碧云天的BeyoMag™ GST标签蛋白纯化琼脂糖磁珠，英文名为BeyoMag™ Magnetic Agarose Beads for GST-Tag Protein Purification，也称BeyoMag™ GSH Magnetic Agarose Beads，即GST标签蛋白纯化磁珠、GST纯化琼脂糖磁珠、GST磁珠、GSH琼脂糖磁珠(Magarose)、GST琼脂糖磁珠、谷胱甘肽琼脂糖磁珠，由高质量的还原型L-谷胱甘肽(L-Glutathione reduced, GSH)共价偶联至琼脂糖磁珠制备而成，可特异性地与动植物或者微生物裂解液、血清、腹水等样品中含有GST标签的蛋白结合，从而用于带有GST标签的蛋白或蛋白复合物的纯化、免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)或免疫共沉淀(Co-IP)。本产品可以耐受6M盐酸胍或8M尿素。

GST标签(GST-tag)、His标签(His-tag)、Flag标签(Flag-tag)、Myc标签(Myc-tag)和HA标签(HA-tag)等是最常见的一些标签，通过与这些标签的融合表达可以非常方便地检测目的蛋白及与目的蛋白相互结合的蛋白，也可以非常方便地用于目的蛋白的纯化。

GST标签，即谷胱甘肽S-转移酶(Glutathione S-transferase)标签，GST本身是一个在解毒过程中起到重要作用的转移酶，分子量约为26kDa，可融合在蛋白的N端或者C端，在大肠杆菌中常融合于N端。GST标签具有以下优点：能增加外源蛋白的可溶性和表达量；可在不同的宿主如大肠杆菌和酵母中表达，适用范围广；可很好保留了蛋白的抗原性和生物活性，有助于保护重组蛋白免受胞外蛋白酶的降解并提高其稳定性；如果在GST标签和目的蛋白之间含有位点特异性的蛋白酶识别位点，如PreScission Protease、TEV Protease或Thrombin等，则可用相应的蛋白酶切除GST标签，方便去除；高特异性，纯化方便且温和；GST标签作为标签蛋白，后续通过GST抗体(AF2888)或Anti-GST磁珠(P2138)、BeyoGold™ GST-tag Purification Resin (P2250)、GST标签蛋白纯化试剂盒(P2262)等即可对目的基因的表达、定位及功能进行检测或对目的蛋白进行纯化、免疫沉淀或免疫共沉淀等。基于以上优点，GST标签已被广泛应用于蛋白表达、纯化、鉴定、相互作用和功能等多方面的研究。一般使用GST纯化柱对GST标签蛋白进行纯化[1,2]，但对于带有GST标签的融合蛋白或蛋白复合物的少量纯化或免疫沉淀等应用，GST标签蛋白纯化琼脂糖磁珠更简单、便捷。

BeyoMag™ GST标签蛋白纯化琼脂糖磁珠，简称GST纯化琼脂糖磁珠，可特异性地结合GST标签融合蛋白，并可以借助磁力架等磁分离设备非常便捷地应用于带有GST标签的融合蛋白或其蛋白复合物的纯化或免疫沉淀等实验。本产品的工作原理与操作流程请参考图1。

图1. 碧云天BeyoMag™ GST标签蛋白纯化琼脂糖磁珠(P2258)工作原理与操作流程图。

本产品稳定性高、特异性强、靶蛋白结合量高。与国内外大多数的同类产品相比，本产品还原型L-谷胱甘肽(GSH)配基密度高，对带有GST标签蛋白的结合具有很强的特异性。本产品每毫升悬浊液含约25%琼脂糖磁珠沉淀，含有不少于30-50μmol/ml的GSH，通常每毫升磁珠(磁珠沉淀的体积)可结合10-20mg GST标签融合蛋白，具体的最大结合量和标签蛋白的分子量大小等相关。

本产品可结合多种形式的GST标签蛋白。本产品可特异性地结合氨基端(N端)有甲硫氨酸的N端GST融合蛋白(Met-GST-Protein)、N端GST融合蛋白(GST-Protein)、C端GST融合蛋白(Protein-GST)。

