化学信息：
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化学名
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5-methyl-2-(2-propan-2-ylphenyl)-N-[[4-(triazol-1-yl)phenyl]methyl]pyrimidin-4-amine
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简称
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DBeq
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别名
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N2,N4-dibenzylquinazoline-2,4-diamine, N,N'-dibenzylquinazoline-2,4-diamine, 2-N,4-N-dibenzylquinazoline-2,4-diamine
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中文名
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N/A
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化学式
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C22H20N4
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分子量
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340.42
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CAS号
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177355-84-9
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纯度
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98%
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溶剂/溶解度
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Water<1mg/ml; DMSO68mg/ml; Ethanol5mg/ml
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溶液配制
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5mg加入1.47ml DMSO，或者每3.4mg加入1ml DMSO，配制成10mM溶液。SG0006-10mM用DMSO配制。
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生物信息：
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产品描述
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DBeQ是一种选择性的，有效的，可逆的，ATP竞争性的p97抑制剂，IC50为1.5μM。
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信号通路
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Ubiquitin
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靶点
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p97
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－
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IC50
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1.5μM
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－
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－
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－
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体外研究
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DBeQ作用于HeLa细胞，抑制UbG76V-GFP、ODD-Luc和Luc-ODC降解，IC50分别为2.6μM、56μM和45μM。DBeQ作用于N-ethylmaleimide-敏感因子(NSF)和26S蛋白酶，效果至少低50倍。DBeQ与ATP竞争性抑制P97，Ki为3.2μM，说明DBeQ结合到D2域的活性位点。DBeQ(10μM)作用于HEK293细胞，有效抑制TCRα-GFP降解。DBeQ作用于HEK293细胞，3小时内诱导CHOP，但不增加p21水平，这种作用存在浓度依赖性。DBeQ(15μM)作用于Hela细胞，诱导LC3-II在在细胞核及浓缩膜和胞质级组分中大量积累。DBeQ作用于HeLa细胞，通过抑制LC3-II自噬降解，而不是诱导自噬，而发挥作用。DBeQ(10μM)作用于HeLa细胞，快速促进caspases-3和-7激活。比激活外在caspase-8通路，DBeQ更有效激活内在caspase-9凋亡途径，而STS激活两种途径程度相似。DBeQ作用于多发性骨髓瘤细胞(RPMI8226)比作用于正常人胚肺成纤维细胞(MRC5)效果强5倍，HeLa细胞和Hek293细胞具有中等的敏感性。在ERAD和自噬途径内，DBeQ干扰底物降解。DBeQ(12μM)作用于HeLa细胞中。抑制细胞中和，这种作用存在剂量依赖性。DBeQ(10μM)完全抑制病毒和抗体的降解，但不抑制IgG Fc的降解。DBeQ作用于U20S细胞，降低基本的和营养刺激的MTOR靶点磷酸化，与Rapamycin 效果类似。
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体内研究
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N/A
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临床实验
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N/A
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特征
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DBeQ快速有效地诱导caspase激活和细胞死亡。
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相关实验数据(此数据来自于公开文献，碧云天并不保证其有效性)：
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酶活性检测实验
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方法
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实验Buffer [20μl 2.5×浓度，1×=50mM Tris (pH 7.4)，20mM MgCl2，1mM EDTA和0.5mM tris(2-carboxyethyl)phosphine (TCEP)]加到96孔板中。纯化的p97(25μl 50μM)975μl 1×实验 Buffer中稀释，然后每孔中加入10μl。每孔加入DBeQ(10μl)或5% DMSO(10μl)，实验板在室温下温育10分钟。按如下进行ATP酶实验：每孔加入10μl 500μM ATP (pH 7.5)，在室温下温育60分钟，然后加入50μl Kinase Glo Plus试剂,随后在室温下黑暗环境中温育10分钟。使用 Analyst AD读取发光值。在一个浓度范围(0、0.048、0.24、1.2、6和30μM)按一式三份测定DBeQ。
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细胞实验
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细胞系
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MRC-5，Hek293，HeLa和RPMI8226细胞
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浓度
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33μM
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处理时间
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48小时
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方法
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细胞按每孔5000个接种于384孔白色固体板中。使用荧光素酶siRNA或p97siRNA(10nM)进行细胞转染48小时，或在指定时间使用DBeQ处理。每孔加入Caspase-3/7 Glo，caspase-6 Glo，caspase-8 Glo或caspase-9，按500rpm震荡混合1分钟。在室温下温育1小时后，测定发光信号。使用CellTiter-Glo试剂测定细胞存活力。为了测定细胞活力的IC50，使用七种浓度的MG132或DBeQ(开始于μM的三倍连续稀释液)处理细胞48小时。拟合发光信号归一化DMSO处理细胞的百分比，计算IC50值。
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动物实验
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动物模型
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N/A
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配制
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N/A
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剂量
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N/A
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给药方式
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N/A
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参考文献：
1. Chou TF, et al. Proc Natl Acad Sci USA, 2011, 108(12), 4834-4839.
2. Chou TF, et al. Autophagy, 2011, 7(9), 1091-1092.
3. Hauler F, et al. Proc Natl Acad Sci USA, 2012, 109(48), 19733-19738.
4. Ching JK, et al. Autophagy, 2013, 9(5), 799-800.
包装清单：
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产品编号
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产品名称
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包装
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SG0006-10mM
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DBeq (p97抑制剂)
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10mM×0.2ml
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SG0006-5mg
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DBeq (p97抑制剂)
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5mg
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SG0006-25mg
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DBeq (p97抑制剂)
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25mg
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说明书
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1份
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保存条件：
-20℃保存，至少一年有效。5mg和25mg包装也可室温保存，至少6个月有效。如果溶于非DMSO溶剂，建议分装后-80℃保存，预计6个月内有效。
注意事项：
本产品对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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