1基因敲除的质粒(L16215 pLenti-NUAK1-sgRNA)、慢病毒(L16216 NUAK1 Knockout Lentivirus)、HEK293T细胞(L16217 NUAK1 Knockout HEK293T Cells)、HEK293T敲除细胞的RIPA裂解液(L16218 NUAK1 Knockout HEK293T RIPA Lysate)、HEK293T敲除细胞的Trizol裂解液(L16219 NUAK1 Knockout HEK293T Trizol Lysate)等产品,具体请在碧云天网站查询或在本产品网页点击相应产品。
用于制备本产品的RIPA裂解液为碧云天生产的P0013B RIPA裂解液(强),其具体组分请查阅产品网页或说明书。
NUAK1基因的基本信息如下:
Species | Gene Symbol | Gene ID | GenBank Accession | Transcript |
Human | NUAK1 | 9891 | BC152462 | NM_014840 |
About the gene | |
Official Symbol | NUAK1 |
Previous Symbol | - |
Official Full Name | NUAK family kinase 1 |
Synonyms | ARK5; KIAA0537; NuaK1 |
Location | 12q23.3 |
Gene Type | protein_coding |
Uniprot ID | O60285 |
Pathway/Library | Kinases Library |
Gene Summary | Serine/threonine-protein kinase involved in various processes such as cell adhesion, regulation of cell ploidy and senescence, cell proliferation and tumor progression. Phosphorylates ATM, CASP6, LATS1, PPP1R12A and p53/TP53. Acts as a regulator of cellular senescence and cellular ploidy by mediating phosphorylation of 'Ser-464' of LATS1, thereby controlling its stability. Controls cell adhesion by regulating activity of the myosin protein phosphatase 1 (PP1) complex. Acts by mediating phosphorylation of PPP1R12A subunit of myosin PP1: phosphorylated PPP1R12A then interacts with 14-3-3, leading to reduced dephosphorylation of myosin MLC2 by myosin PP1. May be involved in DNA damage response: phosphorylates p53/TP53 at 'Ser-15' and 'Ser-392' and is recruited to the CDKN1A/WAF1 promoter to participate in transcription activation by p53/TP53. May also act as a tumor malignancy-associated factor by promoting tumor invasion and metastasis under regulation and phosphorylation by AKT1. Suppresses Fas-induced apoptosis by mediating phosphorylation of CASP6, thereby suppressing the activation of the caspase and the subsequent cleavage of CFLAR. Regulates UV radiation-induced DNA damage response mediated by CDKN1A. In association with STK11, phosphorylates CDKN1A in response to UV radiation and contributes to its degradation which is necessary for optimal DNA repair (PubMed:25329316). NUAK1_HUMAN,O60285 |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
L16218 | NUAK1 Knockout HEK293T RIPA Lysate | 100µg |
— | 说明书 | 1份 |
-20℃保存,3个月有效;-80℃保存,至少一年有效。
注意事项:碧云天拥有sgRNA序列的知识产权,如果需要sgRNA序列,请在订购后发送邮件向info@beyotime.com索取。sgRNA序列信息与本产品,未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。使用者在发表研究论文或结果时,应注明来源。
对于非目录产品的CRISPR基因敲除细胞RIPA裂解液的定制,可联系碧云天技术服务service@beyotime.com。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
L00025 | Control Knockout HEK293T RIPA Lysate | 100µg |
L00027 | GFP Knockout HEK293T RIPA Lysate | 100µg |
P0009 | BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型) | 5000次 |
P0010 | BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型) | 500次 |
P0010S | BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型) | 200次 |
P0011 | BCA蛋白浓度测定试剂盒 | 5000次 |
P0012 | BCA蛋白浓度测定试剂盒 | 500次 |
P0012S | BCA蛋白浓度测定试剂盒 | 200次 |
P0012A | SDS-PAGE凝胶配制试剂盒 | 可制30-50块胶 |
P0012AC | SDS-PAGE凝胶快速配制试剂盒 | 可制30-50块胶 |
P0013B | RIPA裂解液(强) | 100ml |
P0014A/B | SDS-PAGE电泳液(Tris-Gly, Powder) | 1/10L |
P0014C/D | SDS-PAGE电泳液(Tris-Gly, 10X) | 100/500ml |
P0015 | SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X) | 2ml |
P0015L | SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X) | 15ml |
P0015B | SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(2X) | 5ml |
P0015F | SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(6X) | 2ml |