本产品结合目的蛋白速度快。本产品使用了GST纯化琼脂糖磁珠，粒径在100μm左右。通常30分钟内即可完成GST蛋白吸附的过程，60分钟内完成目的蛋白纯化或免疫沉淀操作。缩短操作时间可以有效避免在长时间操作过程中目的蛋白的降解或变性，充分保证目的蛋白的活性。

本产品可高效洗脱GST标签蛋白。本产品根据目的蛋白的结构、生物学功能及后续应用的要求等，使用还原型L-谷胱甘肽(GSH)进行多次洗脱。洗脱时间短，洗脱效率高。本产品及同类产品Competitor G用于GST标签融合蛋白的纯化效果参考图2。

图2. 碧云天BeyoMag™ GST标签蛋白纯化琼脂糖磁珠(P2258)用于GST标签融合蛋白的纯化效果图。样品1为细菌裂解液，即大肠杆菌中GST标签融合蛋白全细菌裂解液；样品2、3分别为GST纯化琼脂糖磁珠洗脱第一次、第二次的样品；样品4、5分别为G公司同类产品(Competitor G)洗脱第一次、第二次的样品。实际结果会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异，本图仅供参考。

本产品使用便捷。本产品储存在特殊保护液中，不含甘油，可以通过磁性吸附实现快速高效的分离，无需离心操作。

本产品的主要指标如下表：

本产品每毫升悬浊液中共含约0.25ml琼脂糖磁珠沉淀。本产品标注的体积为悬浊液总体积。每毫升悬浊液可以用于纯化2-3mg分子量约为60kDa的GST标签蛋白。GST标签蛋白分子量的大小会影响本产品可以纯化的目的蛋白的毫克数。

-20ºC保存，两年有效。4ºC保存，一年有效。

本GST纯化琼脂糖磁珠经测试，冻融3次不影响效价，但仍建议适当分装减少冻融次数。频繁使用建议4ºC保存。

本GST纯化琼脂糖磁珠可以耐受6M盐酸胍或8M尿素，但GST标签蛋白的纯化应始终保持在非变性条件下，如果融合蛋白以包涵体形式表达，在使用8M尿素或6M盐酸胍溶解包涵体后，需通过透析去除尿素或盐酸胍并使蛋白复性后才能使用本产品进行纯化。

本产品需维持pH为6-8，避免高速离心、干燥；请勿长时间将磁珠置于磁场中，否则可能会引起磁珠聚团。

本产品使用前要适当充分重悬，即颠倒若干次使磁珠混合均匀，混匀操作须轻柔，不宜剧烈涡旋震荡。

在纯化或免疫沉淀时，建议设置阳性和阴性对照组。

Elution Buffer中含有的GSH易被氧化，建议现配现用。

样品及缓冲液中加入1-10mM的DTT，有助于促进部分GST融合蛋白与GST纯化琼脂糖磁珠的结合。

蛋白样品收集后宜尽快完成纯化工作，并应始终放置在4ºC或冰浴，以减缓蛋白降解或变性。为有效抑制蛋白降解，可以在蛋白样品中添加适量的蛋白酶抑制剂混合物，例如碧云天的蛋白酶抑制剂混合物(通用型) (P1005/P1006)、蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(通用型, 质谱兼容, 50X) (P1048/P1049)、蛋白酶抑制剂混合物(哺乳动物样品抽提用, 100X) (P1010/P1011)、蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(哺乳动物样品抽提用, 50X) (P1050/P1051)等。

如果使用真空泵等仪器吸取上清液，须注意真空泵的吸液强度，以免吸力过大而吸取到聚集的磁珠。

0.1%的非离子型去垢剂(如Triton X-100、Tween-20或NP-40)可有效防止磁珠聚集，并且不会影响磁珠的抗体结合效率。

高浓度的DTT、巯基乙醇、盐酸胍等对本产品与标签蛋白的结合可能有一定影响，但Western及IP细胞裂解液(P0013)、RIPA裂解液(P0013B/C/D)或NP-40裂解液(P0013F)等都完全适用。碧云天生产的不同裂解液的主要特点和差异，以及如何选择裂解液可参考我们的相关网页：http://www.beyotime.com/support/lysis-buffer.htm。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。