产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
P0971FT | GAPDH超快速Western检测试剂盒(试用装) | 1-3次 | .00元 |
碧云天研发生产的GAPDH超快速Western检测试剂盒(Superquick Western Assay Kit for GAPDH),是一种仅需10分钟就可以从完成转印的印迹膜到获得内参蛋白GAPDH条带的超快速Western检测试剂盒。本试剂盒包含了Anti-GAPDH-HRP、QuickBlock™封闭和抗体稀释液、Western洗涤液、以及BeyoECL Star化学发光试剂的试剂盒,一抗和二抗孵育合并为一步操作,使用便捷,背景低,包含从封闭到化学发光的整套试剂,转膜完成后通常10分钟就可以得到高质量的内参蛋白Western结果,可以极大加快内参蛋白的检测速度。
本试剂盒可以兼容检测人、小鼠、大鼠等的GAPDH。
内参是在各种组织和细胞中都组成性表达的蛋白,并且表达水平相对恒定,很少受外部诱导物的影响,因此被广泛用作Western蛋白质上样量是否一致的参照(Loading control)。但不同细胞、组织及不同条件甚至不同的蛋白上样量,对内参蛋白的检测会有一定的影响,所以建议进行一种或多种内参蛋白的检测[1-4]。
本系列产品目前包括Actin/GAPDH/Tubulin超快速Western检测试剂盒(P0970/P0971/P0972)。
本试剂盒中的QuickBlock™封闭和抗体稀释液,可同时用于印迹膜的封闭和抗体的稀释。封闭时间仅需1分钟,总体效果显著优于传统的基于BSA(牛血清白蛋白)、脱脂奶粉、酪蛋白(Casein)等的封闭液。本产品稀释和配制的内参抗体工作液,可以在4ºC保存和使用不少于1个月,并且可以重复使用。
本试剂盒使用了Anti-GAPDH-HRP,因此一抗和二抗的孵育仅需一步即可完成。抗体特异性高、灵敏度极佳,使用浓度经过优化,按照1:500比例稀释,室温通常孵育5分钟即可进行后续的洗涤和检测。
本试剂盒中提供的BeyoECL Star化学发光试剂,灵敏度高、背景极低、发光时间长,适用于大多数常规的Western检测。特殊情况下,如果成像效果需要优化,可根据当前实验结果选择灵敏度更高的BeyoECL Moon (P0018F)或BeyoECL SuperMoon (P0018H)。
使用本试剂盒从完成转印的印迹膜开始实际操作约10分钟,检测获得的GAPDH条带的效果,请参见图1。
图1.碧云天GAPDH超快速Western检测试剂盒(P0971)的检测效果图。其中293T细胞裂解液蛋白浓度为2.7mg/ml,Hela细胞裂解液蛋白浓度为2.5mg/ml。QuickBlock™封闭和抗体稀释液封闭1分钟,抗体稀释比例为1:500,抗体孵育5分钟。Western印迹成像由BeyoImager™ 600化学发光成像系统(EI600)完成。曝光时间:293T和HeLa样品为10秒,小鼠肝脏组织为4秒。GAPDH的分子量约36kDa。根据灰度分析,各蛋白裂解液样品的GAPDH条带灰度与上样量成相应的比例关系。实际实验结果会因样品、抗体、实验条件等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。
如果检测的是6.6×8.5cm印迹膜,按照每次Western封闭需要QuickBlock™封闭和抗体稀释液5ml,稀释抗体需要QuickBlock™封闭和抗体稀释液5ml,抗体10μl,稀释后的抗体共计可以使用3次,洗涤液每次使用10ml,化学发光试剂工作液每次需要1ml计算,本试剂盒小包装和中包装分别可以进行6次和30次GAPDH的Western快速检测。如果检测的是更常见的裁切后的约2×8.5cm印迹膜,按照封闭以及抗体孵育液体用量为每次2ml,洗涤液用量每次4ml,发光试剂工作液用量每次0.4ml计算,小包装和中包装分别可以检测15次和75次。
包装清单:产品编号 | 产品名称 | 包装 |
P0971FT-1 | Anti-GAPDH-HRP | 4μl |
P0971FT-2 | QuickBlock™封闭和抗体稀释液 | 8ml |
P0971FT-3 | Western洗涤液 | 40ml |
P0971FT-4 | BeyoECL Star A液 | 600μl |
P0971FT-5 | BeyoECL Star B液 | 600μl |
- | 说明书 | 1份 |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
P0971S-1 | Anti-GAPDH-HRP | 20μl |
P0971S-2 | QuickBlock™封闭和抗体稀释液 | 40ml |
P0971S-3 | Western洗涤液 | 200ml |
P0971S-4 | BeyoECL Star A液 | 3ml |
P0971S-5 | BeyoECL Star B液 | 3ml |
- | 说明书 | 1份 |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
P0971M-1 | Anti-GAPDH-HRP | 100μl |
P0971M-2 | QuickBlock™封闭和抗体稀释液 | 200ml |
P0971M-3 | Western洗涤液 | 2×500ml |
P0971M-4 | BeyoECL Star A液 | 15ml |
P0971M-5 | BeyoECL Star B液 | 15ml |
- | 说明书 | 1份 |
-20ºC保存,一年有效。QuickBlock™封闭和抗体稀释液、Western洗涤液以及BeyoECL Star A液和B液,4ºC保存,至少6个月有效。
注意事项:本产品可用于人、小鼠、大鼠的GAPDH的检测,其它种属建议先进行预实验。
请注意回收使用过的抗体工作液。回收的抗体工作液可以再重复使用2次。稀释后的抗体,包括使用过的抗体工作液,请4℃保存。
回收后重复使用的抗体工作液,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10,000×g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体工作液出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
使用本产品,通常10分钟可得到高质量的内参蛋白Western结果,即封闭1分钟、抗体孵育5分钟、洗涤30秒3次、BeyoECL试剂孵育1分钟、成像通常0.5分钟之内。
对于6.6×8.5cm的印迹膜,推荐使用碧云天的Western洗膜盒(FFX050)进行洗涤和孵育;对于裁切后的条形印迹膜,推荐使用碧云天的5格Western洗膜盒(FFX055)进行洗涤和孵育。
个别情况,如果希望获得到更好的Western结果,可适当增加封闭、抗体孵育及洗涤的时间,并适当优化成像的曝光时间。
BeyoECL Star A液和B液均对人体有害,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
P0970S | Actin超快速Western检测试剂盒 | 6-15次 |
P0970M | Actin超快速Western检测试剂盒 | 30-75次 |
P0971S | GAPDH超快速Western检测试剂盒 | 6-15次 |
P0971M | GAPDH超快速Western检测试剂盒 | 30-75次 |
P0972S | Tubulin超快速Western检测试剂盒 | 6-15次 |
P0972M | Tubulin超快速Western检测试剂盒 | 30-75次 |
P0981S | Flag标签蛋白超快速Western检测试剂盒 | 6-15次 |
P0981M | Flag标签蛋白超快速Western检测试剂盒 | 30-75次 |
P0982S | HA标签蛋白超快速Western检测试剂盒 | 6-15次 |
P0982M | HA标签蛋白超快速Western检测试剂盒 | 30-75次 |
P0983S | Myc标签蛋白超快速Western检测试剂盒 | 6-15次 |
P0983M | Myc标签蛋白超快速Western检测试剂盒 | 30-75次 |
P0984S | His标签蛋白超快速Western检测试剂盒 | 6-15次 |
P0984M | His标签蛋白超快速Western检测试剂盒 | 30-75次 |
P0985S | His标签蛋白(C-terminal)超快速Western检测试剂盒 | 6-15次 |
P0986S | GFP标签蛋白超快速Western检测试剂盒 | 6-15次 |
P0986M | GFP标签蛋白超快速Western检测试剂盒 | 30-75次 |
P0987S | GST标签蛋白超快速Western检测试剂盒 | 6-15次 |
P0988S | V5标签蛋白超快速Western检测试剂盒 | 6-15次 |
P0990S | MBP标签蛋白超快速Western检测试剂盒 | 6-15次 |
P0992S | StrepII标签蛋白超快速Western检测试剂盒 | 6-15次 |
P0997S | AVI标签蛋白超快速Western检测试剂盒 | 6-15次 |